致谢 | 第1-5页 |
目录 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-21页 |
·非编码RNA 的分类和作用 | 第8-16页 |
·小于 50nt 的非编码 RNA | 第8-10页 |
·microRNA | 第8-9页 |
·siRNA | 第9-10页 |
·piRNA | 第10页 |
·50nt 到 500nt 大小的中等 ncRNA | 第10-15页 |
·小分子核RNA(snRNA) | 第10-11页 |
·小胞浆RNA(scRNA) | 第11页 |
·核仁小分子RNA(snoRNA) | 第11-15页 |
·大于 500nt 的长链非编码 RNA | 第15-16页 |
·非编码RNA 研究技术 | 第16-18页 |
·生物信息学方法预测新ncRNA | 第16页 |
·ncRNA 的测序鉴定 | 第16-17页 |
·直接测序 | 第16页 |
·cDNA 文库测序 | 第16-17页 |
·生物芯片分析 | 第17页 |
·基因组SELEX 技术 | 第17-18页 |
·功能性的RNA 组学方法 | 第18页 |
·昆虫非编码RNA 的研究进展 | 第18-19页 |
·家蚕丝腺研究进展 | 第19-21页 |
·家蚕丝腺结构和生理功能 | 第19-20页 |
·家蚕丝腺基因研究进展 | 第20-21页 |
2 引言 | 第21-22页 |
·研究目的和意义 | 第21页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
3 材料和方法 | 第22-33页 |
·实验器材与试剂 | 第22-24页 |
·实验材料 | 第22页 |
·实验仪器 | 第22页 |
·实验试剂及溶液配制 | 第22-24页 |
·主要药品与试剂 | 第22-23页 |
·试剂配制 | 第23-24页 |
·主要实验方法 | 第24-33页 |
·引物设计 | 第24-25页 |
·家蚕组织中总RNA 的提取 | 第25页 |
·RNA 的纯化 | 第25-26页 |
·变性PAGE 电泳检测RNA | 第26页 |
·探针的合成 | 第26-28页 |
·质粒的提取 | 第26-27页 |
·质粒载体线性化 | 第27页 |
·酶切产物纯化回收 | 第27-28页 |
·体外转录合成探针 | 第28页 |
·Northern 杂交 | 第28-29页 |
·RNA 样品的变性PAGE 电泳 | 第28页 |
·转膜 | 第28页 |
·RNA 的紫外交联 | 第28-29页 |
·预杂交 | 第29页 |
·杂交 | 第29页 |
·洗膜 | 第29页 |
·压片、曝光 | 第29页 |
·宿主基因的RT-PCR | 第29-30页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第29-30页 |
·PCR 反应 | 第30页 |
·非编码RNA 的RT-PCR | 第30-32页 |
·RNA 去磷酸化 | 第30页 |
·去磷酸化产物的trizol 纯化 | 第30-31页 |
·RNA 的3’加接头的方法 | 第31页 |
·反转录和cDNA 合成 | 第31-32页 |
·DNA 琼脂糖胶电泳 | 第32页 |
·丝腺细胞核、质 RNA 的分离 | 第32-33页 |
4 结果与分析 | 第33-42页 |
·Northern 分析ncRNA 在家蚕组织的差异 | 第33-35页 |
·家蚕不同组织部位总RNA 的提取及定量 | 第33页 |
·Northern 探针的制备及质量检测 | 第33-35页 |
·丝腺高丰度表达非编码RNA 的筛选 | 第35页 |
·丝腺高丰度表达的ncRNA 在前、中,后丝腺的分布情况 | 第35-38页 |
·部分丝腺高丰度表达的ncRNA 与宿主基因之间的关系 | 第38-39页 |
·丝腺高丰度表达的ncRNA 在丝腺细胞核、质的表达分析 | 第39-42页 |
5 结果与讨论 | 第42-45页 |
·结果 | 第42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
·丝腺高丰度表达ncRNA 的筛选 | 第43-44页 |
·丝腺高丰度表达ncRNA 在丝腺中的分布 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
Abstract | 第51-53页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第53页 |