| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 1 microRNA 概述 | 第13-18页 |
| ·microRNA 的发现历史 | 第13-14页 |
| ·microRNA 的保守性特征 | 第14-15页 |
| ·microRNA 的产生过程 | 第15-16页 |
| ·microRNA 的作用方式 | 第16-18页 |
| 2 microRNA 基因簇概述 | 第18-28页 |
| ·microRNA 基因簇 | 第18页 |
| ·miR-183 基因簇概述 | 第18-24页 |
| ·miR-216 基因簇概述 | 第24-28页 |
| 3 本研究的简介 | 第28-30页 |
| ·研究内容 | 第28页 |
| ·研究意义 | 第28-29页 |
| ·技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 青岛文昌鱼 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇的鉴定及保守性分析 | 第30-61页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-41页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·文昌鱼 | 第30页 |
| ·化学试剂 | 第30-31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验相关溶液 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-41页 |
| ·青岛文昌鱼 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇成熟序列的鉴定 | 第32-38页 |
| ·青岛文昌鱼 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇前体序列的鉴定 | 第38-41页 |
| ·青岛文昌鱼 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇序列的保守性分析 | 第41页 |
| 3 实验结果 | 第41-59页 |
| ·青岛文昌鱼 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇成熟序列的鉴定 | 第41-45页 |
| ·文昌鱼总 RNA 的提取 | 第41页 |
| ·PCR 扩增 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇成熟序列 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆菌 PCR 检测 | 第42-43页 |
| ·测序结果分析 | 第43-45页 |
| ·青岛文昌鱼 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇前体序列的鉴定 | 第45-47页 |
| ·文昌鱼基因组 DNA 的提取 | 第45页 |
| ·PCR 扩增 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇前体序列 | 第45页 |
| ·阳性克隆菌 PCR 检测 | 第45-46页 |
| ·测序结果分析 | 第46-47页 |
| ·青岛文昌鱼 miR-183 基因簇和 miR-216 基因簇序列的保守性分析 | 第47-59页 |
| ·miR-183 基因簇序列的保守性 | 第47-53页 |
| ·miR-216 基因簇序列的保守性 | 第53-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 第三章 miR-183 基因簇在青岛文昌鱼中的表达模式 | 第61-79页 |
| 1 前言 | 第61页 |
| 2 材料和方法 | 第61-71页 |
| ·实验材料 | 第61-63页 |
| ·青岛文昌鱼 | 第61页 |
| ·化学试剂 | 第61-62页 |
| ·实验仪器 | 第62页 |
| ·实验相关溶液 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-71页 |
| ·实时定量 PCR | 第63-65页 |
| ·胚胎原位杂交 | 第65-69页 |
| ·切片原位杂交 | 第69-71页 |
| 3 实验结果 | 第71-78页 |
| ·实时定量 PCR | 第71-75页 |
| ·文昌鱼 miRNA 内参 U6 的克隆 | 第71-74页 |
| ·引物质量检测 | 第74页 |
| ·miR-183 基因簇在青岛文昌鱼成体各组织中的表达 | 第74-75页 |
| ·胚胎原位杂交 | 第75-76页 |
| ·miR-96 在文昌鱼胚胎不同发育时期的表达 | 第75页 |
| ·miR-183 在文昌鱼胚胎不同发育时期的表达 | 第75-76页 |
| ·切片原位杂交 | 第76-78页 |
| ·miR-96 组织切片原位杂交 | 第76-77页 |
| ·miR-183 组织切片原位杂交 | 第77-78页 |
| 4 讨论 | 第78-79页 |
| 第四章 miR-216 基因簇在青岛文昌鱼中的表达模式 | 第79-83页 |
| 1 前言 | 第79页 |
| 2 材料和方法 | 第79-80页 |
| ·实验材料 | 第79页 |
| ·文昌鱼 | 第79页 |
| ·化学试剂 | 第79页 |
| ·实验仪器 | 第79页 |
| ·实验相关溶液 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-80页 |
| ·文昌鱼全鱼及各组织 RNA 的提取 | 第79页 |
| ·反转录获得 cDNA | 第79页 |
| ·Real-time PCR 引物设计 | 第79页 |
| ·引物质量检测 | 第79-80页 |
| ·Real-time PCR 反应 | 第80页 |
| ·数据处理 | 第80页 |
| 3 实验结果 | 第80-81页 |
| ·引物质量检测 | 第80-81页 |
| ·miR-216 基因簇在青岛文昌鱼成体各组织中的表达 | 第81页 |
| 4 讨论 | 第81-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| 英文缩略语 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 个人简历 | 第97页 |
| 发表学术论文 | 第97页 |
