| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-23页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans) | 第10-11页 |
| ·金属转运相关的蛋白家族简介 | 第11-14页 |
| ·P-type ATPase | 第11-12页 |
| ·CzcA家族 | 第12-13页 |
| ·Cation diffusion facilitator家族 | 第13-14页 |
| ·NRAMP家族转运体 | 第14页 |
| ·Real-time quantitative PCR(RT-qPCR) | 第14-21页 |
| ·RT-qPCR概述 | 第14-15页 |
| ·RT-qPCR的数据分析 | 第15-21页 |
| ·A.ferrooxidans金属离子的抗性 | 第21页 |
| ·A.ferrooxidans金属离子的抗性研究现状 | 第21页 |
| ·研究A.ferrooxidans金属离子的抗性的意义 | 第21页 |
| ·课题研究目的和研究内容 | 第21-23页 |
| ·依据和目的 | 第21-22页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第22页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 A.ferrooxidans DC菌株中金属抗性相关基因的克隆 | 第23-36页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料和方法 | 第23-26页 |
| ·质粒、菌株和培养条件 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第24页 |
| ·金属抗性相关基因的鉴定 | 第24页 |
| ·金属抗性相关基因的克隆及测序 | 第24-25页 |
| ·金属抗性相关基因的序列分析 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-35页 |
| ·金属抗性相关基因的序列分析 | 第26-31页 |
| ·生物信息学分析 | 第31-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 A.ferrooxidans DC对Mn~(2+),Zn~(2+)和Cd~(2+)的抗性 | 第36-45页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料与方法 | 第36-37页 |
| ·菌株和生长条件 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·菌株对Mn~(2+),Zn~(2+)和Cd~(2+)的耐受能力测定 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-43页 |
| ·亚铁为能源物质时A.ferrooxidans DC对三种离子的耐受水平 | 第37-40页 |
| ·硫粉为能源物质时A.ferrooxidans DC对三种离子的耐受水平 | 第40-43页 |
| ·分析与讨论 | 第43页 |
| ·本章小结 | 第43-45页 |
| 第四章 金属抗性相关基因的差异性表达 | 第45-62页 |
| ·引言 | 第45页 |
| ·材料与方法 | 第45-49页 |
| ·菌株和培养条件 | 第45-46页 |
| ·接种 | 第46页 |
| ·引物的设计与检测 | 第46-47页 |
| ·总RNA的提取 | 第47-48页 |
| ·RNA的浓度检测 | 第48页 |
| ·cDNA合成 | 第48-49页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-60页 |
| ·引物质量评估 | 第49页 |
| ·RNA质量评估 | 第49-50页 |
| ·目标基因及内参基因的标准曲线和熔解曲线 | 第50-55页 |
| ·Mn~(2+)刺激下金属抗性相关基因的差异性表达 | 第55-57页 |
| ·Zn~(2+)刺激下金属抗性相关基因的差异性表达 | 第57-58页 |
| ·Cd~(2+)刺激下金属抗性相关基因的差异性表达 | 第58-60页 |
| ·分析与讨论 | 第60-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 研究成果 | 第71页 |
