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花生油脂合成酰基转移酶基因表达与籽仁含油量相关性分析

中文摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-18页
    1.1 种子主要储藏物质积累过程第11-12页
    1.2 植物油脂的生物合成途径第12-13页
    1.3 甘油3磷酸酰基转移酶基因(GPAT)的研究进展第13-14页
    1.4 溶血磷脂酸酰基转移酶基因(LPAAT)的研究进展第14-16页
    1.5 二酰甘油酰基转移酶基因(DGAT)的研究进展第16-17页
    1.6 花生基因组研究进展第17-18页
    1.7 研究目的与意义第18页
2 材料与方法第18-29页
    2.1 材料第18-19页
        2.1.1 植物材料第18页
        2.1.2 主要试剂及质粒菌株第18-19页
    2.2 试验方法第19-29页
        2.2.1 花生种子含油量的测定第19页
        2.2.2 取样方法第19-20页
        2.2.3 籽仁RNA提取及cDNA合成第20-21页
        2.2.4 总RNA及其逆转录产物的检测第21-22页
        2.2.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)引物设计与筛选第22-23页
        2.2.6 花生GPAT9、LPAAT、DGAT1-2cDNA序列的PCR扩增第23-24页
        2.2.7 PCR产物的胶回收第24页
        2.2.8 目的片段与pEASY-T1载体连接并转化大肠杆菌第24-25页
        2.2.9 取阳性重组子测序第25-26页
        2.2.10 qRT-PCR反应及数据处理第26页
        2.2.11 花生GPAT9基因的遗传转化第26-29页
            2.2.11.1GPAT9与RGPAT9基因转化花生及PPT抗性苗的获得第26-27页
            2.2.11.2 抗性苗的PCR鉴定第27-29页
            2.2.11.3 转基因植株的移栽第29页
3 结果与分析第29-68页
    3.1 花生种子含油量的分析第29-35页
    3.2 籽仁总RNA及cDNA的电泳检测第35-36页
    3.3 荧光定量PCR特异性引物筛选第36-40页
        3.3.1 GPAT9特异引物筛选第36页
        3.3.2 LPAAT特异引物筛选第36-37页
        3.3.3 DGAT1-2 的引物筛选第37-38页
        3.3.4 内参基因的引物筛选第38-40页
    3.4 不同含油量花生品种酰基转移酶基因的表达分析第40-61页
        3.4.1 不同含油量花生品种GPAT9表达特征分析第40-47页
        3.4.2 不同含油量花生品种LPAAT表达特征分析第47-53页
        3.4.3 不同含油量花生品种DGAT1-2 表达特征分析第53-59页
        3.4.4 不同亚基因组酰基转移酶基因表达丰度分析第59-61页
    3.5 种质资源含油量与酰基转移酶基因表达的相关性分析第61-63页
        3.5.1 单个酰基转移酶基因表达量与含油量的相关性分析第61-62页
        3.5.2 DGAT1-2 与GPAT9、LPAAT表达量比值与种子含油量的相关性分析第62-63页
    3.6 基因表达数据的主成分分析第63-66页
        3.6.1 R4期基因表达数据的主成分分析第63-64页
        3.6.2 R5期基因表达数据的主成分分析第64-65页
        3.6.3 R6期基因表达数据的主成分分析第65-66页
    3.7 花生GPAT9与RGPAT9基因的遗传转化第66-68页
        3.7.1 GPAT9与RGPAT9基因转化花生及PPT抗性苗的获得第66-67页
        3.7.2 抗性苗的PCR鉴定第67-68页
4 讨论第68-70页
    4.1 本研究取样时期设计问题第68页
    4.2 品种(系)间含油量差异的重要原因第68-69页
    4.3 三类酰基转移酶基因在花生亚基因组中表达特性分析第69-70页
5 结论第70-71页
参考文献第71-78页
附录第78-82页
致谢第82页

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