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理性设计提高嗜热酯酶对有机磷化合物的敏感性

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 前言第14-44页
   ·有机磷化合物简介第14-19页
     ·有机磷化合物的种类第14-18页
     ·农药检测技术第18-19页
   ·生物感受器第19-23页
     ·乙酰胆碱酯酶第20-22页
     ·其他生物感受器第22-23页
   ·酶与抑制剂相互作用的研究方法第23-28页
     ·抑制类型的简介第23-26页
     ·抑制动力学第26-27页
     ·半抑制浓度(IC_(50))第27-28页
   ·固定化第28-32页
   ·嗜热羧酸酯酶简介第32-34页
   ·立题依据第34-35页
   ·参考文献第35-44页
第二章 嗜热酯酶AFEST与有机磷化合物反应的研究第44-62页
   ·引言第44页
   ·实验材料第44-46页
     ·菌种第44页
     ·试剂第44-45页
     ·实验仪器第45页
     ·溶液配制第45-46页
   ·实验方法第46-50页
     ·嗜热酯酶AFEST的制备第46-47页
     ·嗜热酯酶AFEST的镍亲和柱纯化第47页
     ·酯酶活力的测定第47-48页
     ·动力学常数测定第48页
     ·抑制反应时间的确定第48页
     ·抑制动力学的研究第48-49页
     ·半抑制浓度的测定第49页
     ·稳定性研究第49-50页
   ·实验结果与讨论第50-58页
     ·嗜热酯酶AFEST的制备第50-51页
     ·孵育时间的确定第51-53页
     ·抑制动力学的研究第53-56页
     ·半抑制浓度的研究第56-58页
     ·稳定性研究第58页
   ·小结第58-59页
   ·参考文献第59-62页
第三章 嗜热酯酶AFEST的半理性设计第62-92页
   ·引言第62-63页
   ·实验材料与方法第63-69页
     ·实验材料第63页
     ·同源序列比对,蛋白质三级结构比对及蛋白质底物口袋大小的测定第63页
     ·突变体的构建第63-65页
     ·突变体的纯化第65-66页
     ·突变体活力的测定第66页
     ·突变体动力学常数的测定第66页
     ·突变体IC_(50)的测定第66-68页
     ·双点突变体N44S/S48V抑制动力学的测定第68页
     ·突变体稳定性的测定第68-69页
   ·结果与讨论第69-88页
     ·突变位点的确定第69-71页
     ·突变体的筛选第71-72页
     ·新突变位点的确定第72-73页
     ·突变体纯化及动力学结果第73-75页
     ·IC_(50)数据分析第75-76页
     ·抑制动力学的研究第76-80页
     ·突变体稳定性的研究第80-81页
     ·突变体模型的建立第81-84页
     ·对接模型的研究第84-88页
   ·小结第88-89页
   ·参考文献第89-92页
第四章 酶固定化第92-104页
   ·引言第92页
   ·实验材料第92-93页
     ·试剂第92页
     ·仪器第92页
     ·溶液配制第92-93页
   ·实验方法第93-95页
     ·固定化条件的摸索第93页
     ·固定化酶活力的测定第93-94页
     ·固定化酶稳定性的测定第94页
     ·固定化酶对有机磷农药的检测第94-95页
   ·实验结果及讨论第95-101页
     ·固定化条件的确定第95-97页
     ·固定化酶活力及固定化效率的测定第97-98页
     ·固定化酶对有机磷化合物的检测第98-99页
     ·固定化酶稳定性的研究第99-101页
   ·小结第101页
   ·参考文献第101-104页
创新点第104-106页
展望第106-108页
作者简历第108-110页
参与的科研课题第110-112页
致谢第112页

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