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水稻胞质不育相关蛋白ORF216的表达与潜在互作蛋白的验证

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第9-13页
   ·植物细胞质雄性不育第9页
   ·植物细胞雄性不育基因及相关互作蛋白质的研究第9-10页
   ·蛋白质相互作用的研究方法第10-12页
     ·免疫共沉淀技术第10页
     ·酵母单(双)杂交技术第10-11页
     ·蛋白质Pull-down技术第11-12页
   ·本研究的目的及意义第12-13页
第二章 ORF216蛋白与ORFH79蛋白的互作分析第13-29页
   ·实验材料、试剂及仪器第13-16页
     ·实验材料第13-14页
     ·实验试剂第14-16页
   ·实验方法第16-24页
     ·含有GST标签ORFH79原核表达载体构建第16-20页
     ·p GEX-6p1-orf H79融合蛋白的诱导表达第20-23页
     ·ORFH79的蛋白纯化。第23页
     ·ORF216与ORFH79的蛋白相互作用分析。第23-24页
     ·蛋白洗脱结果SDS-PAGE、银染及Western Blot分析第24页
   ·实验结果与分析第24-28页
     ·p GEX-6p1-orf H79原核表达载体构建第24-25页
     ·融合GST标签p GEX-6p1-orf H79蛋白诱导表达第25-26页
     ·ORF216与ORFH79蛋白pull-down实验第26-28页
     ·ORFH79蛋白纯化实验第28页
   ·讨论第28-29页
第三章 ORF216蛋白与水稻线粒体蛋白的Western blot检测第29-34页
   ·实验材料、试剂及仪器第29-30页
     ·实验材料第29页
     ·实验试剂包括试剂、纯度及配制第29-30页
   ·实验方法第30-31页
     ·水稻不同品种线粒体的提取第30-31页
     ·不同水稻品种线粒体蛋白SDS-PAGE分析第31页
     ·不同水稻品种线粒体蛋白Western Blot分析第31页
   ·实验结果第31-33页
     ·水稻黄化苗的培养及线粒体的提取第31-32页
     ·线粒体蛋白的提取及western blot检测第32-33页
   ·讨论第33-34页
第四章 ORF216与Os RPLx和Os ATP5x互作的分析第34-49页
   ·实验材料、试剂及仪器第34-36页
     ·实验材料第34-35页
     ·实验试剂第35-36页
   ·实验方法第36-41页
     ·水稻RNA的提取第36-37页
     ·含有GST标签Os RPLx及Os ATP5x原核表达载体构建第37-40页
     ·p GEX-4T1-Os RPLx和p GEX-6P1-Os ATP5x融合蛋白的诱导表达第40页
     ·ORF216与Os RPLx和Os ATP5x的蛋白相互作用分析。第40页
     ·互作蛋白洗脱结果SDS-PAGE、银染及Western Blot分析第40-41页
   ·实验结果与分析第41-48页
     ·水稻品种YTA叶片RNA的提取及检测第41页
     ·水稻Os RPLx基因和Os ATP5x基因原核表达载体的构建第41-42页
     ·融合GST标签Os RPLx蛋白和Os ATP5x蛋白诱导表达第42-44页
     ·ORF216与Os RPLx蛋白和Os ATP5x蛋白互作的验证第44-48页
   ·讨论第48-49页
参考文献第49-52页
致谢第52页

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