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转拟南芥八氢番茄红素合成酶基因对生菜植株抗逆性的影响

中文摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 综述第13-25页
   ·引言第13-14页
   ·逆境胁迫对植物的影响第14-17页
     ·盐胁迫对植株形态发育和生理生化特性的影响第14-16页
     ·干旱胁迫对植株形态发育和生理生化特性的影响第16-17页
   ·植物抗旱耐盐的分子机制第17-21页
     ·渗透调节第18-19页
     ·细胞抗氧化及活性氧清除机制第19页
     ·盐胁迫下离子的渗透平衡调节第19-21页
     ·信号转导和基因表达的转录调控第21页
   ·类胡萝卜素第21-25页
     ·类胡萝卜素概述第21-22页
     ·类胡萝卜素在植物抗逆中的作用第22-23页
     ·类胡萝卜素与人类健康的关系第23-25页
第二章 材料与方法第25-42页
   ·实验材料第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌株与载体第25页
     ·主要仪器设备第25-26页
     ·试剂盒、酶及药品耗材第26页
     ·培养基与试剂配制第26-27页
   ·实验方法第27-42页
     ·拟南芥psy基因的克隆及表达载体的构建第27-31页
       ·拟南芥总RNA的提取第27-28页
       ·拟南芥cDNA的获得第28页
       ·Atpsy基因编码区的克隆和植物表达载体的构建第28-31页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化第31-33页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第31-32页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的转化第32页
       ·阳性克隆的筛选及测序鉴定第32-33页
     ·冻融法转化农杆菌第33-34页
       ·农杆菌EHA105感受态细胞的制备第33页
       ·农杆菌EHA105感受态细胞的转化第33页
       ·阳性克隆的筛选第33-34页
     ·生菜的遗传转化第34-35页
       ·生菜无菌苗的培养第34页
       ·农杆菌的培养第34页
       ·侵染及共培养第34页
       ·诱芽和生根第34页
       ·无菌苗的移栽第34-35页
     ·转基因生菜的PCR检测第35页
       ·CTAB法微量抽提生菜叶片DNA第35页
       ·转化植株的PCR检测第35页
     ·转基因生菜中外源基因的表达分析第35-36页
       ·RNA的提取及反转录第35-36页
       ·实时荧光定量PCR反应第36页
     ·转基因生菜类胡萝卜素含量的测定第36-37页
       ·色谱条件第37页
       ·样品的测定第37页
     ·逆境胁迫处理第37-38页
       ·干旱胁迫第37页
       ·盐胁迫第37-38页
     ·胁迫处理后生理生化指标的检测第38-42页
       ·种子萌发测定内容第38页
       ·光合指标的测定第38页
       ·叶片相对含水量的测定第38页
       ·叶绿素含量的测定第38-39页
       ·丙二醛(MDA)含量的测定第39页
       ·游离脯氨酸含量的测定第39-40页
       ·可溶性总糖含量的测定第40页
       ·超氧化物酶(SOD)活性的测定第40-41页
       ·过氧化物酶(POD)活性的测定第41页
       ·胁迫处理下生菜类胡萝卜素含量的测定第41页
       ·胁迫处理下Atpsy基因的表达分析第41-42页
第三章 结果与分析第42-70页
   ·目的基因的克隆及表达载体的构建第42-45页
     ·拟南芥总RNA的提取第42页
     ·目的基因片段的克隆第42页
     ·将回收的目的片段克隆到pMD18-TVector并转化大肠杆菌第42-43页
     ·植物表达载体的构建第43-45页
       ·PCR检测转入大肠杆菌DH5α的表达载体第43-44页
       ·农杆菌阳性克隆的鉴定第44-45页
   ·生菜的遗传转化第45-46页
   ·转基因植株的PCR检测第46页
   ·转基因植株类胡萝卜素含量及Atpsy基因表达分析第46-47页
   ·转基因植株的抗旱耐盐性分析第47-70页
     ·干旱胁迫处理对转基因生菜种子萌发特性的影响第47-50页
       ·干旱胁迫对生菜种子发芽能力的影响第47-48页
       ·干旱胁迫对生菜种子胚根生长的影响第48-50页
     ·胁迫处理对转基因生菜生长的影响第50-51页
     ·胁迫处理对转基因生菜光合作用参数的影响第51-56页
       ·胁迫处理对生菜叶片光合速率的影响第51-53页
       ·胁迫处理对生菜叶片气孔导度的影响第53-54页
       ·胁迫处理对生菜叶片胞间CO2浓度的影响第54-56页
     ·胁迫处理对转基因生菜叶绿素含量的影响第56页
     ·胁迫处理对转基因生菜叶片相对含水量的影响第56-58页
     ·胁迫处理对转基因生菜丙二醛含量的影响第58-60页
     ·胁迫处理对转基因生菜细胞内游离脯氨酸的影响第60-61页
     ·胁迫处理对转基因生菜可溶性糖含量的影响第61-63页
     ·胁迫处理对转基因生菜抗氧化酶系统的影响第63-66页
       ·胁迫处理对转基因生菜超氧化物歧化酶SOD活性的影响第63-64页
       ·胁迫处理对转基因生菜过氧化物酶POD活性的影响第64-66页
     ·胁迫处理下目的基因的表达情况第66-67页
     ·胁迫处理后转基因生菜中类胡萝卜素含量的变化第67-70页
第四章 讨论第70-72页
参考文献第72-79页
硕士期间发表的论文及成果第79-80页
致谢第80页

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