副猪嗜血杆菌分型鉴定和HigBA原核表达及功能分析
| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-19页 |
| ·副猪嗜血杆菌生物学特征 | 第12页 |
| ·副猪嗜血杆菌毒力因子 | 第12-17页 |
| ·与病原菌的粘附侵袭相关毒力因子 | 第13-15页 |
| ·与抗肺巨噬细胞吞噬相关的毒力因子 | 第15-16页 |
| ·与抗血清杀伤相关的毒力因子 | 第16-17页 |
| ·毒素与抗毒素系统 | 第17-19页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌分离株分型鉴定 | 第19-23页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·菌株和单因子血清 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-20页 |
| ·分离株培养鉴定 | 第19-20页 |
| ·血清学分型 | 第20页 |
| ·结果 | 第20-21页 |
| ·PCR鉴定结果 | 第20-21页 |
| ·琼脂糖扩散分型 | 第21页 |
| ·讨论 | 第21-23页 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌HIGB和HIGA的原核表达 | 第23-34页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·质粒和菌株 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·血清 | 第24页 |
| ·溶液配制 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·制备副猪嗜血杆菌标准5型的兔高免血清 | 第24-25页 |
| ·HigB、HigA重组质粒构建 | 第25-27页 |
| ·HigB和HigA蛋白纯化 | 第27-29页 |
| ·结果分析 | 第29-32页 |
| ·重组表达质粒鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE鉴定结果 | 第30-32页 |
| ·重组蛋白的Western Blot检测结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 副猪嗜血杆菌HIGB和HIGA功能鉴定 | 第34-40页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·试剂与菌株 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·qRT-PCR | 第34-36页 |
| ·RNA抽提 | 第34-35页 |
| ·逆转录 | 第35-36页 |
| ·生长抑制实验 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-38页 |
| ·qPT-PCR结果 | 第37页 |
| ·生长抑制实验结果 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第五章 HIGB和HIGA攻毒保护实验 | 第40-43页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·菌株与实验动物 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·免疫蛋白和灭活疫苗的准备 | 第40页 |
| ·豚鼠Hps抗体检测 | 第40-41页 |
| ·攻毒菌株准备 | 第41页 |
| ·豚鼠免疫与攻毒 | 第41页 |
| ·结果 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第六章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 附录 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 攻读学士期间发表的论文和专利 | 第50页 |
