中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-9页 |
缩略语表 | 第9-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-37页 |
1 研究背景 | 第15-17页 |
2 贝类动物病毒病的病原与病理研究进展 | 第17-20页 |
·海洋贝类病毒 | 第17-18页 |
·淡水贝类--三角帆蚌瘟病病毒(HcPV) | 第18-20页 |
3 SSH技术与水产动物免痰相关因子 | 第20-29页 |
·鱼类细胞因子 | 第22-25页 |
·鱼类白细胞介素 | 第23页 |
·干扰素 | 第23页 |
·急性期蛋白 | 第23-24页 |
·其他细胞因子 | 第24-25页 |
·贝类动物免疫特性及免疫相关因子 | 第25-28页 |
·水解酶类 | 第26页 |
·抗菌肽 | 第26-27页 |
·凝集素 | 第27页 |
·氧化酶和抗氧化酶类 | 第27-28页 |
·溶血素及其它 | 第28页 |
·结合珠蛋白(HP)与PIT 54蛋白 | 第28-29页 |
4 论文研究目的与意义 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-37页 |
第二章 三角帆蚌瘟病病毒形态与分子结构特征 | 第37-55页 |
1 材料与方法 | 第37-44页 |
·材料 | 第37-39页 |
·实验动物 | 第37页 |
·菌株、质粒 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·主要仪器设备 | 第37-38页 |
·引物 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-44页 |
·病料的处理与保存 | 第39页 |
·病毒的分离与复壮 | 第39-40页 |
·病毒收集与纯化 | 第40页 |
·病毒电镜检测 | 第40页 |
·TRIzol法提取病毒RNA | 第40-41页 |
·DNase I处理 | 第41页 |
·RNase A酶处理 | 第41-42页 |
·S_1 Nuclease酶处理 | 第42页 |
·cDNA第一链合成 | 第42页 |
·PCR扩增 | 第42-43页 |
·连接反应 | 第43页 |
·感受态细胞的制备与转化 | 第43-44页 |
·测序加工与同源性分析 | 第44页 |
2 结果分析 | 第44-51页 |
·病料组织复感与病毒的分离、纯化 | 第44-45页 |
·病料组织复感健康蚌 | 第44页 |
·病毒分离与纯化 | 第44-45页 |
·病毒形态特征 | 第45-46页 |
·三角帆蚌瘟病病毒RNA及RNase A、DNase I、S_1 Nuclease处理 | 第46-47页 |
·三角帆蚌瘟病病毒基因组cDNA文库的构建与分析 | 第47-49页 |
·随即扩增的瘟病病毒的部分序列分 | 第49-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
·三角帆蚌瘟病病毒形态 | 第51页 |
·三角帆蚌瘟病病毒分子生物学特性 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
第三章 三角帆蚌瘟病的组织病理研究 | 第55-82页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
·材料 | 第55-56页 |
·试验动物 | 第55页 |
·仪器 | 第55页 |
·药品 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-58页 |
·带毒组织液的制备 | 第56页 |
·人工感染 | 第56页 |
·药品的配制 | 第56页 |
·病理组织的采集 | 第56页 |
·电镜材料的制备 | 第56页 |
·组织切片的制作 | 第56-58页 |
2 结果分析 | 第58-77页 |
·感染病蚌症状变化全程观察 | 第58页 |
·电镜下三角帆蚌病灶组织细胞的病理变化特点 | 第58-67页 |
·肝组织的病理变化[图版Ⅰ:1-6] | 第58-59页 |
·内脏团的病理变化[图版Ⅱ:7-12] | 第59页 |
·外套膜的病理变化[图版Ⅲ:13-18] | 第59-60页 |
·鳃的病理变化[图版Ⅳ:19-24] | 第60页 |
·斧足的病理变化[图版Ⅴ:25-30] | 第60-61页 |
·三角帆蚌瘟病病毒在蚌体内各组织中的动态变化 | 第61-67页 |
·光镜下病灶组织的病理变化 | 第67-77页 |
·肝脏的病理变化[图版Ⅵ:31-36] | 第67页 |
·胃的病理变化[图版Ⅶ:37-42] | 第67-68页 |
·肠的病理变化[图版Ⅷ:43-48] | 第68页 |
·外套膜的病理变化[图版Ⅸ:49-54] | 第68-69页 |
·鳃的病理变化[图版Ⅹ:55-60] | 第69-70页 |
·斧足的病理变化[图版Ⅺ:61-66] | 第70-77页 |
3 讨论 | 第77-79页 |
·三角帆蚌瘟病病蚌消化系统的病理特征 | 第77页 |
·三角帆蚌瘟病病蚌主要肌肉组织的病理特征 | 第77-78页 |
·三角帆蚌瘟病病蚌呼吸器官的病理特征 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-82页 |
第四章 三角帆蚌肝脏抑制性消减cDNA文库的构建与分析 | 第82-104页 |
1 材料与方法 | 第82-92页 |
·材料 | 第82-84页 |
·实验动物与菌种 | 第82页 |
·主要试剂 | 第82页 |
·主要仪器设备 | 第82-83页 |
·接头和引物 | 第83-84页 |
·实验方法 | 第84-92页 |
·动物材料处理 | 第84页 |
·总RNA的提取 | 第84页 |
·mRNA的分离纯化 | 第84-85页 |
·抑制性消减杂交(SSH) | 第85-90页 |
·消减cDNA文库的构建 | 第90-92页 |
2 结果分析 | 第92-100页 |
·总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第92-93页 |
·双链cDNA合成和Rsa I酶切效率 | 第93-94页 |
·SSH产物的2次PCR扩增结果 | 第94-95页 |
·接头连接效率检测 | 第95-96页 |
·消减杂交效率检测 | 第96页 |
·插入片段的PCR扩增 | 第96-97页 |
·消减cDNA EST序列的统计与分析 | 第97页 |
·消减cDNA EST功能的分类 | 第97-100页 |
3 讨论 | 第100-101页 |
·cDNA文库的质量 | 第100-101页 |
·三角帆蚌EST序列与瘟病免疫相关因子 | 第101页 |
参考文献 | 第101-104页 |
第五章 三角帆蚌类PIT 54序列分析与组织特异性表达 | 第104-114页 |
1 材料与方法 | 第104-106页 |
·材料 | 第104页 |
·动物材料、菌种及质粒 | 第104页 |
·引物 | 第104页 |
·主要试剂与试剂盒 | 第104页 |
·方法 | 第104-106页 |
·总RNA的提取 | 第104-105页 |
·cDNA第一链的合成 | 第105页 |
·三角帆蚌类PIT 54基因的RT-PCR分析 | 第105-106页 |
·进化系统树的构建 | 第106页 |
2 结果分析 | 第106-112页 |
·RNA的提取 | 第106页 |
·三角帆蚌类PIT 54基因EST序列分析 | 第106-110页 |
·三角帆蚌类PIT 54氨基酸序列与其它物种的同源性比较 | 第106-109页 |
·进化系统树分析 | 第109-110页 |
·三角帆蚌类PIT 54基因在组织中的表达分析 | 第110-112页 |
3 讨论 | 第112-113页 |
·三角帆蚌类PIT 54 EST序列的基本特征 | 第112页 |
·三角帆蚌类PIT 54基因在不同组织中的表达 | 第112-113页 |
参考文献 | 第113-114页 |
总结 | 第114-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
作者简介 | 第116-117页 |
在读期间所发表的论文及取得的主要成果 | 第117-118页 |
附图 | 第118-123页 |