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致病性大肠杆菌、沙门氏菌毒力岛双重PCR方法建立与应用

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩写词表第11-12页
文献综述第12-19页
引言第19-20页
技术路线第20-21页
1 材料与方法第21-28页
   ·实验材料第21-22页
     ·菌株第21页
     ·分子生物学试剂第21页
     ·其他试剂及材料第21页
     ·常用溶液第21页
     ·主要仪器设备第21-22页
   ·实验方法第22-28页
     ·致病性大肠杆菌、沙门氏菌毒力岛标志性基因的 PCR 检测第22-24页
       ·细菌的增殖第22页
       ·细菌DNA的提取(DNA模板的制备)第22页
       ·引物设计第22-23页
       ·DNA 浓度的测定第23页
       ·PCR 扩增第23页
       ·PCR 产物的检测第23-24页
       ·PCR 优化实验第24页
    (1) 引物浓度的优化实验第24页
    (2) TaqDNA 聚合酶浓度的测定第24页
       ·PCR 产物的测序第24页
     ·致病性大肠杆菌、沙门氏菌毒力岛标志性基因的双重 PCR 检测第24-25页
       ·引物的特异性实验第24页
       ·致病性大肠杆菌、沙门氏菌双重 PCR 引物组合检测第24-25页
       ·双重 PCR 的敏感性实验第25页
     ·致病性大肠杆菌沙门氏菌毒力岛基因双重 PCR 方法在畜禽中检测第25-28页
       ·分离材料的采集第25页
       ·细菌的分离培养第25页
    (1) 畜禽大肠杆菌的分离培养第25页
    (2) 畜禽沙门氏菌的分离培养第25页
       ·染色镜检第25页
       ·生化鉴定第25-27页
    (1) 大肠杆菌分离株的生化鉴定第25-26页
    (2) 沙门氏菌分离株的生化鉴定第26-27页
       ·致病性大肠杆菌沙门氏菌毒力岛基因双重PCR方法在畜禽中检测第27-28页
2 结果第28-41页
   ·致病性大肠杆菌、沙门氏菌毒力岛标志性基因的PCR扩增结果第28-34页
     ·致病性大肠杆菌毒力岛irp1、irp2及fyuA基因的PCR扩增第28页
     ·沙门氏菌毒力岛 mgtC、sseL 及 sopB 基因的 PCR 扩增第28-29页
     ·PCR 条件优化实验结果第29-33页
       ·引物浓度的优化结果第29-31页
    (1) 致病性大肠杆菌毒力岛基因引物浓度的优化结果第29-30页
    (2) 沙门氏菌毒力岛基因引物浓度的优化结果第30-31页
       ·TaqDNA 聚合酶浓度的优化结果第31-33页
    (1) 致病性大肠杆菌毒力岛基因 TaqDNA 聚合酶浓度的优化结果第31-32页
    (2) 沙门氏菌毒力岛基因 TaqDNA 聚合酶浓度的优化结果第32-33页
     ·测序结果第33-34页
       ·致病性大肠杆菌毒力岛基因测序的结果第33页
       ·沙门氏菌毒力岛基因测序的结果第33-34页
   ·致病性大肠杆菌、沙门氏菌毒力岛标志性基因的双重 PCR 检测结果第34-36页
     ·引物的特异性结果第34-35页
       ·致病性大肠杆菌引物的特异性结果第34页
       ·沙门氏菌引物的特异性结果第34-35页
     ·致病性大肠杆菌、沙门氏菌毒力岛标志性基因的双重 PCR 引物组合结果第35页
     ·双重 PCR 灵敏度果第35-36页
   ·致病性大肠杆菌沙门氏菌毒力岛的双重 PCR 检测方法在畜禽检测中的应用第36-41页
     ·菌株的分离培养第36-37页
       ·大肠杆菌的分离培养第36-37页
       ·沙门氏菌的分离培养第37页
     ·分离株的生化鉴定结果第37-39页
       ·大肠杆菌分离株的生化鉴定结果第37-38页
       ·沙门氏菌分离株的生化鉴定结果第38-39页
     ·致病性大肠杆菌沙门氏菌毒力岛双重 PCR 的应用第39-41页
3 讨论第41-44页
4 结论第44-45页
参考文献第45-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页
附作者在读期间发表的学术论文第51页

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