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中间偃麦草天冬氨酸蛋白酶基因TiAP1的功能分析

符号说明第4-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-22页
    1.1 小麦白粉病菌的研究进展第11-13页
        1.1.1 小麦白粉病的发生及危害第11-12页
        1.1.2 小麦白粉病的防治第12-13页
    1.2 小麦赤霉病的研究进展第13-16页
        1.2.1 小麦赤霉病的发生及危害第13-15页
        1.2.2 小麦赤霉病的防治第15页
        1.2.3 小麦抗赤霉病的机制分析第15-16页
    1.3 天冬氨酸蛋白酶的研究进展第16-19页
        1.3.1 天冬氨酸蛋白酶的概述第16-17页
        1.3.2 天冬氨酸蛋白酶的功能研究进展第17-19页
    1.4 植物抗病机制研究进展第19-21页
        1.4.1 植物的抗病性反应第19页
            1.4.1.1 基本抗性第19页
            1.4.1.2 诱导抗性第19页
        1.4.2 植物抗病信号转导途径第19-21页
            1.4.2.1 活性氧(ROS)信号转导途径第20页
            1.4.2.2 一氧化氮(NO)信号转导途径第20页
            1.4.2.3 水杨酸(SA)信号转导途径第20-21页
            1.4.2.4 茉莉酸/乙烯(JA/ET)信号转导途径第21页
    1.5 研究目的与意义第21-22页
    1.6 主要研究内容第22页
2 材料与方法第22-40页
    2.1 植物材料第22页
    2.2 菌株与载体第22页
    2.3 生化试剂第22-23页
    2.4 主要溶液配方第23-24页
    2.5 主要仪器第24页
    2.6 引物的设计与合成第24-25页
    2.7 方法第25-40页
        2.7.1 TiAP1蛋白的生物信息学分析第25页
        2.7.2 TiAP1原核表达载体的构建第25-30页
        2.7.3 TiAP1蛋白的诱导表达第30-31页
        2.7.4 TiAP1蛋白纯化第31-33页
        2.7.5 TiAP1蛋白的抑制真菌的功能分析第33页
        2.7.6.拟南芥转化及对Pst DC3000的抗性第33-35页
        2.7.7 小麦转化及抗性鉴定第35-40页
3 结果与分析第40-57页
    3.1 TiAP1蛋白的生物信息学分析第40-42页
    3.2 TiAP1基因的原核表达第42-51页
        3.2.1 TiAP1基因的原核表达载体的构建第42-43页
        3.2.2 pET-AP1重组质粒转化BL21表达菌株第43-44页
        3.2.3 蛋白的诱导表达第44-45页
        3.2.4 蛋白的纯化第45-47页
        3.2.5 蛋白的功能验证第47-51页
    3.3 转TiAP1拟南芥抗菌鉴定第51-54页
        3.3.1 转TiAP1拟南芥的获得第51-52页
        3.3.2 Pst DC3000病菌处理后的转基因拟南芥染色观察第52-54页
    3.4 转TiAP1小麦植株抗白粉病鉴定第54-56页
    3.5 激素诱导下TiAP1基因的表达分析第56-57页
4 讨论第57-60页
    4.1 TiAP1蛋白可以抑制孢子萌发以及增加细胞膜的通透性第57-58页
    4.2 TiAP1基因可以增强拟南芥对Pst DC3000的抗性第58-59页
    4.3 TiAP1基因可以增强小麦对白粉病的抗性第59-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间发表论文第69页

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