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鸭肠炎病毒糖蛋白gB乳胶凝集试验的建立及应用

目录第1-6页
CONTENTS第6-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-18页
   ·鸭病毒性肠炎研究概况第11-15页
     ·流行病学第11页
     ·临床症状第11-12页
     ·病理变化第12页
     ·诊断第12-14页
     ·防治第14-15页
   ·鸭肠炎病毒囊膜蛋白 gB 的研究进展第15-16页
     ·鸭肠炎病毒研究概况第15-16页
     ·DEV 囊膜蛋白 gB 研究进展第16页
   ·乳胶凝集试验的研究进展第16-17页
   ·本研究的目的和意义第17-18页
2 材料与方法第18-28页
   ·材料第18-21页
     ·病毒、菌株及质粒第18页
     ·引物设计及合成第18页
     ·主要试剂第18页
     ·实验用血清第18-19页
     ·主要仪器和设备第19页
     ·抗生素及培养基的配制第19页
     ·聚丙烯凝胶酰胺电泳及 Western-blot 相关缓冲液的配制第19-20页
     ·乳胶凝集相关缓冲液的配制第20页
     ·蛋白纯化、复性所需试剂第20页
     ·其他缓冲液的配制第20-21页
   ·方法第21-28页
     ·DEV 基因组的提取第21页
     ·PCR 扩增 gB 结构域第21页
     ·PCR 产物的纯化与回收第21-22页
     ·CaCl2法制备 DH5α 感受态细胞第22页
     ·重组表达质粒 pHTb-gB 的构建与鉴定第22-24页
     ·目的基因在 BL21 中的诱导表达及 SDS-PAGE 分析第24-25页
     ·Western blot 分析第25页
     ·融合蛋白的纯化、复性和浓缩第25页
     ·乳胶凝集检测方法的建立第25-26页
     ·致敏乳胶的质量检测第26-28页
3 结果与分析第28-39页
   ·gB 的 PCR 扩增结果第28页
   ·pHTb-gB 酶切鉴定结果第28-29页
   ·gB 基因的表达及 Western blot 检测第29-31页
   ·致敏乳胶的条件筛选结果第31-33页
     ·最佳偶联蛋白量的确定第31页
     ·最佳偶联时间的确定第31-32页
     ·最佳乳胶浓度的确定第32页
     ·封闭剂的选择第32-33页
   ·致敏乳胶的质量检测结果第33-39页
     ·自凝性检测结果第33页
     ·特异性检测结果第33页
     ·敏感性检测结果第33-34页
     ·稳定性检测结果第34页
     ·重复性试验第34-36页
     ·比对试验结果第36-39页
4 讨论第39-41页
   ·gB 基因主要抗原域的表达第39页
   ·乳胶凝集方法的建立第39-41页
5 结论第41-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-46页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第46页

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