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抑制第二次减数分裂恢复和氧化应激对小鼠卵母细胞排卵后老化的调控作用

中文摘要第1-13页
Abstract第13-17页
1 前言第17-32页
   ·卵母细胞老化引起的危害第17页
   ·卵母细胞老化过程中超微结构的变化第17-19页
     ·线粒体第17-18页
     ·细胞骨架第18-19页
     ·皮质颗粒第19页
   ·老化卵母细胞孤雌激活率的变化第19-20页
   ·老化卵母细胞的钙离子波动第20-21页
   ·卵母细胞老化与细胞凋亡第21-22页
   ·低温对卵母细胞的影响第22-23页
   ·卵母细胞老化的调节第23-30页
     ·MPF 调节卵母细胞的老化第23-25页
     ·MAPK 调节卵母细胞的老化第25-26页
     ·抗氧化剂调节卵母细胞的老化第26-29页
     ·卵丘细胞调节卵母细胞的老化第29-30页
   ·本文的研究目的和意义第30-32页
2 材料与方法第32-37页
   ·主要试剂及配制第32-33页
   ·实验动物及超排处理第33页
   ·体内成熟卵母细胞的获取第33页
   ·裸卵的制备第33页
   ·卵母细胞体外老化处理第33页
   ·乙醇结合 6-DMAP 激活第33-34页
   ·SrCl_2激活处理第34页
   ·胚胎培养第34页
   ·皮质颗粒染色第34-35页
   ·卵母细胞纺锤体(α-微管蛋白)染色第35页
   ·Bcl-2 蛋白染色第35页
   ·激光扫描共聚焦显微术第35页
   ·实验设计第35-36页
   ·数据统计分析第36-37页
3 结果与分析第37-68页
   ·不同温度下 MG132 抑制卵母细胞老化所需要的浓度第37-39页
     ·37 ℃时 MG132 抑制卵母细胞老化所需要的浓度第37-38页
     ·25 ℃时 MG132 抑制卵母细胞老化所需要的浓度第38-39页
     ·15 ℃时 MG132 抑制卵母细胞老化所需要的浓度第39页
   ·不同温度下 MG132 处理卵母细胞恢复后的发育情况第39-43页
     ·37 ℃时 MG132 处理卵母细胞恢复后的发育第39-42页
     ·25 ℃时 MG132 处理卵母细胞恢复后的发育第42页
     ·15 ℃时 MG132 处理卵母细胞恢复后的发育第42-43页
   ·MG132 对卵母细胞纺锤体形态和皮质颗粒分布以及 Bcl-2 蛋白水平的影响第43-46页
   ·不同温度下咖啡因抑制卵母细胞老化所需要的浓度第46-48页
     ·37 ℃时咖啡因抑制卵母细胞老化所需要的浓度第46页
     ·25 ℃时咖啡因抑制卵母细胞老化所需要的浓度第46-47页
     ·15 ℃时咖啡因抑制卵母细胞老化所需要的浓度第47-48页
   ·不同温度下咖啡因处理卵母细胞恢复后的发育情况第48-51页
     ·37 ℃时咖啡因处理卵母细胞恢复后的发育第48-50页
     ·15 ℃时咖啡因处理卵母细胞恢复后的发育第50-51页
   ·不同温度下半胱胺和胱氨酸抑制卵母细胞老化所需要的浓度第51-53页
     ·37 ℃时半胱胺和胱氨酸抑制卵母细胞老化所需要的浓度第51-52页
     ·25 ℃时半胱胺和胱氨酸抑制卵母细胞老化所需要的浓度第52-53页
     ·15 ℃时半胱胺和胱氨酸抑制卵母细胞老化所需要的浓度第53页
   ·不同温度下半胱胺和胱氨酸处理卵母细胞恢复后的发育情况第53-59页
     ·37 ℃时半胱胺和胱氨酸处理卵母细胞恢复后的发育第53-57页
     ·25 ℃时半胱胺和胱氨酸处理卵母细胞恢复后的发育第57-58页
     ·15 ℃时半胱胺和胱氨酸处理卵母细胞恢复后的发育第58页
     ·15 ℃时 Vc 处理卵母细胞恢复后的发育第58-59页
   ·抗氧化剂对卵母细胞纺锤体形态和皮质颗粒分布以及 Bcl-2 蛋白水平的影响第59-64页
     ·半胱胺和胱氨酸对卵母细胞纺锤体形态和皮质颗粒分布以及 Bcl-2 蛋白水平的影响第59-61页
     ·Vc 对卵母细胞纺锤体形态和皮质颗粒分布以及 Bcl-2 蛋白水平的影响第61-64页
   ·半胱胺和胱氨酸结合其他老化抑制剂处理卵母细胞恢复后的发育情况第64-65页
   ·冈田酸对排卵后卵母细胞体外老化的调控第65-67页
     ·抑制卵母细胞老化所需要的冈田酸浓度第65-66页
     ·冈田酸抑制卵母细胞老化的可逆性第66-67页
   ·卵丘细胞在冈田酸抑制卵母细胞老化过程中的作用第67-68页
4 讨论第68-80页
   ·培养液的选择第68页
   ·选择 COC 作为实验的模型第68页
   ·OA 对卵母细胞老化的调控第68-70页
   ·低温对卵母细胞老化的抑制作用第70-71页
   ·MG132 处理后对卵母细胞老化的影响第71-72页
   ·咖啡因处理后对卵母细胞老化的影响第72-74页
   ·抗氧化剂对小鼠卵母细胞老化的调控第74-77页
     ·半胱胺和胱氨酸对小鼠卵母细胞老化的调控第74-75页
     ·维生素 C 对小鼠卵母细胞老化的调控第75-76页
     ·低的孤雌激活率和维持发育能力是保存卵母细胞的条件第76-77页
   ·15 ℃时抑制卵母细胞老化对纺锤体形态和皮质颗粒分布以及 Bcl-2 蛋白水平的影响第77-80页
     ·抑制卵母细胞老化对纺锤体形态的影响第77-78页
     ·抑制卵母细胞老化对皮质颗粒分布的影响第78页
     ·抑制卵母细胞老化对抗凋亡蛋白 Bcl-2 水平的影响第78-80页
5 结论第80-82页
参考文献第82-95页
附录第95-97页
致谢第97-98页
作者简介第98页

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