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家蚕非编码RNA在丝腺中的表达研究

致谢第1-5页
目录第5-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-21页
   ·非编码RNA 的分类和作用第8-16页
     ·小于 50nt 的非编码 RNA第8-10页
       ·microRNA第8-9页
       ·siRNA第9-10页
       ·piRNA第10页
     ·50nt 到 500nt 大小的中等 ncRNA第10-15页
       ·小分子核RNA(snRNA)第10-11页
       ·小胞浆RNA(scRNA)第11页
       ·核仁小分子RNA(snoRNA)第11-15页
     ·大于 500nt 的长链非编码 RNA第15-16页
   ·非编码RNA 研究技术第16-18页
     ·生物信息学方法预测新ncRNA第16页
     ·ncRNA 的测序鉴定第16-17页
       ·直接测序第16页
       ·cDNA 文库测序第16-17页
     ·生物芯片分析第17页
     ·基因组SELEX 技术第17-18页
     ·功能性的RNA 组学方法第18页
   ·昆虫非编码RNA 的研究进展第18-19页
   ·家蚕丝腺研究进展第19-21页
     ·家蚕丝腺结构和生理功能第19-20页
     ·家蚕丝腺基因研究进展第20-21页
2 引言第21-22页
   ·研究目的和意义第21页
   ·研究内容第21-22页
3 材料和方法第22-33页
   ·实验器材与试剂第22-24页
     ·实验材料第22页
     ·实验仪器第22页
     ·实验试剂及溶液配制第22-24页
       ·主要药品与试剂第22-23页
       ·试剂配制第23-24页
   ·主要实验方法第24-33页
     ·引物设计第24-25页
     ·家蚕组织中总RNA 的提取第25页
     ·RNA 的纯化第25-26页
     ·变性PAGE 电泳检测RNA第26页
     ·探针的合成第26-28页
       ·质粒的提取第26-27页
       ·质粒载体线性化第27页
       ·酶切产物纯化回收第27-28页
       ·体外转录合成探针第28页
     ·Northern 杂交第28-29页
       ·RNA 样品的变性PAGE 电泳第28页
       ·转膜第28页
       ·RNA 的紫外交联第28-29页
       ·预杂交第29页
       ·杂交第29页
       ·洗膜第29页
       ·压片、曝光第29页
     ·宿主基因的RT-PCR第29-30页
       ·cDNA 第一条链的合成第29-30页
       ·PCR 反应第30页
     ·非编码RNA 的RT-PCR第30-32页
       ·RNA 去磷酸化第30页
       ·去磷酸化产物的trizol 纯化第30-31页
       ·RNA 的3’加接头的方法第31页
       ·反转录和cDNA 合成第31-32页
     ·DNA 琼脂糖胶电泳第32页
     ·丝腺细胞核、质 RNA 的分离第32-33页
4 结果与分析第33-42页
   ·Northern 分析ncRNA 在家蚕组织的差异第33-35页
     ·家蚕不同组织部位总RNA 的提取及定量第33页
     ·Northern 探针的制备及质量检测第33-35页
     ·丝腺高丰度表达非编码RNA 的筛选第35页
   ·丝腺高丰度表达的ncRNA 在前、中,后丝腺的分布情况第35-38页
   ·部分丝腺高丰度表达的ncRNA 与宿主基因之间的关系第38-39页
   ·丝腺高丰度表达的ncRNA 在丝腺细胞核、质的表达分析第39-42页
5 结果与讨论第42-45页
   ·结果第42页
   ·讨论第42-45页
     ·丝腺高丰度表达ncRNA 的筛选第43-44页
     ·丝腺高丰度表达ncRNA 在丝腺中的分布第44-45页
参考文献第45-51页
Abstract第51-53页
攻读硕士学位期间发表论文第53页

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