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红盖鳞毛蕨黄酮测定及水蕨查尔酮合成酶(CHS)基因的克隆与分析

中文摘要第1-8页
Abstract第8-12页
第一章 前言第12-27页
   ·蕨类概述第12-17页
     ·蕨类植物的分类地位与分布第12页
     ·蕨类植物分子生物学研究进展第12页
     ·蕨类植物的综合利用价值第12-14页
     ·红盖鳞毛蕨第14-15页
       ·红盖鳞毛蕨的分类学地位第14页
       ·红盖鳞毛蕨的生境和形态特征第14页
       ·红盖鳞毛蕨以及鳞毛蕨属化学成分的研究进展第14-15页
     ·水蕨第15-17页
       ·水蕨的分类学地位第15页
       ·水蕨的生境及形态特征第15-16页
       ·水蕨的研究进展第16-17页
   ·黄酮类化合物研究进展第17-21页
     ·黄酮类化合物的分类与分布第17-18页
     ·黄酮类化合物的作用与功效第18-19页
     ·黄酮类化合物的生物合成途径第19-21页
     ·蕨类植物中黄酮类化合物的研究进展第21页
   ·查尔酮合成酶研究进展第21-26页
     ·查尔酮合成酶基因结构第22页
     ·查尔酮合成酶蛋白结构第22-23页
     ·查尔酮合成酶基因进化第23-24页
     ·CHS表达的调控第24-26页
   ·本研究的目的和意义第26-27页
第二章 红盖鳞毛蕨不同器官黄酮测定以及抗氧化活性比较第27-36页
   ·引言第27-29页
   ·材料和方法第29-31页
     ·材料第29页
     ·方法第29-31页
       ·红盖鳞毛蕨不同器官(根,茎,叶,叶轴)总黄酮含量的测定第29-30页
       ·HPLC法测定各个器官黄酮类化合物种类的不同第30页
       ·红盖鳞毛蕨各器官黄酮类提取物清除DPPH自由基能力的测定第30-31页
       ·红盖鳞毛蕨各器官黄酮类提取物清除超氧自由基能力的测定第31页
   ·结果分析第31-35页
     ·红盖鳞毛蕨不同器官总黄酮含量的测定第31-32页
     ·HPLC法测定不同器官黄酮类化合物种类的不同第32-33页
     ·红盖鳞毛蕨不同器官黄酮提取物清除DPPH自由基能力测定第33-34页
     ·红盖鳞毛蕨不同器官黄酮类提取物清除超氧自由基能力测定第34-35页
   ·讨论第35-36页
第三章 水蕨查尔酮合成酶(CHS)基因的克隆与分析第36-66页
   ·引言第36页
   ·材料和方法第36-54页
     ·材料第36-40页
       ·本实验采用的蕨类第36-37页
       ·本实验采用的质粒第37页
       ·本实验采用的菌株第37页
       ·本实验构建的质粒第37页
       ·本实验所用试剂及酶第37-39页
       ·本实验所用仪器设备第39-40页
     ·方法第40-54页
       ·水蕨配子体的培养第40页
       ·水蕨配子体总RNA的提取第40-41页
       ·保守片段cDNA序列的获得第41-43页
       ·RACE获得全长cDNA序列第43-51页
       ·的基因在大肠杆菌中的表达第51页
       ·蛋白定量第51-52页
       ·SDS-PAGE检测第52-53页
       ·蛋白纯化及抗体制作第53-54页
       ·Western blot鉴定第54页
   ·结果与分析第54-64页
     ·水蕨的培养第54-55页
     ·水蕨配子体总RNA的提取第55页
     ·水蕨CHS核心片段的获得第55-56页
       ·PCR扩增水蕨CHS核心片段第55-56页
       ·PMD19-T-CHS载体的构建及同源性分析第56页
     ·RACE获得全长cDNA序列第56-58页
       ·PCR扩增CHS 5'端第57页
       ·PCR扩增水蕨CHS 3'端第57-58页
       ·CHS全长cDNA序列的获得第58页
     ·pET32a-CHS载体的构建第58-59页
     ·生物信息学分析第59-62页
       ·水蕨CHS基因全长测序结果与分析第59-61页
       ·水蕨CHS基因的结构域分析第61-62页
       ·水蕨CHS基因与其它植物查尔酮合成酶氨基酸序列的多序列比对第62页
     ·pET32a-CHS基因在大肠杆菌中的表达及纯化第62-63页
     ·pET32a-CHS表达蛋白的Westem blot分析第63-64页
   ·讨论第64-66页
     ·水蕨查尔酮合成酶基因克隆的重要意义第64页
     ·水蕨CHS基因家族和结构的探讨第64页
     ·CHS基因起源的探讨第64-66页
第四章 总结与展望第66-67页
参考文献第67-74页
致谢第74-76页
攻读学位期间的研究成果第76页

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