| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-20页 |
| ·概述 | 第11页 |
| ·代表性的萘酰亚胺类化合物研究现状 | 第11-12页 |
| ·单萘酰亚胺类化合物 | 第11页 |
| ·双萘酰亚胺类化合物 | 第11-12页 |
| ·萘酰亚胺类化合物的发展前景 | 第12页 |
| ·细胞凋亡的分子机理和最新研究进展 | 第12-13页 |
| ·死亡受体介导的细胞凋亡 | 第12页 |
| ·线粒体介导的内源途径 | 第12-13页 |
| ·肿瘤细胞多药耐药的分子机制以及研究进展 | 第13-18页 |
| ·P-糖蛋白在耐药方面的作用 | 第14-15页 |
| ·DNA损伤修复系统在耐药方面的作用 | 第15页 |
| ·凋亡途径在耐药方面的作用 | 第15-18页 |
| ·研究的目标、意义 | 第18-19页 |
| ·创新点与展望 | 第19-20页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第20-31页 |
| ·常用实验材料 | 第20-22页 |
| ·细胞株 | 第20页 |
| ·常用试剂 | 第20-22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·常用试剂的配制 | 第23-26页 |
| ·常用方法 | 第26-31页 |
| ·高压灭菌 | 第26页 |
| ·细胞的复苏 | 第26页 |
| ·细胞的传代 | 第26页 |
| ·细胞的冻存 | 第26-27页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第27页 |
| ·Bradford比色法测蛋白质含量 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第27-29页 |
| ·细胞总RNA的提取—Trizol法 | 第29页 |
| ·RNA以及microRNA反转录 | 第29-30页 |
| ·Real Time PCR | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
| 第3章 8-c体外抗肿瘤活性的研究 | 第31-36页 |
| ·概述 | 第31-32页 |
| ·实验材料与方法 | 第32-33页 |
| ·细胞株 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·MTT法检测细胞毒性 | 第32-33页 |
| ·统计分析 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-35页 |
| ·8-c对各种肿瘤细胞以及耐药细胞存活率的影响 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第4章 8-c对耐药细胞中p糖蛋白作用影响 | 第36-42页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料与方法 | 第36-39页 |
| ·细胞株 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·统计学方法 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-41页 |
| ·Pgp在敏感细胞和耐药细胞中的表达量的比较 | 第39-40页 |
| ·8-c对耐药细胞中Pgp的蛋白水平表达的影响 | 第40页 |
| ·8-c在耐药细胞以及非耐药细胞中药物积累的比较 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第5章 8-c对耐奥沙利铂HCT116耐药细胞的凋亡效果 | 第42-49页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料与方法 | 第42-44页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·倒置显微镜下观察8-c作用前后耐药细胞HCT116/L-OHP形态的变化 | 第42页 |
| ·彗星电泳法观察耐药细胞HCT116/L-OHP经8-c作用后的DNA损伤情况 | 第42-43页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测8-c对耐药细胞的凋亡作用 | 第43-44页 |
| ·统计学方法 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-48页 |
| ·8-c作用耐药细胞HCT116/L-OHP前后的细胞形态的变化 | 第44-45页 |
| ·8-c对耐药细胞HCT116/L-OHP DNA双链断裂的影响 | 第45-46页 |
| ·双染法检测8-c对HCT116耐药细胞凋亡率的影响 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第6章 8-c诱导HCT116/L-OHP细胞凋亡的作用机制 | 第49-61页 |
| ·概述 | 第49页 |
| ·实验材料与方法 | 第49-54页 |
| ·细胞株 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·Caspase-3的活性分析 | 第52-53页 |
| ·miro RNA转染实验 | 第53-54页 |
| ·统计学方法 | 第54页 |
| ·实验结果 | 第54-59页 |
| ·8-c对耐药细胞中p-p53、p53、Bcl-2、cleaved-PARP蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
| ·8-c对p53以及Bcl-2 mRNA表达的影响 | 第55-56页 |
| ·8-c对Caspase-3活性的影响 | 第56-57页 |
| ·Hsa-miR-1915模拟物对Hsa-miR-1915基因mRNA表达量的影响 | 第57-58页 |
| ·Hsa-mir-1915模拟物通过靶向抑制Bcl-2对8-c诱导的细胞凋亡的影响 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第7章 8-c对DNA修复蛋白ERCC1的影响 | 第61-66页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·材料与方法 | 第61-62页 |
| ·细胞株 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-62页 |
| ·siRNA转染实验 | 第62页 |
| ·统计学方法 | 第62页 |
| ·实验结果 | 第62-64页 |
| ·8-c或ERCC1siRNA转染对ERCC1蛋白和mRNA表达的影响 | 第62-63页 |
| ·8-c对ERCC1基因敲除的HCT116和HCT116/L-OHP细胞生存率的影响 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第8章 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 论文及专利发表情况 | 第77页 |
