| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| ·猪骨骼肌生长发育与猪肉的生产 | 第13-17页 |
| ·肌纤维的生长发育 | 第13-14页 |
| ·肌纤维的类型 | 第14-15页 |
| ·不同肌纤维类型的特点 | 第15页 |
| ·肌纤维之间的转化 | 第15-16页 |
| ·肌纤维与肉质性状的关系 | 第16-17页 |
| ·钙调神经磷酸酶信号通路及其在肌纤维发育中的作用 | 第17-20页 |
| ·钙调神经磷酸酶的研究进展 | 第17-19页 |
| ·钙调神经磷酸酶在肌纤维发育中的作用 | 第19-20页 |
| ·MYOZ1基因的研究现状及其在肌纤维形成过程中的作用 | 第20-22页 |
| ·研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-38页 |
| ·试验材料 | 第24-27页 |
| ·样品 | 第24页 |
| ·组织样品 | 第24页 |
| ·细胞样品 | 第24页 |
| ·载体和菌株 | 第24页 |
| ·主要试剂盒和酶 | 第24-25页 |
| ·主要所用试剂的配置 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备和耗材 | 第26页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-38页 |
| ·猪组织总RNA的提取 | 第27页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| ·MYOZ1基因CDS区扩增产物及比对 | 第28-30页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·PCR扩增的条件 | 第28-29页 |
| ·PCR产物的回收、克隆和测序 | 第29-30页 |
| ·实时定量PCR绘制基因组织表达谱 | 第30-32页 |
| ·引物设计 | 第30-31页 |
| ·qPCR体系和反应程序 | 第31-32页 |
| ·数据分析 | 第32页 |
| ·超表达载体的构建和RNAi片段的设计 | 第32-35页 |
| ·猪MYOZ1基因超表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·干涉片段的设计 | 第34-35页 |
| ·细胞培养和转染 | 第35-37页 |
| ·细胞培养 | 第35页 |
| ·转染 | 第35-37页 |
| ·荧光定量PCR检测MYOZ1超表达效率和沉默效率 | 第37-38页 |
| ·qPCR体系和反应程序 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-51页 |
| ·猪组织总RNA提取 | 第38页 |
| ·MYOZ1基因CDS区扩增产物及比对 | 第38-39页 |
| ·MYOZ1基因在通城猪的不同生长阶段中的相对表达量 | 第39-40页 |
| ·MYOZ1基因在大白猪的不同生长阶段中的相对表达量 | 第40-41页 |
| ·MYOZ1基因在猪的背最长肌和咬肌中的相对表达量 | 第41页 |
| ·基因PPP3CA、PPP3CB、PPP3R1在猪的背最长肌和咬肌中的相对表达量. | 第41-42页 |
| ·MYOZ1基因干涉实验结果 | 第42-45页 |
| ·C2C12细胞的培养情况 | 第42-43页 |
| ·C2C12细胞的转染效率 | 第43页 |
| ·转染MYOZ1干涉片段后的干涉效果结果 | 第43-44页 |
| ·转染MY2组干涉片段后PPP3CA、PPP3CB和PPP3R1的相对表达量 | 第44-45页 |
| ·MYOZ1基因过表达实验结果 | 第45-51页 |
| ·猪MYOZ1基因的内切酶位点分析 | 第45页 |
| ·猪MYOZ1基因包含酶切位点的CDS(922bp)区的扩增 | 第45-46页 |
| ·质粒提取结果及酶切检测结果 | 第46-47页 |
| ·C2C12细胞的培养情况 | 第47页 |
| ·C2C12细胞的转染效率 | 第47-48页 |
| ·转染pcDNA3.1空载体后小鼠的MYOZ1,PPP3CA,PPP3CB和PPP3R1基因相对表达量 | 第48-49页 |
| ·转染过表达载体后猪MYOZ1基因和小鼠PPP3CA、PPP3CB和PPP3R1基因的相对表达量 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-58页 |
| ·荧光实时定量方法的应用及讨论 | 第51-52页 |
| ·关于RNA干涉原理与方法的讨论 | 第52-53页 |
| ·关于MYOZ1基因与肌纤维生长发育的关系 | 第53-54页 |
| ·关于MYOZ1基因、钙调神经磷酸酶与不同肌纤维类型间的关系 | 第54-56页 |
| ·关于MYOZ1基因与钙调神经磷酸酶之间的作用关系 | 第56-57页 |
| ·干涉结果 | 第56页 |
| ·过表达结果 | 第56-57页 |
| ·下一步工作 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
