| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-33页 |
| ·研究目的和意义 | 第17页 |
| ·国内外研究现状 | 第17-32页 |
| ·棉花生殖发育的分子生物学研究 | 第18-24页 |
| ·肌醇半乳糖苷合酶的研究 | 第24-26页 |
| ·网格蛋白关联接头蛋白（Clarthrin-associated adaptor protein，AP）复合体的研究 | 第26-28页 |
| ·PsbP 基因的研究 | 第28-30页 |
| ·β呋喃果糖苷酶的研究 | 第30-32页 |
| ·本研究的研究内容和策略 | 第32-33页 |
| 第二章 包含arf1和nodulin-like BAC克隆的筛选和全序列测序 | 第33-45页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·BAC 文库 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·载体及其特征 | 第33-34页 |
| ·PCR 扩增引物 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-41页 |
| ·PCR 池筛法筛选BAC 文库的基本原理 | 第35-36页 |
| ·LB 培养基 | 第36页 |
| ·BAC 文库混合池的构建 | 第36页 |
| ·质粒DNA 的小量提取 | 第36-37页 |
| ·棉花基因组DNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·PCR 反应 | 第38-39页 |
| ·目的DNA 片段的电泳回收 | 第39页 |
| ·连接 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·质粒DNA 转化大肠杆菌 | 第40页 |
| ·BAC 阳性克隆插入片段大小的鉴定 | 第40-41页 |
| ·BAC 阳性克隆插入片段的全序列测序 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·BAC 文库混合池的构建 | 第41页 |
| ·包含arf1 和nodulin-like BAC 阳性克隆的筛选 | 第41-42页 |
| ·G2-J-15 和G128-K-15 BAC 阳性克隆插入片段长度的鉴定 | 第42页 |
| ·G2-J-15 BAC 阳性克隆插入片段的全序列测序 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第三章 G2-J-15 BAC 克隆插入片段的生物信息学分析 | 第45-70页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·序列中基因及其结构的预测 | 第45页 |
| ·序列中各基因的ORF BLAST | 第45页 |
| ·各基因编码的氨基酸序列的分析 | 第45页 |
| ·蛋白质结构及功能预测 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-68页 |
| ·序列中新基因结构、cDNA 及编码蛋白的预测结果 | 第46-53页 |
| ·各基因编码蛋白的基本性质、序列比对、分析和系统进化树的构建 | 第53-63页 |
| ·各蛋白序列在TAIR 中的BLAST | 第63-64页 |
| ·各蛋白序列的疏水结构及信号肽预测分析 | 第64-66页 |
| ·蛋白质结构及功能预测结果 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-70页 |
| 第四章 各基因的时空表达研究 | 第70-82页 |
| ·材料 | 第70-71页 |
| ·植物材料 | 第70页 |
| ·试剂 | 第70页 |
| ·实时荧光定量PCR（Real-time PCR）扩增引物 | 第70-71页 |
| ·方法 | 第71-76页 |
| ·RNA 提取前仪器及耗材的预处理 | 第71页 |
| ·试剂的准备 | 第71页 |
| ·提取棉花RNA 的热硼酸方法（吴巧雯，2007） | 第71-73页 |
| ·植物RNAout 提取棉花RNA | 第73-74页 |
| ·RNA 反转录 | 第74页 |
| ·反转录PCR | 第74-75页 |
| ·Real-time PCR | 第75-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-81页 |
| ·热硼酸法提取棉花RNA | 第76-77页 |
| ·反转录PCR 及Real-time PCR 熔解曲线分析 | 第77-78页 |
| ·各基因的时空表达模型 | 第78-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 第五章 GhGolS 和 GhAPm 的 cDNA 克隆 | 第82-90页 |
| ·材料 | 第82-83页 |
| ·植物材料 | 第82页 |
| ·试剂 | 第82页 |
| ·菌株 | 第82页 |
| ·载体及其特征 | 第82-83页 |
| ·相关引物 | 第83页 |
| ·方法 | 第83-85页 |
| ·仪器及耗材的预处理（详见4.2.1） | 第83页 |
| ·试剂的准备（详见4.2.2） | 第83页 |
| ·提取棉花RNA 的热硼酸方法（详见4.2.3） | 第83页 |
| ·RNA 反转录（详见4.2.5） | 第83页 |
| ·PCR | 第83-84页 |
| ·目的DNA 片段的电泳回收（详见2.2.6） | 第84页 |
| ·GATEWAY 克隆体系BP 重组反应 | 第84-85页 |
| ·质粒DNA 转化大肠杆菌（详见2.2.9） | 第85页 |
| ·质粒DNA 的小量提取（详见2.2.4） | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-89页 |
| ·RNA 的提取和反转录 | 第85页 |
| ·PCR | 第85页 |
| ·PCR 产物回收、BP 重组反应、转化、测序和序列拼接 | 第85-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 第六章 相关基因过表达载体、RNAi 载体的构建、转化 | 第90-108页 |
| ·材料 | 第90-93页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90页 |
| ·菌株 | 第90页 |
| ·载体及其特征 | 第90页 |
| ·PCR 扩增引物 | 第90-93页 |
| ·方法 | 第93-101页 |
| ·PCR 扩增 | 第93-95页 |
| ·PCR 及酶切产物回收 | 第95-96页 |
| ·质粒DNA 的小量提取（详见2.2.4） | 第96页 |
| ·BamH I 和Sac I 双酶切反应 | 第96页 |
| ·连接（详见2.2.7） | 第96页 |
| ·GATEWAY 克隆 | 第96-97页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（详见2.2.8） | 第97页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态的制备 | 第97页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 的转化 | 第97页 |
| ·质粒的大量提取 | 第97-99页 |
| ·花粉管通道法转化棉花 | 第99页 |
| ·拟南芥的种植 | 第99页 |
| ·根瘤农杆菌 LB4404 转化拟南芥 | 第99-101页 |
| ·转基因植株的Kana 筛选 | 第101页 |
| ·转基因植株的BASTA 筛选 | 第101页 |
| ·DNA 提取（详见2.2.5） | 第101页 |
| ·结果与分析 | 第101-107页 |
| ·PCR 反应 | 第101-103页 |
| ·相关载体的构建和鉴定 | 第103-105页 |
| ·拟南芥和棉花的转化 | 第105-107页 |
| ·小结 | 第107-108页 |
| 第七章 全文结论 | 第108-111页 |
| ·阳性BAC 克隆的筛选、鉴定、全序列测序和生物信息学分析 | 第108-109页 |
| ·包含arf1 和nodulin-like 基因阳性BAC 克隆的筛选、鉴定 | 第108页 |
| ·G2-J-15 BAC 克隆全序列测序及生物信息学分析 | 第108-109页 |
| ·各基因的时空表达研究 | 第109页 |
| ·GhGolS 和 GhAPm 的 cDNA 克隆 | 第109页 |
| ·相关基因过表达载体、RNAi 载体的构建、转化 | 第109页 |
| ·创新点 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 作者简历 | 第126页 |
