| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-25页 |
| ·肽聚糖识别蛋白 | 第15-20页 |
| ·PGRPs的结构 | 第16-17页 |
| ·PGRPs的表达分布 | 第17-18页 |
| ·PGRPs的功能 | 第18-20页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶 | 第20-23页 |
| ·GSTs的分类与结构 | 第20-22页 |
| ·GSTs的功能 | 第22-23页 |
| ·本研究目的和内容 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的意义 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-25页 |
| 2 三角帆蚌肝胰腺cDNA文库构建 | 第25-44页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·实验材料与方法 | 第25-32页 |
| ·实验材料与试剂 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·实验结果 | 第32-38页 |
| ·样品总RNA及纯化的mRNA | 第32-33页 |
| ·差减cDNA文库的构建和差异cDNA片段的筛选 | 第33-35页 |
| ·差异cDNA片段的PCR筛选 | 第35-36页 |
| ·测序结果和生物信息学分析 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-44页 |
| ·细胞凋亡相关基因 | 第39页 |
| ·细胞骨架重构相关基因 | 第39-40页 |
| ·基因转录和信号传导相关蛋白 | 第40-41页 |
| ·细胞代谢相关蛋白 | 第41-42页 |
| ·免疫相关蛋白 | 第42页 |
| ·其它相关基因 | 第42-44页 |
| 3 三角帆蚌PGRPS1的克隆表达及功能特性分析 | 第44-69页 |
| ·引言 | 第44-45页 |
| ·实验材料与方法 | 第45-54页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·实验材料、载体和菌株 | 第46页 |
| ·RNA提取 | 第46-47页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第47页 |
| ·RACE方法克隆三角帆蚌PGRPS1基因cDNA全长 | 第47-48页 |
| ·序列分析 | 第48-49页 |
| ·三角帆蚌PGRS1基因在不同组织中的表达 | 第49-51页 |
| ·实时荧光定量PCR检测HcPGRPS1经LPS、PGN刺激后的表达变化 | 第51页 |
| ·三角帆蚌PGRPS1基因的原核表达和兔多克隆抗体的制备.(37) | 第51-53页 |
| ·目的蛋白的复性 | 第53页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS1与肽聚糖的结合实验 | 第53-54页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS1的酰胺酶活性检测 | 第54页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS1的抑菌活性检测 | 第54页 |
| ·实验结果 | 第54-66页 |
| ·三角帆蚌PGRPS1基因的cDNA全长及推导的氨基酸序列 | 第54-55页 |
| ·三角帆蚌PGRPS1的同源性比较和系统进化关系分析 | 第55-58页 |
| ·三角帆蚌PGRPS1在各个组织中的表达分析 | 第58-60页 |
| ·荧光定量PCR检测三角帆蚌PGRPS1基因的诱导变化 | 第60-62页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS1在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第62-63页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS1与肽聚糖的结合 | 第63-64页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS1的酰胺酶活性检测 | 第64-65页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS1的抗菌活性 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| 4 三角帆蚌PGRPS2的克隆与表达分析 | 第69-86页 |
| ·引言 | 第69-70页 |
| ·实验材料与方法 | 第70-72页 |
| ·实验材料 | 第70页 |
| ·基因的克隆 | 第70页 |
| ·三角帆蚌PGRPS2基因选择性剪接异构体序列的克隆 | 第70-71页 |
| ·三角帆蚌PGRPS2组织表达和刺激后基因的表达变化 | 第71页 |
| ·三角帆蚌PGRPS2基因的原核表达及抗体制备 | 第71页 |
| ·三角帆蚌PGRPS2蛋白在组织中的表达分布 | 第71-72页 |
| ·实验结果 | 第72-83页 |
| ·三角帆蚌PGRPS2基因及其剪接异构体的cDNA全长及推导的氨基酸序列 | 第72-74页 |
| ·三角帆蚌PGRPS2的同源性比较和系统进化关系分析 | 第74-77页 |
| ·三角帆蚌PGRPS2在各个组织中的表达分析 | 第77-79页 |
| ·荧光定量PCR检测三角帆蚌PGRPS2基因的诱导变化 | 第79-81页 |
| ·三角帆蚌HcPGRPS2在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第81-82页 |
| ·免疫印迹 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| 5 三角帆蚌GSTS的克隆与表达分析 | 第86-102页 |
| ·引言 | 第86-87页 |
| ·实验材料与方法 | 第87-89页 |
| ·实验材料 | 第87页 |
| ·基因的克隆、组织表达和刺激后基因的表达变化 | 第87页 |
| ·三角帆蚌GSTS基因的原核表达及纯化 | 第87-88页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第88-89页 |
| ·HcGST酶活性的测定 | 第89页 |
| ·实验结果 | 第89-99页 |
| ·三角帆蚌GSTS基因cDNA全长及推导的氨基酸序列 | 第89-91页 |
| ·三角帆蚌GSTS的同源性比较 | 第91-92页 |
| ·三角帆蚌GSTS的系统进化关系分析 | 第92-94页 |
| ·三角帆蚌GSTS在各个组织中的表达分析 | 第94-96页 |
| ·荧光定量PCR检测三角帆蚌GSTS基因的诱导变化 | 第96-98页 |
| ·三角帆蚌HcGSTS在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第98-99页 |
| ·三角帆蚌HcGSTS基因可溶蛋白活性测定 | 第99页 |
| ·讨论 | 第99-102页 |
| 6 全文总结 | 第102-105页 |
| ·研究结论 | 第102-103页 |
| ·创新点 | 第103-104页 |
| ·研究展望 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-128页 |
| 附录1 攻读博士学位期间发表论文目录 | 第128-129页 |
| 附录2 攻读博士学位期间参加课题及获奖目录 | 第129页 |
