目录 | 第1-6页 |
CONTENTS | 第6-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-18页 |
·鸭病毒性肠炎研究概况 | 第11-15页 |
·流行病学 | 第11页 |
·临床症状 | 第11-12页 |
·病理变化 | 第12页 |
·诊断 | 第12-14页 |
·防治 | 第14-15页 |
·鸭肠炎病毒囊膜蛋白 gB 的研究进展 | 第15-16页 |
·鸭肠炎病毒研究概况 | 第15-16页 |
·DEV 囊膜蛋白 gB 研究进展 | 第16页 |
·乳胶凝集试验的研究进展 | 第16-17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-28页 |
·材料 | 第18-21页 |
·病毒、菌株及质粒 | 第18页 |
·引物设计及合成 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·实验用血清 | 第18-19页 |
·主要仪器和设备 | 第19页 |
·抗生素及培养基的配制 | 第19页 |
·聚丙烯凝胶酰胺电泳及 Western-blot 相关缓冲液的配制 | 第19-20页 |
·乳胶凝集相关缓冲液的配制 | 第20页 |
·蛋白纯化、复性所需试剂 | 第20页 |
·其他缓冲液的配制 | 第20-21页 |
·方法 | 第21-28页 |
·DEV 基因组的提取 | 第21页 |
·PCR 扩增 gB 结构域 | 第21页 |
·PCR 产物的纯化与回收 | 第21-22页 |
·CaCl2法制备 DH5α 感受态细胞 | 第22页 |
·重组表达质粒 pHTb-gB 的构建与鉴定 | 第22-24页 |
·目的基因在 BL21 中的诱导表达及 SDS-PAGE 分析 | 第24-25页 |
·Western blot 分析 | 第25页 |
·融合蛋白的纯化、复性和浓缩 | 第25页 |
·乳胶凝集检测方法的建立 | 第25-26页 |
·致敏乳胶的质量检测 | 第26-28页 |
3 结果与分析 | 第28-39页 |
·gB 的 PCR 扩增结果 | 第28页 |
·pHTb-gB 酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
·gB 基因的表达及 Western blot 检测 | 第29-31页 |
·致敏乳胶的条件筛选结果 | 第31-33页 |
·最佳偶联蛋白量的确定 | 第31页 |
·最佳偶联时间的确定 | 第31-32页 |
·最佳乳胶浓度的确定 | 第32页 |
·封闭剂的选择 | 第32-33页 |
·致敏乳胶的质量检测结果 | 第33-39页 |
·自凝性检测结果 | 第33页 |
·特异性检测结果 | 第33页 |
·敏感性检测结果 | 第33-34页 |
·稳定性检测结果 | 第34页 |
·重复性试验 | 第34-36页 |
·比对试验结果 | 第36-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
·gB 基因主要抗原域的表达 | 第39页 |
·乳胶凝集方法的建立 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第46页 |