| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-22页 |
| ·乳腺发育的形态学简介 | 第14页 |
| ·整联蛋白及其细胞外基质配体 | 第14-15页 |
| ·整联蛋白及其细胞外基质配体的结构 | 第15-17页 |
| ·整联蛋白的结构 | 第15-16页 |
| ·细胞外基质配体的结构 | 第16-17页 |
| ·整联蛋白的生物学功能 | 第17-21页 |
| ·整联蛋白——连接细胞外基质与细胞骨架的“桥梁” | 第18页 |
| ·整联蛋白在乳腺中的表达与作用 | 第18-19页 |
| ·整联蛋白介导的信号通路 | 第19-20页 |
| ·奶牛乳腺内分泌调控与整联蛋白作用的关系 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-37页 |
| ·整联蛋白α6和β4的免疫荧光共定位检测 | 第22-23页 |
| ·样品采集 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·主要试剂及配制 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23页 |
| ·奶牛乳腺组织各时期整联蛋白α6和β4的mRNA检测 | 第23-26页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·主要试剂及配制 | 第24页 |
| ·RNA提取 | 第24页 |
| ·RNA检测 | 第24-25页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测mRNA的表达 | 第25-26页 |
| ·奶牛乳腺组织各时期整联蛋白α6和β4 Western blotting检测 | 第26-29页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要试剂及配制 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-29页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞培养及鉴定 | 第29-31页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂及配置 | 第29-30页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的原代培养、传代及纯化 | 第30页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的冻存 | 第30-31页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的角蛋白18鉴定 | 第31页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞中整联蛋白α6和β4表达的影响 | 第31页 |
| ·免疫荧光共定位检测整联蛋白α6和β4 | 第31页 |
| ·RT-PCR检测整联蛋白α6和β4mRNA水平的表达 | 第31页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞增殖和黏附的影响 | 第31-35页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第32页 |
| ·实验分组 | 第32-34页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞黏附的检测 | 第34页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞增殖的检测 | 第34-35页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能检测 | 第35-36页 |
| ·乳糖含量的检测 | 第35页 |
| ·乳脂含量的检测 | 第35-36页 |
| ·乳蛋白含量的检测 | 第36页 |
| ·数据处理及统计分析 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-68页 |
| ·奶牛乳腺发育不同时期整联蛋白α6和β4的表达定位 | 第37-40页 |
| ·整联蛋白α6和β4在奶牛乳腺发育不同时期mRNA表达量变化 | 第40-44页 |
| ·奶牛乳腺组织各时期RNA提取鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR检测整联蛋白α6和β4在乳腺发育各时期的表达 | 第41-44页 |
| ·整联蛋白α6和β4奶牛乳腺发育不同时期蛋白表达量变化 | 第44-45页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第45-48页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的分离培养结果 | 第45-46页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞生长曲线 | 第47-48页 |
| ·整联蛋白α6和β4在奶牛乳腺上皮细胞中的表达定位 | 第48-50页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞中整联蛋白α6和β4 mRNA表达量变化 | 第50-56页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞RNA提取鉴定结果 | 第50-51页 |
| ·RT-PCR检测整联蛋白α6 mRNA表达量变化 | 第51-54页 |
| ·RT-PCR检测整联蛋白β4 mRNA表达量变化 | 第54-56页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞黏附的影响 | 第56-58页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第58-60页 |
| ·血清与激素或生长因子联合处理对乳腺上皮细胞增殖能力影响 | 第58-59页 |
| ·激素或生长因子单独处理对细胞增殖的影响 | 第59-60页 |
| ·不同泌乳激素和生长因子以及整联蛋白α6和β4对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响 | 第60-68页 |
| ·乳糖含量的检测 | 第60-61页 |
| ·乳脂含量的检测 | 第61-64页 |
| ·乳蛋白含量的检测 | 第64-68页 |
| 4 讨论 | 第68-75页 |
| ·乳腺中整联蛋白α6和β4的表达定位 | 第68-69页 |
| ·乳腺中整联蛋白α6和β4的表达定量 | 第69页 |
| ·泌乳期奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第69-70页 |
| ·血清饥饿及细胞外基质对实验结果的影响 | 第70-71页 |
| ·整联蛋白α6和β4对于细胞黏附的影响 | 第71页 |
| ·整联蛋白及不同泌乳激素和生长因子对泌乳期乳腺上皮细胞增殖的作用 | 第71-72页 |
| ·泌乳期乳腺上皮细胞中整联蛋白泌乳功能的影响 | 第72-73页 |
| ·整联蛋白的研究展望 | 第73-75页 |
| 5 结论 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 附录A | 第82-86页 |
| 附录B | 第86-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
