缩略词表及中英文对照 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
前言 | 第10-15页 |
1 研究背景 | 第10-11页 |
2 国内外研究状况 | 第11-13页 |
3 研究目的及研究意义 | 第13-14页 |
4 研究内容 | 第14页 |
5 技术路线 | 第14-15页 |
材料与方法 | 第15-34页 |
1 仪器、材料与试剂 | 第15-20页 |
·主要仪器 | 第15-16页 |
·实验材料 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16-18页 |
·其它试剂的配方 | 第18-20页 |
2 实验方法 | 第20-34页 |
·获取基因序列及密码子优化 | 第20-21页 |
·合成及鉴定 RA17 基因 | 第21-23页 |
·构建 RA17 重组蛋白克隆载体 | 第23-26页 |
·构建 RA17 重组蛋白表达载体 | 第26-28页 |
·初步鉴定表达的 RA17 重组蛋白 | 第28页 |
·优化 RA17 重组蛋白诱导表达条件 | 第28-29页 |
·分析 RA17 重组蛋白的可溶性 | 第29页 |
·亲和层析纯化 RA17 重组蛋白 | 第29-32页 |
·鉴定 RA17 重组蛋白 | 第32-34页 |
结果 | 第34-46页 |
·RA17 基因密码子的优化 | 第34页 |
·RA17 重组蛋白氨基酸序列的获得 | 第34页 |
·RA17 基因密码子的优化 | 第34页 |
·RA17 重组蛋白克隆载体的构建 | 第34-36页 |
·Top10-pUC57-RA17 菌株的菌落 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
·RA17 基因的扩增 | 第35-36页 |
·pEASY-T3-RA17 载体的构建 | 第36页 |
·RA17 重组蛋白表达载体的构建 | 第36-38页 |
·pEASY-T3-RA17 质粒双酶切的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第36-37页 |
·JM109-pET-44a-RA17 菌株的菌落 PCR 鉴定 | 第37页 |
·JM109-pET-44a-RA17 测序结果 | 第37页 |
·Rosetta-pET-44a-RA17 菌株的菌落 PCR 鉴定 | 第37-38页 |
·RA17 重组蛋白的诱导表达及表达条件的优化 | 第38-40页 |
·RA17 重组蛋白的诱导表达 | 第38-39页 |
·RA17 重组蛋白表达条件的优化 | 第39-40页 |
·RA17 重组蛋白的可溶性分析 | 第40-42页 |
·RA17 重组蛋白的纯化、分析及冻干保存 | 第42-44页 |
·RA17 重组蛋白的亲和层析纯化和 SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第42-43页 |
·纯化的 RA17 重组蛋白含量测定 | 第43页 |
·纯化的 RA17 重组蛋白的冻干、称重及保存 | 第43-44页 |
·RA17 重组蛋白的鉴定 | 第44-46页 |
·RA17 重组蛋白免疫印迹鉴定 | 第44页 |
·RA17 重组蛋白的质谱鉴定 | 第44-46页 |
讨论 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
展望 | 第49-50页 |
附图 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
综述 | 第55-65页 |
参考文献 | 第61-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
在攻读硕士学位期间科研成果及论文发表情况 | 第66-68页 |