| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-28页 |
| 1. 皮肤与伤口愈合 | 第13-19页 |
| ·皮肤 | 第13页 |
| ·伤口愈合 | 第13-15页 |
| ·钙在伤口愈合中的作用 | 第15-17页 |
| ·维生素D在伤口愈合中的作用 | 第17-19页 |
| 2. 蛋白酶在伤口愈合中的作用 | 第19-21页 |
| ·伤口中的蛋白酶 | 第19页 |
| ·去整合素金属蛋白酶ADAM在伤口愈合中的作用 | 第19-21页 |
| 3. ADAM-12的研究进展 | 第21-28页 |
| ·ADAM家族 | 第21-23页 |
| ·ADAM-12的结构表达 | 第23页 |
| ·ADAM-12的调控机制 | 第23-24页 |
| ·ADAM-12的生物学功能 | 第24-28页 |
| ·ADAM-12在机体正常发育中的功能 | 第24-25页 |
| ·ADAM-12在病理过程中的功能 | 第25-28页 |
| 第二章 ADAM-12在皮肤伤口愈合中的功能机制 | 第28-74页 |
| 1. 引言 | 第28-29页 |
| 2. 实验材料 | 第29-35页 |
| ·动物 | 第29页 |
| ·细胞及培养基 | 第29页 |
| ·分子生物学试剂 | 第29-30页 |
| ·引物 | 第30-33页 |
| ·荧光定量PCR引物 | 第30-31页 |
| ·克隆引物 | 第31-32页 |
| ·siRNA | 第32页 |
| ·Guide RNAs引物 | 第32-33页 |
| ·普通PCR引物 | 第33页 |
| ·质粒 | 第33页 |
| ·抗体 | 第33页 |
| ·仪器与耗材 | 第33-35页 |
| 3. 实验方法 | 第35-50页 |
| ·细胞复苏、培养、冻存 | 第35页 |
| ·小鼠伤口实验 | 第35-36页 |
| ·RNA抽提；逆转录；定量 | 第36-38页 |
| ·总RNA提取 | 第36页 |
| ·RNA逆转录 | 第36-37页 |
| ·实时定量PCR | 第37-38页 |
| ·蛋白质提取；免疫印记；免疫沉淀 | 第38-42页 |
| ·蛋白质提取 | 第38-39页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第39-41页 |
| ·蛋白免疫沉淀(IP) | 第41-42页 |
| ·组织脱水、包埋、切片 | 第42页 |
| ·免疫荧光染色(组织) | 第42-43页 |
| ·克隆构建；PCR；质粒构建 | 第43-45页 |
| ·转染 | 第45-46页 |
| ·脂质体Lipo fectamine2000转染 | 第45页 |
| ·脂质体PEI转染 | 第45页 |
| ·磷酸钙沉淀转染 | 第45-46页 |
| ·CRISPR/cas9 KO细胞系的建立 | 第46-48页 |
| ·构建cas9重组质粒 | 第46-47页 |
| ·包装cas9慢病毒 | 第47页 |
| ·筛选单克隆细胞株 | 第47-48页 |
| ·鉴定阳性克隆 | 第48页 |
| ·MTT | 第48页 |
| ·细胞划痕实验 | 第48-49页 |
| ·双荧光素酶报告实验 | 第49页 |
| ·数据统计 | 第49-50页 |
| 4. 实验结果与分析 | 第50-71页 |
| ·皮肤受损导致伤口中ADAM-12表达上调 | 第50-54页 |
| ·筛选诱导ADAM-12表达的因子 | 第54-57页 |
| ·钙诱导ADAM-12的表达 | 第57-61页 |
| ·钙诱导ADAM-12的表达可能部分依赖于VDR | 第61-65页 |
| ·ADAM-12抑制角质形成细胞分化,调节细胞增殖 | 第65-71页 |
| 5. 讨论 | 第71-74页 |
| 第三章 总结 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |