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二穗短柄草中VRT2-like基因的克隆及初步的功能分析

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-23页
   ·植物开花的分子调控机理研究第12-17页
     ·光周期途径第12-14页
     ·春化途径第14-15页
     ·自主开花途径第15-16页
     ·GA 途径第16-17页
   ·MADS-box 基因家族第17-19页
     ·MADS-box 基因的分布第17-18页
     ·MADS-box 基因的分类第18页
     ·MADS-box 基因的结构第18页
     ·MADS-box 基因的功能第18-19页
   ·二穗短柄草作为禾本科模式植物的依据第19-21页
     ·二穗短柄草与其他禾本科之间的亲缘关系较近第19-20页
     ·二穗短柄草具有禾本科植物最小的基因组第20页
     ·可以作为温带禾本科植物功能基因组分析的重要工具第20页
     ·易遗传转化第20页
     ·丰富的遗传变异材料第20-21页
     ·理想的形态与生长特性第21页
   ·本研究的目的及意义第21-23页
2 材料与方法第23-43页
   ·实验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·植物材料培养第23页
     ·菌株和质粒第23页
     ·酶及生化试剂第23-24页
     ·PCR 引物第24页
     ·培养基第24页
   ·实验方法第24-43页
     ·RNA 提取第24-25页
     ·cDNA 第一条链的合成第25页
     ·cDNA 的回收纯化第25页
     ·cDNA 的5’加尾反应第25-26页
     ·BdVRT2-like1 的cDNA 全长序列的获得第26-28页
     ·BdVRT2-like2 的cDNA 全长序列的获得第28-31页
     ·TaVRT-2 的cDNA 全长序列的获得第31-32页
     ·拟南芥中AtSVP 启动子有效序列的获得第32页
     ·CTAB 法提取短柄草基因组总DNA第32-33页
     ·电泳目的片段的回收第33页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第33-34页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第34页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第34页
     ·质粒DNA 的提取第34-35页
     ·克隆载体的酶切鉴定第35页
     ·半定量RT-PCR 分析第35-36页
     ·植物表达载体的构建第36-39页
     ·植物表达载体的转化第39-40页
     ·拟南芥的农杆菌侵染操作方法第40-41页
     ·转基因种子的筛选及遗传分析第41页
     ·拟南芥种子的储存第41-42页
     ·荧光定量PCR 的操作方法第42-43页
3 结果与分析第43-65页
   ·短柄草中BdVRT2-like 基因对应的cDNA 序列的克隆第43-46页
     ·短柄草总RNA 的提取及反转录获得cDNA第43页
     ·BdVRT2-like1 的cDNA 序列的克隆第43-45页
     ·BdVRT2-like2 的cDNA 序列的克隆第45-46页
   ·短柄草中BdVRT2-like 基因的cDNA 序列及编码的氨基酸的信息第46-48页
     ·BdVRT2-like1 的cDNA 全长序列以及编码的氨基酸序列第46-47页
     ·BdVRT2-like2 的cDNA 全长序列以及编码的氨基酸序列第47-48页
   ·短柄草中BdVRT2-like 基因与其它植物中同源基因的亲缘关系对比第48-50页
   ·短柄草中BdVRT2-like 基因的表达分析第50-55页
     ·短柄草中BdVRT2-like1 的表达分析第50-52页
     ·短柄草中BdVRT2-like2 的表达分析第52-55页
   ·短柄草中BdVRT2-like 基因的功能研究第55-65页
     ·表达载体的构建第55-57页
     ·野生型拟南芥(col)的侵染及筛选鉴定第57-60页
     ·短柄草愈伤的侵染及筛选鉴定第60-65页
4 讨论第65-68页
5 结论第68-69页
参考文献第69-76页
致谢第76页

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