中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-14页 |
第一章 绪论 | 第14-23页 |
1 前言 | 第14页 |
2 过继性免疫细胞 | 第14-19页 |
·自然杀伤细胞(natural killer cell,NK) | 第15页 |
·树突状细胞(dendritic cells,DCs细胞) | 第15-16页 |
·细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine Induced Killer,CIK细胞) | 第16-17页 |
·肿瘤浸润性淋巴细胞(Tumor infiltrating lymphocytes,TIL细胞) | 第17-18页 |
·细胞毒性 T 淋巴细胞 | 第18-19页 |
·T细胞免疫细胞治疗的问题 | 第19页 |
3 CD47的简介以及其与T细胞的研究进展 | 第19-21页 |
·CD47研究进展 | 第19-20页 |
·CD47与T细胞的研究进展 | 第20-21页 |
4 本课题的研究思路、方案及目的 | 第21-23页 |
·研究思路 | 第21页 |
·研究方案 | 第21-22页 |
·研究目的 | 第22-23页 |
第二章T细胞内高效表达系统的构建 | 第23-29页 |
1 前言 | 第23页 |
2 实验器材 | 第23-24页 |
·实验材料 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23-24页 |
3 实验方法 | 第24页 |
·病毒感染 | 第24页 |
·启动子筛选 | 第24页 |
4 实验结果 | 第24-28页 |
·Ad35-EGFP和Ad5-EGFP感染Jurkat细胞的实验结果 | 第24-28页 |
·启动子TCEF1α 及Ad-TCEF1α(in)在Jurkat细胞中的活性检测 | 第28页 |
5 讨论 | 第28页 |
6 小结 | 第28-29页 |
第三章重组腺病毒载体Ad35-SF的构建与鉴定 | 第29-46页 |
1 前言 | 第29页 |
2 实验器材 | 第29-31页 |
·实验材料 | 第29页 |
·实验仪器 | 第29-30页 |
·实验试剂 | 第30页 |
·实验室所需引物 | 第30-31页 |
·实验试剂配制 | 第31页 |
3 实验方法 | 第31-39页 |
·p DC898-SF载体的构建 | 第31-34页 |
·Ad35-SF的重组、扩增和纯化 | 第34-38页 |
·Ad35-SF感染293细胞 | 第38页 |
·Western blotting检测293细胞上清中SF蛋白大小 | 第38页 |
·Elisa检测293细胞上清中SF蛋白的表达量 | 第38-39页 |
4 实验结果 | 第39-45页 |
·Ad35-SF构建结果 | 第39-42页 |
·重组腺病毒Ad35-SF的鉴定 | 第42-43页 |
·重组腺病毒Ad35-SF的滴度测定 | 第43页 |
·293细胞上清中SF蛋白的表达量 | 第43-44页 |
·293细胞上清中SF蛋白的鉴定 | 第44-45页 |
5 讨论 | 第45页 |
6 小结 | 第45-46页 |
第四章 病毒Ad35-SF对T细胞的影响 | 第46-60页 |
1 前言 | 第46页 |
2 实验器材 | 第46-48页 |
·实验材料 | 第46页 |
·实验仪器 | 第46-47页 |
·实验试剂 | 第47-48页 |
·主要试剂配置方法 | 第48页 |
3 实验方法 | 第48-51页 |
·Ad35-SF感染Jurkat以及CIK细胞 | 第48-49页 |
·Western blotting检测Jurkat细胞上清SF蛋白的分子量 | 第49页 |
·Western blotting检测CIK细胞上清SF蛋白的分子量 | 第49页 |
·Elisa检测Jurkat细胞上清中SF蛋白的表达量 | 第49页 |
·流式检测 | 第49-50页 |
·CCK8试剂盒增殖检测 | 第50-51页 |
·CCK8试剂盒杀伤检测 | 第51页 |
4 实验结果 | 第51-58页 |
·病毒感染Jurkat细胞后SF蛋白的表达鉴定 | 第51-52页 |
·病毒感染CIK细胞后SF蛋白的表达鉴定 | 第52页 |
·Jurkat细胞流式检测结果 | 第52-56页 |
·CIK细胞的流式结果 | 第56-57页 |
·病毒Ad35-SF对Jurkat细胞的增殖影响 | 第57页 |
·Ad35-SF病毒对Jurkat细胞杀伤Hep3B细胞的影响 | 第57-58页 |
5 讨论 | 第58-59页 |
6 小结 | 第59-60页 |
第六章 结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录 | 第69页 |