摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表及其英汉对照 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
第一节 马铃薯块茎发育的研究进展 | 第12-19页 |
1 块茎的形成过程 | 第12-13页 |
2 块茎的形成过程的影响因素 | 第13-16页 |
·光照 | 第13页 |
·温度 | 第13页 |
·内源激素 | 第13-14页 |
·激素平衡和互作 | 第14-15页 |
·蔗糖 | 第15页 |
·氮素 | 第15-16页 |
·Ca~(2+)信号 | 第16页 |
3 块茎发育过程中特异基因的表达 | 第16-19页 |
·淀粉合成相关基因表达 | 第16-17页 |
·特异性贮藏糖蛋白表达 | 第17页 |
·光周期相关基因 | 第17-19页 |
第二节 马铃薯块茎形成中细胞分裂及蔗糖调节 | 第19-22页 |
第二章 马铃薯StCDC20-1基因的克隆、遗传转化与转基因植株分析 | 第22-50页 |
第一节 马铃薯StCDC20-1基因的克隆 | 第22-36页 |
1 材料与方法 | 第22-27页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株和载体 | 第22页 |
·缓冲液、试剂和培养基 | 第22页 |
·总RNA的提取 | 第22-23页 |
·cDNA第一链的合成 | 第23页 |
·StCDC20-1 cDNA全长的克隆 | 第23-24页 |
·目的片段的回收 | 第24-25页 |
·目的片段与T载体连接 | 第25页 |
·CaCl2法制备DH5α感受态 | 第25页 |
·克隆载体的构建及其鉴定 | 第25-26页 |
·基因表达半定量分析 | 第26页 |
·生物信息学分析 | 第26-27页 |
2 结果 | 第27-35页 |
·StCDC20-1 cDNA全长的克隆 | 第27-28页 |
·StCDC20-1的核酸序列分析 | 第28页 |
·StCDC20-1蛋白分析 | 第28-31页 |
·StCDC20-1疏水性/亲水性分析 | 第31页 |
·StCDC20-1跨膜结构域的预测和分析 | 第31-32页 |
·StCDC20-1蛋白质的domains预测与分析 | 第32-33页 |
·StCDC20-1信号肽与定位分析 | 第33页 |
·StCDC20-1蛋白质三级结构的预测与分析 | 第33-34页 |
·StCDC20-1蛋白的系统发育分析 | 第34页 |
·StCDC20-1的组织表达分析 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-36页 |
第二节 StCDC20-1遗传转化与转基因植株分析 | 第36-50页 |
1. 材料与方法 | 第36-42页 |
·植物材料 | 第36页 |
·菌株和载体 | 第36页 |
·质粒的提取 | 第36-37页 |
·构建过表达载体 | 第37页 |
·农杆菌GV3101感受态制备 | 第37-38页 |
·农杆菌转化 | 第38页 |
·叶盘法转化马铃薯外植体 | 第38-39页 |
·转基因马铃薯DNA的提取 | 第39页 |
·转基因烟草DNA的PCR检测 | 第39-40页 |
·转基因烟草转录表达分析 | 第40-41页 |
·马铃薯生长量分析 | 第41页 |
·叶片叶绿素含量测定 | 第41页 |
·薯块淀粉含量测定 | 第41-42页 |
·StCDC20-1基因的表达分析 | 第42页 |
2 结果 | 第42-48页 |
·过表达载体的构建 | 第42-43页 |
·农杆菌的转化 | 第43页 |
·转基因马铃薯植株的获得 | 第43-44页 |
·转基因马铃薯植株PCR检测 | 第44-45页 |
·过表达StCDC20-1转基因马铃薯结薯分析 | 第45-46页 |
·转基因植株叶片叶绿素含量测定 | 第46页 |
·转基因植株薯块淀粉含量测定 | 第46-47页 |
·过表达StCDC20-1转基马铃薯植株形态学分析 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
第三章 马铃薯StTSF基因的克隆、遗传转化与转基因植株分析 | 第50-70页 |
第一节 马铃薯StTSF基因的克隆 | 第50-58页 |
1. 材料与方法 | 第50-52页 |
·植物材料 | 第50页 |
·菌株和载体 | 第50页 |
·缓冲液、试剂和培养基 | 第50页 |
·总RNA的提取 | 第50页 |
·cDNA第一链的合成 | 第50-51页 |
·StTSF cDNA全长的克隆 | 第51页 |
·目的片段的回收 | 第51页 |
·目的片段与T载体连接 | 第51-52页 |
·CaCl2法制备DH5α感受态 | 第52页 |
·克隆载体的构建及其鉴定 | 第52页 |
·基因表达半定量分析 | 第52页 |
·生物信息学分析 | 第52页 |
2 结果 | 第52-57页 |
·StTSF cDNA全长的克隆 | 第52-53页 |
·StTSF核酸序列分析 | 第53-54页 |
·StTSF氨基酸序列分析 | 第54页 |
·蛋白质疏水性/亲水性分析 | 第54-55页 |
·蛋白质跨膜结构域预测分析 | 第55-56页 |
·信号肽与定位分析 | 第56页 |
·StTSF系统发育 | 第56-57页 |
·StTSF的组织表达特性 | 第57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
第二节 StTSF的遗传转化与转基因植株分析 | 第58-70页 |
1. 材料与方法 | 第58-62页 |
·材料 | 第58页 |
·菌株和载体 | 第58页 |
·质粒的提取 | 第58页 |
·构建过表达载体 | 第58-59页 |
·农杆菌GV3101感受态制备 | 第59页 |
·农杆菌转化 | 第59-60页 |
·叶盘法转化马铃薯外植体 | 第60页 |
·转基因马铃薯DNA的提取 | 第60页 |
·转基因烟草DNA的PCR检测 | 第60-61页 |
·转基因烟草转录表达分析 | 第61-62页 |
·马铃薯生长量分析 | 第62页 |
·叶绿素含量测定 | 第62页 |
·薯块淀粉含量测定 | 第62页 |
·StTSF基因的表达分析 | 第62页 |
2 结果 | 第62-68页 |
·过表达载体的构建 | 第62-63页 |
·农杆菌的转化 | 第63页 |
·转基因马铃薯植株的获得 | 第63-64页 |
·转基因马铃薯植株PCR检测 | 第64-65页 |
·过表达StTSF转基因马铃薯结薯分析 | 第65-66页 |
·转基因植株叶片叶绿素含量测定 | 第66-67页 |
·过表达StTSF转基马铃薯植株形态学分析 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
全文结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
附件 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |