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腺苷酸激酶2(AK2)在棉铃虫生长发育中的功能

目录第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-11页
符号说明第11-13页
第一章 前言第13-21页
 一、昆虫蜕皮变态的分子机制第13-17页
  1. 昆虫生长发育的激素调控第13-14页
  2. 蜕皮激素调控的级联反应第14-16页
   ·蜕皮激素核受体第14-15页
   ·蜕皮激素信号通路中的级联反应基因第15-16页
     ·激素接受子3(Hormone Receptor 3,HR3)第15页
     ·E75第15-16页
     ·Broad第16页
  3. 保幼激素信号途径第16-17页
   ·Methoprene-tolerant(Met)第16-17页
   ·USP第17页
   ·Broad第17页
   ·Krupple homolog 1(Kr-hl)第17页
 二、腺苷酸激酶在生物体生长和发育中的功能研究第17-20页
  1. AK的分类和功能第18-20页
   ·细胞质中AK的研究第18-19页
   ·线粒体中AK的研究第19-20页
   ·细胞核中AK的研究第20页
 三、存在的科学问题及研究意义第20-21页
第二章 腺苷酸激酶2(AK2)在棉铃虫生长发育中的功能第21-43页
 一. 引言第21-22页
 二. 材料和方法第22-43页
  1. 材料第22-23页
   ·实验动物第22页
   ·试剂与仪器第22-23页
  2. 方法第23-31页
   ·AK2基因序列分析第23页
   ·原核重组表达和多克隆抗体制备第23-27页
     ·重组质粒AK2-pET-30a的构建第23-24页
     ·重组质粒AK2-pET-30a转化大肠杆菌DH5α第24-25页
     ·重组质粒AK2-pET-30a转化Rosette(DE3)第25页
     ·试表达第25页
     ·大规模表达及重组蛋白的纯化第25-26页
     ·多克隆抗体的制备第26-27页
   ·免疫印迹技术第27页
   ·免疫细胞化学第27-28页
   ·虫体RNAi第28-31页
     ·AK2-L4400-HT115(DE3)饲喂干扰菌株的构建第28页
     ·dsAK2的试表达第28-29页
       ·dsAK2的诱导表达第28-29页
       ·菌体RNA的提取第29页
     ·虫体饲喂dsAK2第29页
     ·虫体生测统计第29页
     ·血球计数板法第29-30页
     ·虫体RNA提取第30页
     ·cDNA第一链合成第30页
     ·RT-PCR检测第30-31页
   ·细胞MTT实验第31页
  3. 结果第31-41页
   ·AK2在不同物种中高度保守第31-35页
   ·AK2在棉铃虫生长发育各组织中持家表达第35页
   ·AK2定位于线粒体第35-37页
   ·AK2促进细胞的增殖第37-38页
   ·干扰AK2引起虫体生长缺陷第38-39页
   ·干扰AK2抑制基因的转录第39-40页
   ·干扰AK2抑制昆虫血细胞的增殖第40-41页
  4. 讨论第41-43页
参考文献第43-51页
论文创新点总结第51-52页
致谢第52-53页
学位论文评阅及答辩情况表第53页

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