中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 引言 | 第10-20页 |
1.1 植物耐冷机制研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 低温冷害对植物的影响 | 第11-12页 |
1.1.2 低温冷害对小麦的影响 | 第12-13页 |
1.2 植物非特异转脂蛋白研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 植物非特异转脂蛋白简述 | 第13页 |
1.2.2 植物非特异转脂蛋白分类与结构 | 第13-14页 |
1.2.3 植物非特异转脂蛋白的功能 | 第14-16页 |
1.2.3.1 植物非特异转脂蛋白参与角质层合成 | 第15页 |
1.2.3.2 植物非特异转脂蛋白参与抗病抗逆 | 第15页 |
1.2.3.3 植物非特异转脂蛋白的其他功能 | 第15-16页 |
1.2.4 植物非特异转脂蛋白的表达 | 第16-17页 |
1.3 植物表皮细胞转录调控与nsLTP基因 | 第17-18页 |
1.3.1 植物表皮转录表达调控研究现状 | 第17页 |
1.3.2 植物表皮转录调控与TaLTP启动子 | 第17-18页 |
1.4 研究目的与意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-34页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第20页 |
2.1.3 酶及生化试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要溶液及培养基配方 | 第20-21页 |
2.1.5 主要仪器 | 第21页 |
2.1.6 引物的设计与合成 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-34页 |
2.2.1 小麦叶片基因组的RNA提取 | 第22-23页 |
2.2.2 小麦叶片基因组的DNA提取 | 第23-24页 |
2.2.3 第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.2.4 PCR产物的回收纯化(参考天根DNA回收试剂盒说明书) | 第25页 |
2.2.5 目的片段的连接 | 第25页 |
2.2.6 大肠杆菌转化(参考天根DH5α 感受态说明书) | 第25页 |
2.2.7 阳性克隆的筛选 | 第25-26页 |
2.2.8 质粒小量提取(参考天根快速质粒小提说明书) | 第26页 |
2.2.9 亚细胞定位载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.10 农杆菌感受态的制备 | 第27页 |
2.2.11 冻融法转化农杆菌感受态 | 第27-28页 |
2.2.12 烟草农杆菌法亚细胞定位步骤 | 第28页 |
2.2.13 洋葱基因枪法亚细胞定位步骤 | 第28-29页 |
2.2.14 激光共聚焦显微镜观察亚细胞定位步骤 | 第29-30页 |
2.2.15 系统发育树分析与染色体定位 | 第30页 |
2.2.16 非生物胁迫及激素诱导下的实时荧光定量PCR | 第30页 |
2.2.17 TaLTPIb.1 启动子与GUS融合载体的构建及短柄草转化 | 第30-32页 |
2.2.18 拟南芥转基因与胁迫下表型分析 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-50页 |
3.1 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 基因系统进化分析 | 第34-35页 |
3.2 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 基因的染色体定位 | 第35-36页 |
3.3 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 在胁迫下的表达模式 | 第36-40页 |
3.4 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 转基因拟南芥胁迫下表型分析 | 第40-41页 |
3.5 TaLTPIb.1, TaLTPIb.5 和TaLTPId.1 基因的亚细胞定位 | 第41-43页 |
3.6 TaLTPIb.1 基因的表达定位 | 第43-44页 |
3.7 TaLTPIb.1 顺式作用元件的分析 | 第44-46页 |
3.8 TaLTPIb.1 关键顺式作用元件预测 | 第46-47页 |
3.9 TaLTPIb.1 启动子表皮特异表达元件的验证 | 第47-48页 |
3.10 凝胶迁移验证及突变后验证TaLTPIb.1 顺式作用元件 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-54页 |
4.1 植物nsLTPs的进化 | 第50页 |
4.2 植物nsLTPs的功能及逆境胁迫响应 | 第50-51页 |
4.3 植物nsLTPs与表皮特异表达研究 | 第51-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第64页 |