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苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体的修饰及稳定性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 绪论第11-23页
   ·研究背景第11页
   ·苯丙氨酸解氨酶研究进展第11-13页
     ·苯丙氨酸解氨酶的分布第11页
     ·苯丙氨酸解氨酶的分离纯化第11-12页
     ·苯丙氨酸解氨酶稳定性研究第12-13页
   ·交联酶聚体技术的研究进展第13-19页
     ·交联酶聚体技术制备条件的优化第14-15页
     ·交联酶聚体技术的优缺点第15页
     ·添加辅助剂制备交联酶聚体第15-16页
     ·多孔交联酶聚体的制备第16-17页
     ·印记交联酶聚体的制备第17-18页
     ·共价连接交联酶聚体的制备第18页
     ·包埋交联酶聚体的制备第18-19页
     ·新型交联酶聚体的制备第19页
   ·CLEAs 技术在不同酶中的应用第19-22页
     ·酰胺酶交联酶聚体第19-20页
     ·蛋白酶交联酶聚体第20页
     ·脂肪酶交联酶聚体第20-21页
     ·酯酶交联酶聚体第21页
     ·裂合酶类交联酶聚体第21-22页
   ·立题的目的和意义第22页
   ·研究内容第22-23页
第2章 糖类对 PAL-CLEAs 的修饰及稳定性研究第23-33页
   ·引言第23页
   ·材料第23-25页
     ·菌种第23页
     ·试剂第23-24页
     ·实验仪器第24-25页
   ·实验方法第25-27页
     ·培养基第25页
     ·酶活测定方法第25页
     ·粗酶的提取第25-26页
     ·糖类对 PAL-CLEAs 活性的影响第26页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 的温度稳定性第26页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 的酸碱处理稳定性第26页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 对有机溶剂的耐受性第26页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 的储存稳定性第26页
     ·PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 重复利用性第26-27页
   ·结果与分析第27-31页
     ·糖类对 PAL-CLEAs 活性的影响第27页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 的温度稳定性第27-28页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 的酸碱处理稳定性第28-29页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 在有机溶剂中的稳定性第29-30页
     ·游离酶、PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 储藏稳定性第30-31页
     ·PAL-CLEAs、蔗糖-PAL-CLEAs 的重复利用性第31页
   ·本章小结第31-33页
第3章 粘红酵母苯丙氨酸解氨酶的部分纯化第33-43页
   ·引言第33页
   ·材料与方法第33-35页
     ·菌种第33页
     ·主要实验试剂及耗材第33-34页
     ·实验仪器第34-35页
   ·实验方法第35-39页
     ·酶活测定方法第35页
     ·蛋白质含量测定方法―考马斯亮蓝法测蛋白质浓度第35-36页
     ·粘红酵母菌体的培养及分离第36页
     ·粗酶液的提取第36-37页
     ·苯丙氨酸解氨酶的部分纯化第37-38页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第38-39页
   ·结果分析第39-42页
     ·硫酸铵分级沉淀曲线第39页
     ·Sepharose 4B 凝胶过滤层析第39-40页
     ·DEAE sepharose FF 离子交换层析第40-41页
     ·苯丙氨酸解氨酶纯化步骤及纯化效率第41页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第41-42页
   ·本章小结第42-43页
第4章 淀粉、BSA 对 PAL-CLEAs 的修饰作用的研究第43-59页
   ·引言第43页
   ·材料第43-44页
     ·菌体第43页
     ·试剂第43-44页
     ·仪器第44页
   ·方法第44-46页
     ·部分纯化的 PAL 的制备第44页
     ·PAL-CLEAs 的制备第44-45页
     ·BSA-PALCLEAs 的制备第45页
     ·淀粉-PALCLEAs 的制备第45页
     ·淀粉-BSA-PALCLEAs 的制备第45-46页
     ·温度稳定性第46页
     ·pH 稳定性第46页
     ·有机溶剂稳定性第46页
     ·储藏稳定性第46页
     ·重复利用稳定性第46页
   ·结果与讨论第46-57页
     ·PAL-CLEAs 的制备第46-48页
     ·BSA-PALCLEAs 的制备第48-51页
     ·淀粉-PALCLEAs 的制备第51页
     ·淀粉-BSA-PALCLEAs 的制备第51-52页
     ·温度稳定性第52-53页
     ·pH 稳定性第53-54页
     ·有机溶剂稳定性第54-56页
     ·储藏稳定性第56-57页
     ·重复利用稳定性第57页
   ·本章小结第57-59页
结论第59-61页
参考文献第61-69页
攻读硕士学位期间所发表的论文第69-71页
致谢第71页

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