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拟南芥Ca2+/H+反向转运体家族(CAXs)相互作用蛋白的筛选及解析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 绪论第10-16页
   ·Ca~(2+)在植物体内的作用第10页
   ·CAXs第10-14页
     ·CAXs的结构和分类第10-12页
     ·CAXs间的相互影响第12-13页
     ·CAXs的生理功能第13-14页
   ·其他家族相互作用蛋白的研究进展第14-15页
   ·本研究的目的和意义第15-16页
2 CAXs基因的生物信息学分析第16-25页
   ·结果与分析第16-24页
     ·CAXs的基因特性分析第16-21页
     ·CAXs的氨基酸序列同源性分析第21-22页
     ·CAXs编码的蛋白质进化树分析第22-23页
     ·CAXs跨膜域预测第23-24页
     ·CAXs编码的蛋白质亚细胞定位预测第24页
   ·本章小结第24-25页
3 CAX家族的互作蛋白筛选第25-42页
   ·材料和方法第25-28页
     ·实验材料第25-26页
     ·实验方法第26-28页
   ·CAXs重组质粒的载体构建及转化验证第28-35页
     ·pGBKT7-AtCAXs的载体构建第28-29页
     ·pGADT7-AtCAXs的载体构建第29-30页
     ·共转化验证第30页
     ·共转化的再次验证第30-31页
     ·“诱饵”基因的毒性和自激活检测第31页
     ·nYFP:AtCAX1的载体构建第31页
     ·cYFP:AtCAX4的载体构建第31-32页
     ·基因枪法轰击洋葱表皮观察瞬时表达第32-33页
     ·pGBKT7-AtCAX(分段)的载体构建第33页
     ·pGADT7-AtCAX(分段)的载体构建第33页
     ·共转化验证第33-34页
     ·nYFP:AtCAX1(分段)的载体构建第34页
     ·cYFP:AtCAX4-N的载体构建第34页
     ·pYES2-AtCAX4的载体构建第34-35页
   ·结果与分析第35-41页
     ·“诱饵”蛋白的毒性和自激活检测第35-36页
     ·酵母双杂交筛选CAXs相互作用蛋白第36-38页
     ·双分子荧光互补实验验证AtCAX1和AtCAX4蛋白之间的相互作用第38-39页
     ·pYES2表达载体的构建及鉴定第39-40页
     ·AtCAX4过表达酵母的金属离子抗性分析第40-41页
   ·本章小结第41-42页
4 AtCAX1和AtCAX4在拟南芥抗性中的功能分析第42-63页
   ·材料与方法第42-46页
     ·实验材料第42页
     ·实验方法第42-46页
   ·结果与分析第46-62页
     ·拟南芥AtCAX1和AtCAX4的组织表达特性分析第46-47页
     ·离子胁迫基因表达分析第47-49页
     ·PBI121表达载体的构建及鉴定第49-50页
     ·AtCAX4过表达植株的鉴定第50页
     ·atcax4突变体植株的鉴定第50-51页
     ·atcax1-atcax4双突变植株的鉴定第51页
     ·AtCAX1转基因及T-DNA插入突变体的表型分析第51-54页
     ·AtCAX4转基因及T-DNA插入突变体的表型分析第54-58页
     ·atcax1、atcax4纯和单突变体及atcax1-atcax4双突变植株的表型分析第58-62页
   ·本章小结第62-63页
5 讨论第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-71页
攻读学位期间发表的学术论文第71-72页
致谢第72-73页

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