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小麦nsLTPs基因及启动子的克隆与功能分析

中文摘要第8-9页
Abstract第9页
1 引言第10-20页
    1.1 植物耐冷机制研究进展第10-13页
        1.1.1 低温冷害对植物的影响第11-12页
        1.1.2 低温冷害对小麦的影响第12-13页
    1.2 植物非特异转脂蛋白研究进展第13-17页
        1.2.1 植物非特异转脂蛋白简述第13页
        1.2.2 植物非特异转脂蛋白分类与结构第13-14页
        1.2.3 植物非特异转脂蛋白的功能第14-16页
            1.2.3.1 植物非特异转脂蛋白参与角质层合成第15页
            1.2.3.2 植物非特异转脂蛋白参与抗病抗逆第15页
            1.2.3.3 植物非特异转脂蛋白的其他功能第15-16页
        1.2.4 植物非特异转脂蛋白的表达第16-17页
    1.3 植物表皮细胞转录调控与nsLTP基因第17-18页
        1.3.1 植物表皮转录表达调控研究现状第17页
        1.3.2 植物表皮转录调控与TaLTP启动子第17-18页
    1.4 研究目的与意义第18-20页
2 材料与方法第20-34页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 菌株与质粒第20页
        2.1.3 酶及生化试剂第20页
        2.1.4 主要溶液及培养基配方第20-21页
        2.1.5 主要仪器第21页
        2.1.6 引物的设计与合成第21-22页
    2.2 方法第22-34页
        2.2.1 小麦叶片基因组的RNA提取第22-23页
        2.2.2 小麦叶片基因组的DNA提取第23-24页
        2.2.3 第一链cDNA的合成第24-25页
        2.2.4 PCR产物的回收纯化(参考天根DNA回收试剂盒说明书)第25页
        2.2.5 目的片段的连接第25页
        2.2.6 大肠杆菌转化(参考天根DH5α 感受态说明书)第25页
        2.2.7 阳性克隆的筛选第25-26页
        2.2.8 质粒小量提取(参考天根快速质粒小提说明书)第26页
        2.2.9 亚细胞定位载体的构建第26-27页
        2.2.10 农杆菌感受态的制备第27页
        2.2.11 冻融法转化农杆菌感受态第27-28页
        2.2.12 烟草农杆菌法亚细胞定位步骤第28页
        2.2.13 洋葱基因枪法亚细胞定位步骤第28-29页
        2.2.14 激光共聚焦显微镜观察亚细胞定位步骤第29-30页
        2.2.15 系统发育树分析与染色体定位第30页
        2.2.16 非生物胁迫及激素诱导下的实时荧光定量PCR第30页
        2.2.17 TaLTPIb.1 启动子与GUS融合载体的构建及短柄草转化第30-32页
        2.2.18 拟南芥转基因与胁迫下表型分析第32-34页
3 结果与分析第34-50页
    3.1 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 基因系统进化分析第34-35页
    3.2 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 基因的染色体定位第35-36页
    3.3 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 在胁迫下的表达模式第36-40页
    3.4 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 转基因拟南芥胁迫下表型分析第40-41页
    3.5 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 基因的亚细胞定位第41-43页
    3.6 TaLTPIb.1 基因的表达定位第43-44页
    3.7 TaLTPIb.1 顺式作用元件的分析第44-46页
    3.8 TaLTPIb.1 关键顺式作用元件预测第46-47页
    3.9 TaLTPIb.1 启动子表皮特异表达元件的验证第47-48页
    3.10 凝胶迁移验证及突变后验证TaLTPIb.1 顺式作用元件第48-50页
4 讨论第50-54页
    4.1 植物nsLTPs的进化第50页
    4.2 植物nsLTPs的功能及逆境胁迫响应第50-51页
    4.3 植物nsLTPs与表皮特异表达研究第51-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-63页
致谢第63-64页
攻读硕士期间发表论文情况第64页

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