| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·3-羟基丙酸概况 | 第7-10页 |
| ·3-羟基丙酸简介 | 第7-8页 |
| ·化学法生产 3-羟基丙酸 | 第8页 |
| ·微生物法生产 3-羟基丙酸 | 第8-10页 |
| ·1,3-丙二醇概况 | 第10-11页 |
| ·1,3-丙二醇简介 | 第10页 |
| ·化学合成法生产 1,3-丙二醇 | 第10页 |
| ·微生物法生产 1,3-丙二醇 | 第10-11页 |
| ·克雷伯氏重组菌生产 3-羟基丙酸和 1,3-丙二醇的研究现状 | 第11-13页 |
| ·克雷伯氏重组菌联产的合成路径 | 第11-12页 |
| ·联产中的相关酶 | 第12-13页 |
| ·联产的相关研究 | 第13页 |
| ·本论文立题意义及研究内容 | 第13-15页 |
| ·立题意义 | 第13-14页 |
| ·主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-20页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·引物、质粒与菌株 | 第15页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-20页 |
| ·培养方法 | 第16-17页 |
| ·测定方法 | 第17页 |
| ·大肠杆菌基因组的提取 | 第17页 |
| ·基因 aldH 的扩增及 PCR 产物回收 | 第17-18页 |
| ·质粒提取和感受态细胞的制备及转化 | 第18页 |
| ·克雷伯氏菌表达载体的构建 | 第18页 |
| ·酶切及连接 | 第18页 |
| ·克雷伯氏重组菌的构建 | 第18页 |
| ·克雷伯氏菌电转感受态的制备 | 第18-19页 |
| ·质粒的电转化 | 第19页 |
| ·重组克雷伯氏菌的表达验证 | 第19页 |
| ·重组克雷伯氏菌的质粒稳定性分析 | 第19-20页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第20-39页 |
| ·联产克雷伯氏菌重组菌的构建 | 第20-23页 |
| ·醛脱氢酶基因的克隆及表达载体的构建及表达 | 第20-22页 |
| ·克雷伯氏菌中醛脱氢酶 ALDH 的表达及验证 | 第22-23页 |
| ·pH 策略对重组菌联产的影响 | 第23-35页 |
| ·不控制 pH 时重组菌的发酵性能分析 | 第23-27页 |
| ·控制 pH 时重组菌的发酵性能分析 | 第27-33页 |
| ·不同 pH 下 K. ZG27/P-aldH 和 budC K. ZG40/P-aldH 主产物比较 | 第33-35页 |
| ·budC K. ZG40/P-aldH 5 L 发酵罐发酵结果分析 | 第35-39页 |
| ·5 L 发酵罐分批补料发酵分析 | 第35-37页 |
| ·K. ZG27/P-aldH 和 budC K. ZG40/P-aldH 催化 1,3-PDO 产 3-HP 的验证 | 第37-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-40页 |
| 主要结论 | 第39页 |
| 展望 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45页 |