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vgb基因和bldD基因在活跃链霉菌中的过表达及其对诺西肽产量的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
缩略词表第9-11页
第1章 前言第11-22页
   ·硫肽类抗生素的研究进展第11-16页
     ·硫肽类抗生素的主要分类第11-12页
     ·硫肽类抗生素的生物合成第12-13页
     ·硫肽类抗生素的翻译后修饰第13-14页
     ·硫肽类抗生素的作用机制第14-15页
     ·细菌对硫肽类抗生素的潜在耐药机制第15-16页
   ·透明颤菌血红蛋白的最新研究进展第16-20页
     ·透明颤菌血红蛋白作用机制第16-17页
     ·透明颤菌血红蛋白主要应用领域第17-20页
   ·本论文研究的技术路线第20页
   ·本论文研究内容及研究意义第20-22页
     ·S.actuosus出发菌株的筛选及发酵因素的确定第20-21页
     ·vgb基因在S.actuosus中的过表达及其对诺西肽产量的影响第21页
     ·bldD基因在S.actuosus中的过表达及其对诺西肽产量的影响第21页
     ·研究意义第21-22页
第2章 材料与方法第22-39页
   ·材料第22-26页
     ·菌株第22页
     ·质粒第22-23页
     ·引物第23页
     ·培养基第23-26页
     ·缓冲液和有机混合液的配制第26-30页
     ·工具酶及标记物等第28-29页
     ·相关试剂及分子试剂盒第29页
     ·设备仪器等第29-30页
   ·实验方法第30-39页
     ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取第30-31页
     ·DNA片段的PCR扩增第31页
     ·DNA片段的酶切和连接第31-32页
     ·DNA的琼脂糖凝胶电泳第32-33页
     ·DNA的纯化第33-34页
     ·S.actuosus总基因组DNA的小量提取第34页
     ·大肠杆菌感受态制备及转化第34-35页
     ·S.actuosus原生质体的制备及转化第35-37页
     ·S.actuosus孢子种的制备及保存第37页
     ·用分光光度计法测定诺西肽含量第37-38页
     ·用生物活性方法检测第38-39页
第3章 S.actuosus出发菌株的筛选及发酵因素的确定第39-43页
   ·引言第39页
   ·结果与分析第39-42页
     ·S.actuosus出发菌株的分离纯化及高活性菌株的筛选第39页
     ·S.actuosus中的诺西肽产量与发酵时间之间的关系第39-41页
     ·S.actuosus中的诺西肽产量与发酵体积之间的关系第41-42页
   ·讨论第42-43页
第4章 vgb基因在S.actuosus中的过表达及其对诺西肽产量的影响第43-50页
   ·引言第43页
   ·结果与分析第43-49页
     ·构建pUC18-vgb、pZM-vgb和pZMW-vgb质粒第43-46页
     ·构建S.actuosus/pZM等四种工程菌株第46-48页
     ·、S.actuosus与vgb基因过表达工程菌株的抑菌实验及定量测定第48-49页
   ·讨论第49-50页
第5章 bldD基因在S.actuosus中的过表达及其对诺西肽产量的影响第50-53页
   ·引言第50页
   ·结果与分析第50-52页
     ·、S.actuosus/pZMW-bldD工程菌株的构建第50-51页
     ·S.actuosus与bldD基因过表达工程菌株的抑菌实验及定量测定第51-52页
   ·讨论第52-53页
第6章 总结第53-55页
   ·获得的主要实验结果第53页
   ·创新点第53页
   ·下阶段的研究方向第53-55页
参考文献第55-60页
附录 (DNA序列分析图谱)第60-61页
论文发表情况第61-62页
致谢第62页

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