中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
第一部分 前言 | 第9-17页 |
第二部分 研究内容 人源性肝癌核糖体展示单链抗体库的构建及初步鉴定 | 第17-43页 |
1 实验材料 | 第17-21页 |
·主要仪器和设备 | 第17-18页 |
·主要试剂及配制 | 第18-20页 |
·试剂盒 | 第20页 |
·质粒载体 | 第20页 |
·细胞菌株 | 第20页 |
·引物的设计与合成 | 第20-21页 |
2.实验方法 | 第21-36页 |
·人外周血中淋巴细胞的分离 | 第21-22页 |
·淋巴细胞总RNA的提取 | 第22-23页 |
·RNA样品纯度、浓度检测 | 第23页 |
·cDNA的合成 | 第23-24页 |
·VH、VL、CK目的基因片段的扩增 | 第24-27页 |
·单链抗体(ScFv)基因的拼接 | 第27-33页 |
·库质量的鉴定 | 第33-36页 |
3 结果 | 第36-43页 |
·淋巴细胞总RNA的提取 | 第36-37页 |
·VH、VL、CK目的基因片段的扩增 | 第37-39页 |
·改进的SOE PCR法构建核糖体展示模板 | 第39-40页 |
·感受态DH5 a转化率的测定 | 第40-41页 |
·连接反应物的转化结果(蓝白筛选) | 第41页 |
·菌落PCR测定重组率 | 第41-42页 |
·抗体库库容的计算 | 第42页 |
·测序分析 | 第42-43页 |
结论 | 第43-44页 |
讨论 | 第44-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
附录 | 第54-57页 |
缩略词表 | 第57-58页 |