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三角帆蚌瘟病的病原病理及免疫相关因子筛选与表达分析

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-9页
缩略语表第9-15页
第一章 文献综述第15-37页
 1 研究背景第15-17页
 2 贝类动物病毒病的病原与病理研究进展第17-20页
   ·海洋贝类病毒第17-18页
   ·淡水贝类--三角帆蚌瘟病病毒(HcPV)第18-20页
 3 SSH技术与水产动物免痰相关因子第20-29页
   ·鱼类细胞因子第22-25页
     ·鱼类白细胞介素第23页
     ·干扰素第23页
     ·急性期蛋白第23-24页
     ·其他细胞因子第24-25页
   ·贝类动物免疫特性及免疫相关因子第25-28页
     ·水解酶类第26页
     ·抗菌肽第26-27页
     ·凝集素第27页
     ·氧化酶和抗氧化酶类第27-28页
     ·溶血素及其它第28页
   ·结合珠蛋白(HP)与PIT 54蛋白第28-29页
 4 论文研究目的与意义第29-30页
 参考文献第30-37页
第二章 三角帆蚌瘟病病毒形态与分子结构特征第37-55页
 1 材料与方法第37-44页
   ·材料第37-39页
     ·实验动物第37页
     ·菌株、质粒第37页
     ·主要试剂第37页
     ·主要仪器设备第37-38页
     ·引物第38-39页
   ·方法第39-44页
     ·病料的处理与保存第39页
     ·病毒的分离与复壮第39-40页
     ·病毒收集与纯化第40页
     ·病毒电镜检测第40页
     ·TRIzol法提取病毒RNA第40-41页
     ·DNase I处理第41页
     ·RNase A酶处理第41-42页
     ·S_1 Nuclease酶处理第42页
     ·cDNA第一链合成第42页
     ·PCR扩增第42-43页
     ·连接反应第43页
     ·感受态细胞的制备与转化第43-44页
     ·测序加工与同源性分析第44页
 2 结果分析第44-51页
   ·病料组织复感与病毒的分离、纯化第44-45页
     ·病料组织复感健康蚌第44页
     ·病毒分离与纯化第44-45页
   ·病毒形态特征第45-46页
   ·三角帆蚌瘟病病毒RNA及RNase A、DNase I、S_1 Nuclease处理第46-47页
   ·三角帆蚌瘟病病毒基因组cDNA文库的构建与分析第47-49页
   ·随即扩增的瘟病病毒的部分序列分第49-51页
 3 讨论第51-52页
   ·三角帆蚌瘟病病毒形态第51页
   ·三角帆蚌瘟病病毒分子生物学特性第51-52页
 参考文献第52-55页
第三章 三角帆蚌瘟病的组织病理研究第55-82页
 1 材料与方法第55-58页
   ·材料第55-56页
     ·试验动物第55页
     ·仪器第55页
     ·药品第55-56页
   ·方法第56-58页
     ·带毒组织液的制备第56页
     ·人工感染第56页
     ·药品的配制第56页
     ·病理组织的采集第56页
     ·电镜材料的制备第56页
     ·组织切片的制作第56-58页
 2 结果分析第58-77页
   ·感染病蚌症状变化全程观察第58页
   ·电镜下三角帆蚌病灶组织细胞的病理变化特点第58-67页
     ·肝组织的病理变化[图版Ⅰ:1-6]第58-59页
     ·内脏团的病理变化[图版Ⅱ:7-12]第59页
     ·外套膜的病理变化[图版Ⅲ:13-18]第59-60页
     ·鳃的病理变化[图版Ⅳ:19-24]第60页
     ·斧足的病理变化[图版Ⅴ:25-30]第60-61页
     ·三角帆蚌瘟病病毒在蚌体内各组织中的动态变化第61-67页
   ·光镜下病灶组织的病理变化第67-77页
     ·肝脏的病理变化[图版Ⅵ:31-36]第67页
     ·胃的病理变化[图版Ⅶ:37-42]第67-68页
     ·肠的病理变化[图版Ⅷ:43-48]第68页
     ·外套膜的病理变化[图版Ⅸ:49-54]第68-69页
     ·鳃的病理变化[图版Ⅹ:55-60]第69-70页
     ·斧足的病理变化[图版Ⅺ:61-66]第70-77页
 3 讨论第77-79页
   ·三角帆蚌瘟病病蚌消化系统的病理特征第77页
   ·三角帆蚌瘟病病蚌主要肌肉组织的病理特征第77-78页
   ·三角帆蚌瘟病病蚌呼吸器官的病理特征第78-79页
 参考文献第79-82页
第四章 三角帆蚌肝脏抑制性消减cDNA文库的构建与分析第82-104页
 1 材料与方法第82-92页
   ·材料第82-84页
     ·实验动物与菌种第82页
     ·主要试剂第82页
     ·主要仪器设备第82-83页
     ·接头和引物第83-84页
   ·实验方法第84-92页
     ·动物材料处理第84页
     ·总RNA的提取第84页
     ·mRNA的分离纯化第84-85页
     ·抑制性消减杂交(SSH)第85-90页
     ·消减cDNA文库的构建第90-92页
 2 结果分析第92-100页
   ·总RNA的提取及mRNA的纯化第92-93页
   ·双链cDNA合成和Rsa I酶切效率第93-94页
   ·SSH产物的2次PCR扩增结果第94-95页
   ·接头连接效率检测第95-96页
   ·消减杂交效率检测第96页
   ·插入片段的PCR扩增第96-97页
   ·消减cDNA EST序列的统计与分析第97页
   ·消减cDNA EST功能的分类第97-100页
 3 讨论第100-101页
   ·cDNA文库的质量第100-101页
   ·三角帆蚌EST序列与瘟病免疫相关因子第101页
 参考文献第101-104页
第五章 三角帆蚌类PIT 54序列分析与组织特异性表达第104-114页
 1 材料与方法第104-106页
   ·材料第104页
     ·动物材料、菌种及质粒第104页
     ·引物第104页
     ·主要试剂与试剂盒第104页
   ·方法第104-106页
     ·总RNA的提取第104-105页
     ·cDNA第一链的合成第105页
     ·三角帆蚌类PIT 54基因的RT-PCR分析第105-106页
     ·进化系统树的构建第106页
 2 结果分析第106-112页
   ·RNA的提取第106页
   ·三角帆蚌类PIT 54基因EST序列分析第106-110页
     ·三角帆蚌类PIT 54氨基酸序列与其它物种的同源性比较第106-109页
     ·进化系统树分析第109-110页
   ·三角帆蚌类PIT 54基因在组织中的表达分析第110-112页
 3 讨论第112-113页
   ·三角帆蚌类PIT 54 EST序列的基本特征第112页
   ·三角帆蚌类PIT 54基因在不同组织中的表达第112-113页
 参考文献第113-114页
总结第114-115页
致谢第115-116页
作者简介第116-117页
在读期间所发表的论文及取得的主要成果第117-118页
附图第118-123页

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