| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 肝癌中 RACK1 与 p-MKK7、p-JNK 相关性分析 | 第15-27页 |
| 第一节 肝癌中 RACK1 与 p-JNK 相关性检测 | 第16-20页 |
| 1 材料和方法 | 第16-18页 |
| ·细胞株 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·常用试剂的配制 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-18页 |
| 2 结果 | 第18-20页 |
| ·肝癌细胞系中 RACK1 表达与 p-MKK7、p-JNK 水平存在正相关性 | 第18-19页 |
| ·肝癌组织样品中 RACK1 表达与 p-JNK 水平存在正相关性 | 第19-20页 |
| 第二节 肝癌中 RACK1 对 MKK7/JNK 通路的影响 | 第20-26页 |
| 1 材料与方法 | 第20-22页 |
| ·细胞株及质粒 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·转染用质粒的制备 | 第21页 |
| ·HepG2 稳转细胞系 HepG2-GFP-RACK1 WT 的构建 | 第21页 |
| ·HepG2 稳定低表达 RACK1 细胞系的构建 | 第21-22页 |
| ·慢病毒感染瞬时敲低 RACK1 表达 | 第22页 |
| 2 结果 | 第22-25页 |
| ·SMMC7721 细胞中应用 JNK 抑制剂对 RACK1 表达的影响 | 第22-23页 |
| ·HepG2 细胞中 RACK1 过表达对 MKK7/JNK 通路的影响 | 第23页 |
| ·瞬时敲低肝癌细胞中 RACK1 表达对 MKK7/JNK 通路的影响 | 第23-24页 |
| ·HepG2 细胞中稳定敲低 RACK1 表达对 MKK7/JNK 通路的影响 | 第24-25页 |
| 3 讨论 | 第25-26页 |
| 本章小结 | 第26-27页 |
| 第二章 肝癌中 RACK1 调节 JNK 的机制探讨 | 第27-33页 |
| 1 材料和方法 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·主要实验仪器 | 第27页 |
| ·常规试剂配制 | 第27-28页 |
| ·免疫共沉淀 | 第28页 |
| ·激酶活性分析 | 第28页 |
| 2 结果 | 第28-31页 |
| ·RACK1 敲低后 MKK7 与其上游激酶相互作用减弱 | 第28-29页 |
| ·过表达 RACK1 对其它 MAP3Ks 底物的磷酸化水平没有影响 | 第29-30页 |
| ·RACK1 主要增强 JNK1 活化 | 第30-31页 |
| 3.讨论 | 第31-32页 |
| 本章小结 | 第32-33页 |
| 第三章 RACK1 与 MKK7 相互作用对肝癌细胞生长的影响 | 第33-39页 |
| 1．材料与方法 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| 2 结果 | 第34-36页 |
| ·RACK1 对肝癌细胞集落形成能力的影响 | 第34-35页 |
| ·RACK1 对肝癌细胞成瘤性的影响 | 第35-36页 |
| 3.讨论 | 第36-37页 |
| 本章小结 | 第37-39页 |
| 第四章 RACK1 对 TRAIL、Fas 诱导肝癌细胞凋亡的影响 | 第39-45页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-42页 |
| ·敲低 RACK1 后肝癌细胞对 TRAIL、Fas 诱导凋亡敏感性增加 | 第40-41页 |
| ·MKK7 逆转 RACK1 敲低肝癌细胞对 TRAIL、Fas 诱导凋亡的抵抗29 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 本章小结 | 第43-45页 |
| 第五章 肝癌中 RACK1 高表达机制探讨 | 第45-53页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| 2 结果 | 第46-50页 |
| ·肝癌中 RACK1 mRNA 水平 | 第46-48页 |
| ·预测可能靶向 RACK13’ UTR 与 5’ UTR 的 microRNA | 第48-49页 |
| ·靶向 miR-99a 和 miR-99b 干扰 RACK1 表达 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 本章小结 | 第52-53页 |
| 第六章 RACK1 对肝癌细胞自噬的影响 | 第53-59页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-57页 |
| ·敲低 RACK1 后肝癌细胞本底自噬增加 | 第55-56页 |
| ·敲低 RACK1 调节肝癌细胞自噬与 JNK 通路无关 | 第56页 |
| ·自激活的 AKT 可以逆转 RACK1 对自噬的影响 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 本章小结 | 第58-59页 |
| 全文总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 综述 | 第63-73页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 个人简历 | 第75-77页 |
