| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1 番茄黄化曲叶病毒研究进展 | 第14-22页 |
| ·寄主范围、症状和分布 | 第14-16页 |
| ·分子生物学特性 | 第16-18页 |
| ·病毒的基因组结构、功能和表达策略 | 第16-17页 |
| ·病毒株系分化 | 第17-18页 |
| ·TYLCV检测技术 | 第18-21页 |
| ·生物学检测法 | 第19页 |
| ·血清学方法 | 第19页 |
| ·分子生物学方法 | 第19-20页 |
| ·不同检测方法的比较 | 第20-21页 |
| ·防治策略 | 第21-22页 |
| 2 黄瓜绿斑驳花叶病毒研究进展 | 第22-28页 |
| ·生物学特性 | 第22-25页 |
| ·病毒分布 | 第22-23页 |
| ·危害症状 | 第23-24页 |
| ·寄主与传播方式 | 第24页 |
| ·病毒粒子与理化特性 | 第24-25页 |
| ·基因组结构及功能 | 第25-26页 |
| ·病毒株系组成与血清学关系 | 第26页 |
| ·CGMMV检测技术的发展 | 第26-28页 |
| ·生物学鉴定 | 第26-27页 |
| ·电镜观测 | 第27页 |
| ·血清学检测 | 第27-28页 |
| ·分子生物学方法 | 第28页 |
| 3 单克隆抗体技术及其在植物病毒学中的应用 | 第28-36页 |
| ·抗体的基本结构及其特性 | 第29-30页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第30-32页 |
| ·杂交瘤技术基本原理 | 第30-32页 |
| ·杂交瘤技术基本流程 | 第32页 |
| ·单克隆抗体在植物病毒学中的应用 | 第32-36页 |
| ·病毒病害的诊断与检测 | 第33页 |
| ·病毒株系鉴定及分离物分型 | 第33-34页 |
| ·病毒蛋白抗原表位分析 | 第34页 |
| ·作为探针分析病毒基因产物的功能 | 第34-35页 |
| ·其他方面应用 | 第35-36页 |
| 第二章 番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白的原核表达及其单克隆抗体制备和应用 | 第36-59页 |
| 1 材料与方法 | 第37-51页 |
| ·病毒 | 第37页 |
| ·菌株和质粒 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·TYLCV CP基因克隆及其原核表达载体的构建 | 第37-43页 |
| ·TYLCV CP基因在大肠杆菌中的表达及蛋白纯化 | 第43-46页 |
| ·诱导表达 | 第43页 |
| ·表达产物在变性条件下的纯化 | 第43页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE及Western blot鉴定 | 第43-46页 |
| ·多克隆抗体和单克隆抗体的制备 | 第46-49页 |
| ·多抗血清的制备 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体制备 | 第47-49页 |
| ·用制备的抗体建立测定TYLCV的酶联免疫吸附测定法(ELISA) | 第49-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-57页 |
| ·TYLC-SH2外壳蛋白基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·TYLCV-SH2外壳蛋白的原核表达与纯化 | 第52-53页 |
| ·重组蛋白单克隆抗体的制备和鉴定 | 第53-54页 |
| ·抗TYLCV-SH2 CP单克隆抗体的特性 | 第54-55页 |
| ·TAS-ELISA和Western blot检测抗体特异性 | 第55-56页 |
| ·TAS-ELISA检测方法的建立 | 第56页 |
| ·TAS-ELISA田间检测应用 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第三章 黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体的制备 | 第59-71页 |
| 1 材料和方法 | 第59-63页 |
| ·病毒、培养基和抗体 | 第59-60页 |
| ·黄瓜绿斑驳花叶病毒的提纯 | 第60页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第60-61页 |
| ·腹水制备、抗体纯化、抗体类型及亚类鉴定和腹水效价测定 | 第61页 |
| ·Western blot检测 | 第61页 |
| ·CGMMV的ACP-ELISA检测方法 | 第61页 |
| ·Dot-blot ELISA和Tissue-blot ELISA的建立及检测应用 | 第61-62页 |
| ·IC-RT-PCR的建立及应用 | 第62-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-69页 |
| ·黄瓜绿斑驳花叶病毒的提纯及抗原制备 | 第63页 |
| ·杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆 | 第63页 |
| ·腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第63-64页 |
| ·Western blot分析 | 第64-65页 |
| ·单抗的特异性和灵敏度 | 第65-66页 |
| ·ACP-ELISA检测方法建立和应用 | 第66-67页 |
| ·Dot-blot ELISA和Tissue-blot ELISA的建立及检测应用 | 第67-68页 |
| ·IC-RT-PCR的建立及应用 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第80-81页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第81-84页 |
| 在学期间所取得的科研成果 | 第84页 |
