兔瘟病毒的VP60截段基因原核表达及抗体检测金标试纸的初步研究

摘要	第1-6页
Abstract	第6-12页
第一章 文献综述	第12-17页
·兔瘟基本概况	第12-15页
·病原学	第12页
·病毒基因结构与功能	第12-13页
·流行病学	第13页
·临诊症状	第13页
·病理变化	第13-14页
·诊断技术	第14-15页
·病毒检查	第14页
·动物试验	第14页
·血凝与血凝抑制试验	第14页
·酶联免疫吸附法(ELISA)	第14-15页
·、胶体金技术	第15-17页
·免疫胶体金基本原理	第15页
·胶体金的特性	第15-16页
·胶体金的制备	第16页
·胶体金的鉴定	第16页
·胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存	第16-17页
第二章 兔瘟病毒VP60截段基因的原核表达	第17-43页
·材料与仪器	第17页
·试剂配制	第17-20页
·质粒提取相关试剂	第17-18页
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂	第18-19页
·表达蛋白质纯化所需要的溶液	第19页
·酶联免疫吸附试验所需要的溶液	第19-20页
·抗体制备所需白油佐剂	第20页
·抗体纯化所需要的溶液	第20页
·试验方法	第20-31页
·VP-60基因扩增引物设计	第20-21页
·VP60基因的PCR扩增	第21-22页
·VP60基因的凝胶回收	第22页
·重组质粒pMD19-T-VP60的构建	第22-25页
·DH5α感觉态细胞的制作	第22-23页
·目的基因与pMD19-T载体的连接	第23页
·质粒转化	第23-24页
·克隆载体的的鉴定	第24-25页
·表达载体的构建	第25-28页
·DH5α感觉态细胞的制备	第25-26页
·空载体pColdTF质粒的提取	第26页
·pColdTF质粒双酶切	第26页
·质粒载体的连接	第26-27页
·质粒转化	第27页
·质粒提取	第27页
·菌株鉴定	第27-28页
·菌株的诱导表达	第28-29页
·重组蛋白的Western-Blot检测	第29-30页
·目的蛋白的纯化	第30页
·VP60截段重组蛋白的反应活性检测	第30-31页
·结果	第31-40页
·VP60截段基因的PCR扩增	第31-32页
·克隆载体的鉴定	第32-34页
·表达载体的鉴定	第34-36页
·菌株的诱导表达	第36-38页
·菌株诱导表达条件的优化	第38-39页
·最佳IPTG浓度的确定	第38页
·最佳诱导时间的确定	第38-39页
·重组蛋白的Western-Blot检测	第39页
·目的蛋白的纯化	第39-40页
·兔瘟病毒VP60重组蛋白的反应原性检测	第40页
·讨论	第40-43页
第三章 兔瘟病毒抗体免疫胶体金检测技术的初步研制	第43-57页
·材料与方法	第43-49页
·主要仪器与耗材	第43-44页
·方法	第44-49页
·溶液配制	第44页
·鼠抗VP60重组蛋白抗体的制备	第44-45页
·胶体金的制备	第45页
·胶体金溶液质量的鉴定	第45-46页
·金标蛋白的制备	第46页
·金标VP60重组蛋白的制备	第46-47页
·金标试纸条的试制	第47-48页
·胶体金试纸条T线和C线条件确定	第48页
·RHDV胶体金试纸条的灵敏性和特异性实验	第48页
·RHDV胶体金试纸条临床样品检测	第48-49页
·结果	第49-54页
·鼠抗重组VP60蛋白抗体的制备	第49页
·胶体金的制备	第49-51页
·金标蛋白的制备	第51-52页
·免疫胶体金制备最适pH和蛋白量的确定	第51页
·重组VP60蛋白的胶体金标记	第51-52页
·RHDV抗体检测胶体经试纸条的试制	第52页
·硝酸纤维素膜T、C线上样浓度的确立	第52-53页
·免疫胶体金试纸条灵敏性和特异性检测	第53-54页
·临床检测	第54页
·讨论	第54-57页
第四章. 结论	第57-58页
参考文献	第58-62页
致谢	第62页