黄花石蒜花蕊与花葶差异片段的克隆及其生物信息学分析
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 引言 | 第11-14页 |
| 1 材料与试剂 | 第14-19页 |
| ·实验材料 | 第14页 |
| ·试剂及配制 | 第14-18页 |
| ·实验仪器 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-26页 |
| ·黄花石蒜花蕊和花葶总RNA提取 | 第19-21页 |
| ·总RNA提取的预备工作 | 第19页 |
| ·总RNA提取方法的筛选 | 第19-20页 |
| ·黄花石蒜花蕊和花葶总RNA的浓度及纯度测定 | 第20-21页 |
| ·总RNA的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第21页 |
| ·cDNA合成 | 第21-22页 |
| ·差异显示PCR扩增 | 第22-25页 |
| ·PCR条件的优化 | 第22页 |
| ·PCR扩增及引物筛选 | 第22-23页 |
| ·6%聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23-24页 |
| ·二次PCR及差异片段的回收 | 第24-25页 |
| ·回收片段的克隆 | 第25-26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·纯化产物的连接反应 | 第25页 |
| ·转化反应 | 第25-26页 |
| ·阳性菌落的歸选 | 第26页 |
| ·制作甘油管 | 第26页 |
| ·测序 | 第26页 |
| ·克隆片段序列比对分析 | 第26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-35页 |
| ·黄花石蒜总RNA的提取 | 第26-28页 |
| ·SDS法提取不同部位的总RNA的完整性检验 | 第26-27页 |
| ·不同方法提取的总RNA的完整性检测 | 第27-28页 |
| ·总RNA的纯度和产率 | 第28页 |
| ·黄花石蒜花葶和花蕊cDNA合成及PCR检测 | 第28-29页 |
| ·黄花石蒜花蕊和花葶差异条带的分离纯化 | 第29-31页 |
| ·6%聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·二次PCR产物电泳 | 第30页 |
| ·二次PCR扩增产物凝胶回收电泳 | 第30-31页 |
| ·差异片段的克隆 | 第31-32页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第31页 |
| ·转化子鉴定 | 第31-32页 |
| ·序列比对结果与分析 | 第32-35页 |
| 4 讨论 | 第35-40页 |
| ·黄花石蒜花蕊与花葶总RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·黄花石蒜花蕊和花葶DD-PCR | 第36页 |
| ·序列比对结果分析 | 第36-40页 |
| 5 结论 | 第40页 |
| 6 展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 附录A：版图与说明 | 第44-54页 |
| 附录B：综述 | 第54-68页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 攻读学位期间主要研究成果及发表论文 | 第68页 |
