| 论文缩写说明 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-19页 |
| 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·材料 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-29页 |
| ·tbpB基因的扩增 | 第20-21页 |
| ·tbpB基因的克隆及序列分析 | 第21-23页 |
| ·原核表达载体pET-32a(+)-tbpB的构建 | 第23-24页 |
| ·表达载体pET-32a(+)-tbpB的构建 | 第23页 |
| ·重组表达质粒PCR与酶切鉴定 | 第23页 |
| ·重组表达质粒转化进E.coli(DE3) | 第23-24页 |
| ·重组TbpB蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第24-27页 |
| ·重组TbpB蛋白的初步表达鉴定 | 第24页 |
| ·重组TbpB蛋白诱导条件的优化 | 第24页 |
| ·重组TbpB蛋白的细胞定位分析 | 第24-25页 |
| ·重组TbpB蛋白的初步纯化 | 第25-26页 |
| ·重组TbpB蛋白试剂盒纯化及含量测定 | 第26页 |
| ·重组TbpB蛋白免疫印迹分析(Western-blotting) | 第26-27页 |
| ·重组TbpB蛋白对小鼠的免疫保护效力研究 | 第27-29页 |
| ·APP1、APP2、APP6型菌攻毒剂量的确定 | 第27页 |
| ·tbpB基因在BL21(DE3)中的诱导表达和包涵体的制备 | 第27-28页 |
| ·疫苗的制备及免疫 | 第28页 |
| ·小鼠抗重组TbpB蛋白抗体的检测 | 第28页 |
| ·攻毒试验 | 第28-29页 |
| 试验结果 | 第29-40页 |
| 1 PCR扩增结果 | 第29页 |
| 2 重组质粒pMD19-T simple-tbpB的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pMD19-T simple-tbpB的PCR鉴定 | 第29页 |
| ·重组质粒pMD19-T simple-tbpB的酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 3 重组质粒序列的同源性分析 | 第30-32页 |
| 4 原核表达载体pET-32a(+)-tbpB的构建 | 第32页 |
| ·重组质粒pET-32a(+)-tbpB的PCR鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒pET-32a(+)-tbpB的酶切鉴定 | 第32页 |
| 5 重组TbpB蛋白在大肠杆菌中的表达分析 | 第32-35页 |
| ·重组质粒转化进E.coli BL21(DE3)后的鉴定分析 | 第32页 |
| ·重组TbpB蛋白的初步表达鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组TbpB蛋白诱导条件的优化 | 第33-35页 |
| ·重组TbpB蛋白的细胞定位分析 | 第35页 |
| ·重组TbpB蛋白纯化分析及蛋白含量测定 | 第35页 |
| ·重组TbpB蛋白免疫印迹分析(Western-blotting) | 第35页 |
| 6 小鼠抗rTbpB抗体的检测 | 第35-37页 |
| 7 攻毒保护率 | 第37-38页 |
| 8 讨论 | 第38-39页 |
| ·重组表达蛋白免疫时免疫佐剂的选择 | 第38页 |
| ·APPI型菌重组TbpB蛋白与其它型APP血清的交叉反应分析 | 第38-39页 |
| ·重组TbpB蛋白免疫小鼠后抗体消长规律 | 第39页 |
| ·重组TbpB蛋白免疫保护作用 | 第39页 |
| 9 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 致谢 | 第43-45页 |
| 附录I:APPI的tbpB基因侧序结果峰图 | 第45-51页 |
| 附录Ⅱ:试验试剂的配置 | 第51-52页 |
