地锦体胚发生和遗传转化体系的建立及离体筛选耐盐植株的初步研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩写词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| ·文献综述 | 第14-30页 |
| ·木本植物组织培养的发展概况 | 第14-15页 |
| ·木本植物体胚发生途径研究进展 | 第15-16页 |
| ·木本植物遗传转化的方法 | 第16-20页 |
| ·根癌农杆菌介导木本植物遗传转化研究进展 | 第20-26页 |
| ·耐盐植物育种研究进展 | 第26-29页 |
| ·地锦属植物生物技术及育种研究进展 | 第29-30页 |
| ·本研究的主要内容 | 第30-31页 |
| 2 材料和方法 | 第31-43页 |
| ·地锦叶柄间接体胚再生体系的建立 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·培养基配制及培养条件 | 第31页 |
| ·地锦叶柄胚性组织诱导 | 第31页 |
| ·体胚诱导 | 第31-32页 |
| ·体胚成苗和植株再生 | 第32页 |
| ·石蜡切片制作 | 第32页 |
| ·数据统计与分析 | 第32页 |
| ·地锦胚性愈伤组织增殖、体胚发生和植株再生 | 第32-34页 |
| ·植物材料 | 第32-33页 |
| ·试验所用的培养基及培养条件 | 第33页 |
| ·地锦胚性愈伤组织的获得 | 第33页 |
| ·胚性愈伤组织的增殖 | 第33页 |
| ·体胚的诱导与成熟 | 第33页 |
| ·体胚的成苗与植株再生 | 第33页 |
| ·再生植株的ISSR分析 | 第33-34页 |
| ·根癌农杆菌介导地锦遗传转化体系的建立 | 第34-39页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·抗生素、试验培养基及各种试剂的配制 | 第35-37页 |
| ·根癌农杆菌介导地锦胚性愈伤遗传转化的过程 | 第37页 |
| ·胚性愈伤组织对卡那霉素的敏感性试验 | 第37-38页 |
| ·卡那霉素对体胚诱导和成苗的影响 | 第38页 |
| ·卡那霉素对再生苗生根的影响 | 第38页 |
| ·胚性愈伤组织对潮霉素(Hyg)的敏感性试验 | 第38页 |
| ·农杆菌菌株对转化的影响 | 第38页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第38-39页 |
| ·农杆菌处理菌液的浓度对转化的影响 | 第39页 |
| ·农杆菌菌液侵染时间对转化的影响 | 第39页 |
| ·AS对转化的影响 | 第39页 |
| ·转化体的GUS基因检测(组织化学染色法) | 第39页 |
| ·转基因植株的分子生物学检测 | 第39-41页 |
| ·大肠杆菌中质粒DNA的提取 | 第39页 |
| ·地锦叶片基因组总DNA提取 | 第39-40页 |
| ·PCR分析 | 第40页 |
| ·Southern杂交分析 | 第40-41页 |
| ·离体筛选地锦耐盐植株的研究 | 第41-43页 |
| ·植物材料 | 第41-42页 |
| ·不同浓度NaCl对胚性愈伤组织增殖的影响 | 第42页 |
| ·耐盐愈伤组织变异细胞系的筛选 | 第42页 |
| ·耐盐愈伤组织诱导体胚形成和植株再生 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-65页 |
| ·地锦叶柄诱导体胚发生和植株再生体系的建立 | 第43-47页 |
| ·胚性组织的诱导 | 第43-44页 |
| ·体胚的诱导 | 第44-45页 |
| ·体胚的成苗和植株再生 | 第45-47页 |
| ·地锦胚性愈伤增殖、体胚发生和植株再生 | 第47-52页 |
| ·胚性愈伤组织的获得 | 第47页 |
| ·胚性愈伤组织的增殖和保持 | 第47-48页 |
| ·体胚的诱导与成熟 | 第48-49页 |
| ·体胚成苗与植株再生 | 第49-51页 |
| ·地锦体胚再生系统的遗传稳定性分析 | 第51-52页 |
| ·地锦遗传转化体系的建立 | 第52-61页 |
| ·胚性愈伤组织对卡那霉素的敏感性分析 | 第52-53页 |
| ·卡那霉素对体胚诱导和成苗的影响 | 第53页 |
| ·卡那霉素标记生根选择压力的确定 | 第53-54页 |
| ·地锦胚性愈伤组织对潮霉素的敏感性分析 | 第54-55页 |
| ·农杆菌菌株对转化的影响 | 第55页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第55-56页 |
| ·菌液浓度对胚性愈伤组织遗传转化的影响 | 第56页 |
| ·侵染时间对胚性愈伤组织遗传转化的影响 | 第56-57页 |
| ·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第57-58页 |
| ·卡那霉素标记的GUS基因的转化及转基因植株再生 | 第58-59页 |
| ·潮霉素标记的GUS基因的转化 | 第59-60页 |
| ·转化体的GUS基因检测 | 第60-61页 |
| ·转基因植株的分子生物学检测 | 第61-62页 |
| ·PCR分析 | 第61页 |
| ·植物总DNA酶切 | 第61页 |
| ·Southern杂交分析 | 第61-62页 |
| ·离体筛选地锦耐盐植株的研究 | 第62-65页 |
| ·不同NaCl浓度对愈伤生长和增殖的影响 | 第62-63页 |
| ·耐盐愈伤组织变异细胞系的筛选 | 第63页 |
| ·耐盐体胚成苗和植株再生 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-71页 |
| ·地锦体细胞胚胎发生和植株再生 | 第65-66页 |
| ·地锦体胚再生体系的遗传稳定性问题 | 第66-67页 |
| ·影响地锦胚性愈伤组织遗传转化的因素 | 第67-69页 |
| ·愈伤组织的生长状态 | 第67-68页 |
| ·共培养时间的影响 | 第68页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)的影响 | 第68页 |
| ·抗生素选择标记的影响 | 第68-69页 |
| ·假转化体的问题 | 第69页 |
| ·利用细胞工程技术提高地锦耐盐性能的可行性 | 第69页 |
| ·应用植物基因工程改良地锦耐盐性的应用前景 | 第69-70页 |
| ·本研究的下一步工作 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-83页 |
| 附录 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
