日本囊对虾中参与抗菌反应的四种甲壳肽的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一部分 综述 | 第9-23页 |
| 第一章 无脊椎动物先天免疫系统 | 第9-18页 |
| 1. 模式识别受体 | 第10页 |
| 2. 细胞免疫 | 第10-13页 |
| ·血细胞的吞噬作用 | 第12页 |
| ·血细胞的结节形成和包囊作用 | 第12-13页 |
| 3. 体液免疫应答 | 第13-18页 |
| ·血淋巴的凝结作用 | 第13页 |
| ·酚氧化酶原激活系统介导的黑化作用 | 第13-14页 |
| ·抗菌肽的产生 | 第14-18页 |
| 第二章 甲壳肽的研究进展 | 第18-21页 |
| 1. 甲壳肽的结构 | 第18-19页 |
| 2. 甲壳肽的类型 | 第19-20页 |
| 3. 甲壳肽功能 | 第20-21页 |
| ·抗菌功能与蛋白酶抑制剂功能 | 第20页 |
| ·甲壳肽的体内功能 | 第20-21页 |
| 目的意义 | 第21-22页 |
| 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二部分 日本囊对虫下四种甲壳肽的功能研宄 | 第23-50页 |
| 一、前言 | 第23-24页 |
| 二、材料方法 | 第24-39页 |
| 1. 材料 | 第24-25页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·菌株和载体 | 第24-25页 |
| ·试剂和仪器 | 第25页 |
| 2. 方法 | 第25-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第25页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第25-26页 |
| ·基因克隆 | 第26-29页 |
| ·序列比对和进化树构建 | 第29页 |
| ·半定量PCR | 第29-30页 |
| ·实时定量PCR | 第30页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第30-35页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白抑制细菌分泌蛋白酶活性检测 | 第36页 |
| ·干扰后的细菌清除实验 | 第36-39页 |
| ·重组蛋白的细菌结合实验 | 第39页 |
| 三、实验结果 | 第39-47页 |
| ·基因克隆和序列分析 | 第39-41页 |
| ·序列比对和进化树分析 | 第41-42页 |
| ·四种甲壳肽的组织分布 | 第42页 |
| ·表达模式分析 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白的表达和纯化 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白可以抑制细菌所分泌蛋白酶 | 第44-45页 |
| ·细菌结合实验 | 第45-46页 |
| ·甲壳肽可以增强对虾的弧菌清除能力 | 第46-47页 |
| 四、讨论 | 第47-50页 |
| 总结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第58页 |
