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夜来香生物钟及花香基因的克隆

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
第一章 前言第13-20页
 1 研究背景第13页
 2 文献综述第13-18页
   ·植物生物钟遗传控制的研究进展第13-17页
     ·光信号的输入第13-14页
     ·生物钟的信号处理第14-15页
     ·生物钟的信号输出第15-17页
     ·植物花器官与气孔的感性运动第17页
   ·植物的花香形成与释放研究进展第17-18页
 3 本研究的主要内容第18-19页
 4 本研究的技术路线第19-20页
第二章 cDNA 抑制差减杂交体系的建立第20-39页
 1.材料与方法第20-25页
   ·植物材料第20页
   ·夜来香花瓣总 RNA 的提取第20-21页
   ·DSN 介导的双链 cDNA 抑制差减杂交第21-24页
     ·cDNA 第一链的合成与纯化第21页
     ·Tester 的制备第21-22页
     ·Driver 的制备第22页
     ·杂交与 DSN 处理第22-23页
     ·差异 cDNA 的扩增第23页
     ·差异 cDNA 的克隆与测序第23-24页
     ·差减效率的检测第24页
     ·差异文库的测序与生物信息学分析第24页
   ·差异基因的表达分析第24-25页
 2. 结果与分析第25-34页
   ·总 RNA 质量对 cDNA 第一链合成的影响第25页
   ·不同浓度 DSN 处理对抑制差减杂交效果的影响第25-28页
   ·差减文库的克隆效率与插入片段大小第28页
   ·抑制差减杂交效率的检测第28-29页
   ·抑制差减杂交文库测序结果的生物信息学分析第29-33页
   ·差异基因的表达分析第33-34页
 3 讨论第34-39页
   ·DSN-UDG 介导双链 cDNA 抑制差减杂交的策略第34-37页
   ·夜来香生物钟与花香形成释放相关差异基因的分离第37-39页
第三章 DOF 基因及其启动子的克隆第39-53页
 1.材料与方法第39-41页
   ·材料第39页
   ·方法第39-41页
     ·RACE 技术克隆基因及序列分析第39-40页
     ·CnDof 基因洋葱亚细胞定位第40-41页
     ·夜来香 DOF 基因启动子克隆与分析第41页
 2 结果与分析第41-50页
   ·夜来香 DOF 基因全长克隆第41-47页
     ·夜来香 DOF 基因 PCR 结果分析第41-43页
     ·夜来香 CnDof 基因的进化分析第43-44页
     ·CnDof 基因氨基酸生物信息学分析第44-47页
   ·CnDof 亚细胞定位第47-48页
   ·CnDof 基因启动子克隆第48-50页
     ·CnDof 基因全长扩增结果第48页
     ·DOF 启动子顺式作用元件分析第48-50页
 3 讨论第50-53页
   ·夜来香 DOF 基因克隆及功能分析第50-51页
   ·DOF 基因启动子分析第51-53页
第四章 夜来香花香相关基因的克隆第53-70页
 1 材料与方法第53-54页
   ·材料第53页
   ·方法第53-54页
     ·引物设计第53-54页
     ·保守区扩增、3'RACE 和 5'RACE第54页
     ·生物信息学分析与进化分析第54页
     ·表达量分析第54页
 2 结果与分析第54-67页
   ·夜来香 LIS 基因的克隆、生物信息学分析与动态表达分析第54-59页
     ·夜来香 LIS 基因克隆第55-56页
     ·夜来香 LIS 基因生物信息学分析第56-58页
     ·夜来香 LIS 基因表达分析第58-59页
   ·夜来香 Bgl 基因的克隆、生物信息学分析及动态表达分析第59-63页
     ·夜来香 Bgl 基因的克隆第59-60页
     ·夜来香 Bgl 基因生物信息学分析第60-62页
     ·夜来香 Bgl 基因表达分析第62-63页
   ·夜来香 FPPS 基因的克隆与生物信息学分析第63-67页
     ·夜来香 FPPS 基因的克隆第63-64页
     ·夜来香 FPPS 基因生物信息学分析第64-66页
     ·夜来香 FPPS 基因进化分析第66-67页
 3 讨论第67-70页
   ·LIS 基因在夜来香香气形成中的功能分析第67-68页
   ·β-葡萄糖苷酶基因在夜来香香气形成中的功能分析第68-69页
   ·FPPS 基因夜来香香气形成中的功能分析第69-70页
总结与展望第70-72页
附录一 细胞组件序列分布图第72-73页
附录二 生物进程序列分布图第73-74页
附录三 分子生物学功能分布图第74-75页
附录四 启动子序列及元件第75-82页
附录五 注释氨基酸生物合成图第82-83页
附录六 注释苯丙烷类代谢图第83-84页
附录七 注释脂肪酸代谢图第84-85页
附录八 注释萜类骨架生物合成代谢图第85-86页
参考文献第86-90页
致谢第90页

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