缩略词 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一部分 前言 | 第10-25页 |
1.胆囊 | 第11页 |
·胆囊的功能 | 第11页 |
·胆汁 | 第11页 |
2.胆石症的概况 | 第11-14页 |
·胆石症的现状 | 第11-12页 |
·胆结石的分类 | 第12页 |
·引发胆石症的因素 | 第12-13页 |
·胆石症的临床表现 | 第13页 |
·胆结石的诊断 | 第13-14页 |
·胆结石病的危害性 | 第14页 |
3.胆石症的治疗 | 第14页 |
4.胆固醇结石的成因 | 第14-17页 |
5.胆汁成核效应蛋白的研究进展 | 第17-20页 |
·促成核蛋白 | 第18-20页 |
·抑制成核蛋白 | 第20页 |
6.单克隆抗体的应用 | 第20-21页 |
·单克隆抗体的特点 | 第20-21页 |
·单克隆抗体在医学检验上的应用 | 第21页 |
·单克隆抗体在临床治疗上的应用 | 第21页 |
·国内外单抗研究现状 | 第21页 |
7.ELISA诊断方法的原理及研究进展 | 第21-22页 |
·EIA的特点与发展趋势 | 第22页 |
·ELISA的原理 | 第22页 |
·ELISA的应用 | 第22页 |
8.免疫胶体金技术的基本原理 | 第22-23页 |
9.课题意义及目的 | 第23-25页 |
第二部分 实验部分 | 第25-34页 |
1.实验材料 | 第25页 |
·原料 | 第25页 |
·模拟胆汁的配制原料 | 第25页 |
·其他试剂 | 第25页 |
·仪器与设备 | 第25页 |
·计算机分析软件 | 第25页 |
2.实验主要试剂的配制 | 第25-30页 |
·不同pH的不同浓度的磷酸缓冲液的配制 | 第25-26页 |
·不同浓度pH3.0甘氨酸-盐酸缓冲液的配制 | 第26页 |
·不同浓度pH5.0醋酸-醋酸钠缓冲液的配制 | 第26页 |
·不同浓度pH9.0甘氨酸-氢氧化钠缓冲液的配制 | 第26页 |
·含150mmol/LNaCl的20mmol/L Tris-HCl的pH7.4 TBS的配制 | 第26页 |
·10mmol/L STDC-TBS溶液的配制 | 第26-27页 |
·SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳相关溶液的配制 | 第27-29页 |
·储存液的配制 | 第27页 |
·工作液的配制 | 第27-28页 |
·染色液 | 第28页 |
·配制X%分离胶(总体积10ml) | 第28页 |
·配制5%浓缩胶 | 第28-29页 |
·样品处理及上样 | 第29页 |
·电泳 | 第29页 |
·模拟胆汁的配制 | 第29-30页 |
·所需材料 | 第29-30页 |
·计算各物质量 | 第30页 |
·材料的处理 | 第30页 |
·模拟胆汁的配制 | 第30页 |
3.离子交换柱分离蛋白 | 第30-31页 |
4.疏水层析法分离蛋白 | 第31页 |
5.分子筛层析法分离蛋白 | 第31-32页 |
6.RP-HPLC的使用 | 第32-34页 |
第三部分 结果与分析 | 第34-51页 |
1.层析条件的选择 | 第34-46页 |
·离子交换层析填料的选择 | 第34-37页 |
·CM-Sephadex C-50处理pH3、pH5的样品 | 第34-35页 |
·CM-Sephadex C-50处理pH7、pH9的样品 | 第35-36页 |
·QAE-Sephadex A-25处理pH3、pH5的样品 | 第36页 |
·QAE-Sephadex A-25处理pH7、pH9的样品 | 第36-37页 |
·离子交换层析结果分析 | 第37页 |
·分析调pH到3的透析后胆汁上清和沉淀 | 第37-42页 |
·调过pH后的上清进行阳离子交换实验的结果 | 第37-38页 |
·调pH到3后沉淀部分进行分析的结果 | 第38-39页 |
·调pH到3后沉淀部分在缓冲液中溶解情况的分析 | 第39-40页 |
·调pH到3后沉淀部分在TBS缓冲液中溶解情况的分析 | 第40-41页 |
·用5mM pH3 Gly-HCl溶解调胆汁pH值到3后的沉淀进行疏水层析 | 第41页 |
·用CM-Sephadex C-50处理调胆汁pH值到3产生的沉淀 | 第41-42页 |
·对于胆汁中胆色素的处理 | 第42-44页 |
·调不同oH值检查胆色素的沉淀效果 | 第42-43页 |
·Sephadex G-25分离处理的胆汁样品 | 第43-44页 |
·重复验证Sephadex G-25分离处理的胆汁样品结果 | 第44页 |
·分析不同填料上样后平衡时洗出的蛋白 | 第44-46页 |
·阳离子交换填料CM-Sephadex C-50上样后平衡时洗出的蛋白 | 第44-45页 |
·疏水填料Phenyl Sepharose Fast Flow上样后平衡时洗出的蛋白 | 第45-46页 |
·kDa泡相蛋白的活性测定 | 第46-48页 |
·第一次活性测定 | 第46页 |
·第二次活性测定 | 第46-47页 |
·第三次活性测定 | 第47-48页 |
3.模拟胆汁成核过程光镜观察结果 | 第48页 |
4.分子筛层析后所得纯化物HPLC纯度分析 | 第48-51页 |
·梯度洗脱 | 第48-49页 |
·恒浓度洗脱 | 第49-51页 |
·60%乙腈浓度洗脱 | 第49页 |
·50%乙腈浓度洗脱 | 第49-51页 |
第四部分 总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
致谢 | 第55页 |