中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 综述 | 第13-25页 |
·引言 | 第13-14页 |
·逆境胁迫对植物的影响 | 第14-17页 |
·盐胁迫对植株形态发育和生理生化特性的影响 | 第14-16页 |
·干旱胁迫对植株形态发育和生理生化特性的影响 | 第16-17页 |
·植物抗旱耐盐的分子机制 | 第17-21页 |
·渗透调节 | 第18-19页 |
·细胞抗氧化及活性氧清除机制 | 第19页 |
·盐胁迫下离子的渗透平衡调节 | 第19-21页 |
·信号转导和基因表达的转录调控 | 第21页 |
·类胡萝卜素 | 第21-25页 |
·类胡萝卜素概述 | 第21-22页 |
·类胡萝卜素在植物抗逆中的作用 | 第22-23页 |
·类胡萝卜素与人类健康的关系 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-42页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株与载体 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·试剂盒、酶及药品耗材 | 第26页 |
·培养基与试剂配制 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-42页 |
·拟南芥psy基因的克隆及表达载体的构建 | 第27-31页 |
·拟南芥总RNA的提取 | 第27-28页 |
·拟南芥cDNA的获得 | 第28页 |
·Atpsy基因编码区的克隆和植物表达载体的构建 | 第28-31页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第31-33页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的转化 | 第32页 |
·阳性克隆的筛选及测序鉴定 | 第32-33页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第33-34页 |
·农杆菌EHA105感受态细胞的制备 | 第33页 |
·农杆菌EHA105感受态细胞的转化 | 第33页 |
·阳性克隆的筛选 | 第33-34页 |
·生菜的遗传转化 | 第34-35页 |
·生菜无菌苗的培养 | 第34页 |
·农杆菌的培养 | 第34页 |
·侵染及共培养 | 第34页 |
·诱芽和生根 | 第34页 |
·无菌苗的移栽 | 第34-35页 |
·转基因生菜的PCR检测 | 第35页 |
·CTAB法微量抽提生菜叶片DNA | 第35页 |
·转化植株的PCR检测 | 第35页 |
·转基因生菜中外源基因的表达分析 | 第35-36页 |
·RNA的提取及反转录 | 第35-36页 |
·实时荧光定量PCR反应 | 第36页 |
·转基因生菜类胡萝卜素含量的测定 | 第36-37页 |
·色谱条件 | 第37页 |
·样品的测定 | 第37页 |
·逆境胁迫处理 | 第37-38页 |
·干旱胁迫 | 第37页 |
·盐胁迫 | 第37-38页 |
·胁迫处理后生理生化指标的检测 | 第38-42页 |
·种子萌发测定内容 | 第38页 |
·光合指标的测定 | 第38页 |
·叶片相对含水量的测定 | 第38页 |
·叶绿素含量的测定 | 第38-39页 |
·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第39页 |
·游离脯氨酸含量的测定 | 第39-40页 |
·可溶性总糖含量的测定 | 第40页 |
·超氧化物酶(SOD)活性的测定 | 第40-41页 |
·过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第41页 |
·胁迫处理下生菜类胡萝卜素含量的测定 | 第41页 |
·胁迫处理下Atpsy基因的表达分析 | 第41-42页 |
第三章 结果与分析 | 第42-70页 |
·目的基因的克隆及表达载体的构建 | 第42-45页 |
·拟南芥总RNA的提取 | 第42页 |
·目的基因片段的克隆 | 第42页 |
·将回收的目的片段克隆到pMD18-TVector并转化大肠杆菌 | 第42-43页 |
·植物表达载体的构建 | 第43-45页 |
·PCR检测转入大肠杆菌DH5α的表达载体 | 第43-44页 |
·农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第44-45页 |
·生菜的遗传转化 | 第45-46页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第46页 |
·转基因植株类胡萝卜素含量及Atpsy基因表达分析 | 第46-47页 |
·转基因植株的抗旱耐盐性分析 | 第47-70页 |
·干旱胁迫处理对转基因生菜种子萌发特性的影响 | 第47-50页 |
·干旱胁迫对生菜种子发芽能力的影响 | 第47-48页 |
·干旱胁迫对生菜种子胚根生长的影响 | 第48-50页 |
·胁迫处理对转基因生菜生长的影响 | 第50-51页 |
·胁迫处理对转基因生菜光合作用参数的影响 | 第51-56页 |
·胁迫处理对生菜叶片光合速率的影响 | 第51-53页 |
·胁迫处理对生菜叶片气孔导度的影响 | 第53-54页 |
·胁迫处理对生菜叶片胞间CO2浓度的影响 | 第54-56页 |
·胁迫处理对转基因生菜叶绿素含量的影响 | 第56页 |
·胁迫处理对转基因生菜叶片相对含水量的影响 | 第56-58页 |
·胁迫处理对转基因生菜丙二醛含量的影响 | 第58-60页 |
·胁迫处理对转基因生菜细胞内游离脯氨酸的影响 | 第60-61页 |
·胁迫处理对转基因生菜可溶性糖含量的影响 | 第61-63页 |
·胁迫处理对转基因生菜抗氧化酶系统的影响 | 第63-66页 |
·胁迫处理对转基因生菜超氧化物歧化酶SOD活性的影响 | 第63-64页 |
·胁迫处理对转基因生菜过氧化物酶POD活性的影响 | 第64-66页 |
·胁迫处理下目的基因的表达情况 | 第66-67页 |
·胁迫处理后转基因生菜中类胡萝卜素含量的变化 | 第67-70页 |
第四章 讨论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
硕士期间发表的论文及成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |