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转BADH基因植物的抗逆性与钙离子信号及热激蛋白的关系

符号说明第1-11页
中文摘要第11-14页
Abstract第14-18页
1 前言第18-32页
   ·甜菜碱与植物的抗逆性第19-23页
     ·甜菜碱对光合机构的保护作用第19-20页
     ·甜菜碱对活性氧清除系统的保护作用第20-21页
     ·甜菜碱可以维持生物膜的稳定性第21页
     ·甜菜碱可以影响基因表达水平第21-23页
   ·热激蛋白与植物的抗逆性第23-26页
     ·热激蛋白的分子伴侣作用第23-25页
     ·热激蛋白对光合机构的保护作用第25-26页
   ·甜菜碱和热激蛋白的关系及胁迫条件下细胞内信号交谈第26-30页
     ·甜菜碱和钙离子信号第26-27页
     ·钙离子信号诱导合成热激蛋白第27-29页
     ·钙离子与活性氧信号的交谈第29-30页
   ·本研究的目的和意义第30-32页
2 材料与方法第32-48页
   ·实验材料第32-34页
     ·植物材料第32页
     ·酶及生化试剂第32页
     ·主要仪器第32页
     ·Real-Time PCR 引物第32-34页
     ·植物材料培养与处理第34页
   ·实验方法第34-47页
     ·非损伤微测技术第34-37页
       ·非损伤微测技术简介第34-35页
       ·非损伤微测技术测定离子流速的试剂配制第35页
       ·离子流测定的材料处理第35-36页
       ·数据处理第36-37页
     ·激光共聚焦显微镜观察细胞内自由钙离子浓度的变化第37-38页
       ·实验材料第37页
       ·处理步骤第37-38页
       ·激光共聚焦显微镜观测第38页
     ·钙含量的测定第38-39页
     ·Real-Time PCR第39-42页
       ·植物材料总 RNA 的提取第39-40页
       ·反转录获得 cDNA 第一条链第40-41页
       ·Real-Time PCR 体系及反应条件第41-42页
     ·Western 杂交检测第42-44页
       ·植物总蛋白的提取第42页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第42-43页
       ·半干法转移蛋白第43-44页
       ·封闭及杂交第44页
       ·显色第44页
     ·活性氧含量的测定第44-46页
       ·过氧化氢含量的测定第44-45页
       ·超氧阴离子自由基含量的测定第45页
       ·NBT 染色第45-46页
     ·丙二醛含量和相对电导率的测定第46页
     ·抗氧化酶活性测定第46页
     ·光合性能的测定第46-47页
       ·光合速率的测定第46页
       ·调制式荧光仪荧光参数的测定第46-47页
       ·快速叶绿素荧光诱导曲线的测定第47页
     ·甜菜碱含量的测定第47页
   ·统计分析第47-48页
3 结果与分析第48-80页
   ·甜菜碱影响钙离子信号第48-56页
     ·扫点实验确定检测位点第48页
     ·盐胁迫下钙离子流的动力学趋势第48-50页
     ·甜菜碱促进了盐胁迫诱导的钙离子内流第50-53页
     ·甜菜碱提高细胞内[Ca~(2+)]_(cyt)第53-55页
     ·甜菜碱提高了盐和高温胁迫下的植物体内钙的积累第55-56页
   ·甜菜碱和钙–钙调蛋白途径第56-63页
     ·盐胁迫和热激下甜菜碱增强植物中钙调蛋白的 mRNA 水平第56-58页
     ·胁迫下钙-钙调蛋白途径对热激蛋白表达的影响第58-60页
     ·甜菜碱可通过钙–钙调蛋白途径诱导 HSP70 的合成第60-63页
   ·甜菜碱与活性氧清除系统第63-74页
     ·胁迫条件下甜菜碱对活性氧积累的影响第63-67页
       ·BADH 的表达提高了植物体内的甜菜碱含量第63-64页
       ·积累甜菜碱可以减少活性氧的积累第64-66页
       ·NBT 染色检测活性氧(O2~-)的积累第66-67页
     ·甜菜碱不能直接清除活性氧第67-68页
     ·甜菜碱与活性氧清除酶系统第68-70页
     ·甜菜碱诱导抗氧化酶基因的表达第70-72页
     ·甜菜碱减轻膜损伤第72-74页
   ·甜菜碱对光合系统的保护作用第74-80页
     ·甜菜碱提高 D1 蛋白的含量第74-75页
     ·甜菜碱提高胁迫下的光合性能第75-77页
     ·甜菜碱提高 PSII 的抗逆性涉及钙离子信号第77-80页
4 讨论第80-92页
   ·甜菜碱增强了胁迫下的钙离子信号第82-84页
   ·甜菜碱提高 HSP 的积累涉及钙–钙调蛋白途径第84-86页
   ·甜菜碱影响活性氧的清除机制第86-89页
   ·甜菜碱提高了逆境下叶片 PSII 的活性第89-92页
5 结论第92-94页
参考文献第94-110页
致谢第110-111页
攻读学位期间发表论文情况第111页

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