摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
主要符号对照表 | 第9-11页 |
第1章 引言 | 第11-29页 |
·纤毛的结构、功能与人类相关疾病 | 第11-16页 |
·纤毛的结构 | 第11-13页 |
·纤毛的功能 | 第13-14页 |
·纤毛与人类疾病 | 第14-16页 |
·纤毛的组装与解聚 | 第16-21页 |
·衣藻作为模式生物研究鞭毛 | 第16-18页 |
·IFT 复合体与 IFT 机制调控 | 第18-21页 |
·微管调控与 Kinesin 家族蛋白 | 第21-27页 |
·微管的动态学变化 | 第21-23页 |
·Kinesin 家族研究概述 | 第23-26页 |
·Kinesin 家族成员的调控机制概述 | 第26-27页 |
·本文研究背景、内容与意义 | 第27-29页 |
第2章 实验材料与方法 | 第29-53页 |
·实验材料 | 第29-32页 |
·实验用的藻株、菌株、载体 | 第29页 |
·常用抗体、试剂及试剂盒 | 第29-30页 |
·常用溶液及配制方法 | 第30-31页 |
·常用仪器设备 | 第31页 |
·常用数据库和软件 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-53页 |
·衣藻细胞的培养 | 第32页 |
·衣藻细胞的计数 | 第32页 |
·衣藻细胞的去鞭毛处理 | 第32-34页 |
·衣藻细胞的鞭毛缩短处理 | 第34页 |
·衣藻细胞的鞭毛长度测定 | 第34页 |
·衣藻细胞鞭毛的提取 | 第34-35页 |
·衣藻细胞的 Glass beads 法转化 | 第35-36页 |
·衣藻细胞的电击法转化 | 第36-37页 |
·衣藻转化子的筛选 | 第37页 |
·蛋白质标准曲线与蛋白质浓度测定 | 第37-39页 |
·蛋白质电泳、考马斯亮蓝染色和免疫印记 | 第39-40页 |
·衣藻细胞免疫共沉淀(IP) | 第40-41页 |
·衣藻细胞免疫荧光(IF) | 第41-42页 |
·衣藻细胞游离微管蛋白和聚合微管的分离 | 第42页 |
·衣藻基因组 DNA 的提取 | 第42-43页 |
·分子克隆相关实验方法 | 第43-47页 |
·昆虫细胞表达 CrKin13 蛋白 | 第47页 |
·微管的体外合成以及共沉淀、解聚实验 | 第47-48页 |
·荧光微管实验 | 第48-49页 |
·微管浊度实验 | 第49页 |
·细菌蛋白的表达与纯化 | 第49-50页 |
·酵母双杂交 | 第50-52页 |
·细胞裂解物体外磷酸化 CrKin13 蛋白 | 第52页 |
·免疫去除(Immunodepletion) | 第52-53页 |
第3章 衣藻鞭毛再生与胞质微管的解聚 | 第53-65页 |
·本章背景与引论 | 第53-54页 |
·实验结果与分析 | 第54-64页 |
·细胞质微管的动态学变化对于鞭毛的作用 | 第54-56页 |
·鞭毛再生初期细胞质微管发生解聚 | 第56-57页 |
·衣藻细胞鞭毛延长时微管骨架的影响 | 第57-58页 |
·蛋白质磷酸化对于衣藻细胞鞭毛再生时微管骨架的影响 | 第58-61页 |
·突变体细胞再生鞭毛时微管骨架的变化 | 第61页 |
·细胞质中微管蛋白的周转变化与鞭毛中微管蛋白的含量 | 第61-64页 |
·本章小结与讨论 | 第64-65页 |
第4章 衣藻鞭毛再生与 CrKin13 蛋白的调节 | 第65-86页 |
·本章背景与引论 | 第65-66页 |
·实验结果与分析 | 第66-84页 |
·标签 CrKin13 蛋白的内源性表达与鉴定 | 第66-68页 |
·S100 为 CrKin13 蛋白磷酸化的主要位点 | 第68-72页 |
·磷酸化调节 CrKin13 蛋白定位于微管上 | 第72-74页 |
·S100 的磷酸化调节 CrKin13 蛋白定位于微管上 | 第74-75页 |
·鞭毛再生初期 CrKin13 蛋白在鞭毛中富集 | 第75-77页 |
·CrKin13 蛋白体外解聚微管的活性 | 第77-84页 |
·本章小结与讨论 | 第84-86页 |
第5章 衣藻鞭毛缩短与 CrKin13 的运输 | 第86-96页 |
·本章背景与引论 | 第86-87页 |
·实验结果与分析 | 第87-93页 |
·缺失突变 CrKin13 蛋白的细胞内表达 | 第87-90页 |
·缺失突变对 CrKin13 鞭毛运输的影响 | 第90-91页 |
·磷酸化对 CrKin13 鞭毛运输的影响 | 第91-93页 |
·本章小结与讨论 | 第93-96页 |
第6章 CrKin13 蛋白的激酶和相互作用蛋白的初步研究 | 第96-112页 |
·本章背景与引论 | 第96-97页 |
·实验结果 | 第97-109页 |
·CrKin13 蛋白与 CALK 蛋白激酶的关系 | 第97-100页 |
·用蛋白激酶抑制剂研究 CrKin13 蛋白的可能激酶 | 第100-103页 |
·免疫沉淀与酵母双杂交研究 CrKin13 蛋白的相互作用蛋白 | 第103-109页 |
·本章小结与讨论 | 第109-112页 |
第7章 总结与展望 | 第112-118页 |
参考文献 | 第118-135页 |
致谢 | 第135-137页 |
附录 A 常用溶液配制方法 | 第137-144页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第144页 |