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抗伪狂犬病毒单克隆抗体的制备及gB基因编码蛋白抗原表位的表达

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第1章 文献综述第9-25页
   ·伪狂犬病研究进展第9-11页
     ·伪狂犬病的流行现状第9-10页
     ·伪狂犬病的流行病学研究第10-11页
     ·伪狂犬病的临床症状第11页
   ·伪狂犬病的诊断方法第11-13页
     ·临床诊断和病理组织学检查第11页
     ·动物接种试验第11页
     ·血清学诊断方法第11-13页
     ·分子生物学诊断第13页
   ·伪狂犬病的防治办法第13页
   ·伪狂犬病毒特征第13-17页
     ·伪狂犬病毒的基因组第14页
     ·伪狂犬病毒的主要糖蛋白第14-15页
     ·伪狂犬病毒的感染,增殖和释放第15-16页
     ·伪狂犬病毒的侵染途径第16-17页
   ·单克隆抗体技术及其应用第17-19页
     ·单克隆抗体技术第17页
     ·单克隆抗体研制现状第17-18页
     ·单克隆抗体的应用第18-19页
   ·原核表达系统研究第19-24页
     ·大肠杆菌表达系统第19-21页
     ·外源基因在大肠杆菌细胞中的表达第21-23页
     ·pET 表达系统第23-24页
   ·本研究的意义第24-25页
第2章 猪伪狂犬病毒杂交瘤细胞株的建立第25-49页
   ·试验仪器和材料第25-28页
     ·主要实验材料第25页
     ·主要仪器设备第25-26页
     ·主要培养基的配制第26页
     ·主要试剂的配制第26-28页
   ·试验方法第28-35页
     ·伪狂犬病毒的培养、纯化和鉴定第28-30页
     ·免疫接种第30-31页
     ·抗原最佳包被浓度和最佳血清稀释度的确定第31页
     ·杂交瘤细胞的制备第31-32页
     ·阳性杂交瘤细胞孔的筛选第32-33页
     ·阳性杂交瘤细胞的克隆第33-34页
     ·杂交瘤细胞培养上清效价及特异性的测定第34页
     ·杂交瘤细胞的扩大培养与保存第34页
     ·单克隆抗体的大量制备第34-35页
     ·单克隆抗体效价的及特异性测定第35页
   ·实验结果及分析第35-45页
   ·讨论第45-49页
第3章 gB 基因编码蛋白抗原表位区的表达第49-63页
   ·主要试剂盒、酶、载体和细胞第49页
   ·主要试剂第49-50页
   ·试验方法第50-54页
     ·引物的设计与合成第50页
     ·伪狂犬病毒模板DNA 的提取第50页
     ·PCR 最佳退火温度的确定第50页
     ·目的片段的克隆第50-51页
     ·目的片段的回收第51页
     ·目的片段与T 载体的连接第51页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第51页
     ·重组质粒pMD18-T-gB 的转化第51-52页
     ·质粒DNA 的提取第52页
     ·重组质粒pMD18-T-gB 的鉴定第52页
     ·重组质粒pMD18-T-gB 的双酶切第52页
     ·原核表达载体pET-28a 的双酶切第52页
     ·回收目的片段第52-53页
     ·目的基因与pET-28a 载体的连接第53页
     ·重组质粒pET-28a-gB 的转化第53页
     ·质粒DNA 的提取第53页
     ·重组质粒pET-28a-gB 的鉴定第53页
     ·重组质粒在大肠杆菌 BL21 中的诱导表达第53页
     ·表达蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析第53-54页
     ·表达产物的Western-Blot 鉴定第54页
   ·试验结果及分析第54-60页
   ·讨论第60-63页
第4章 结论第63-64页
   ·猪伪狂犬病毒杂交瘤细胞株的建立第63页
   ·gB 基因编码蛋白抗原表位的表达第63-64页
参考文献第64-67页
缩略词第67-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间的研究成果第69页

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