| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一部分 前言 | 第9-19页 |
| ·卵透明带避孕疫苗的研究现状 | 第9-11页 |
| ·DNA疫苗诱发生殖道粘膜免疫 | 第11-14页 |
| ·粘膜免疫概述 | 第11页 |
| ·粘膜免疫途径 | 第11-13页 |
| ·DNA疫苗在粘膜免疫中的应用 | 第13-14页 |
| ·细胞因子作为粘膜免疫佐剂的研究进展 | 第14-18页 |
| ·粘膜免疫佐剂 | 第14-15页 |
| ·细胞因子 | 第15页 |
| ·白细胞介素5 | 第15-18页 |
| ·本研究的目的 | 第18-19页 |
| 第二部分 实验材料、试剂与仪器 | 第19-21页 |
| ·主要材料与试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 第三部分 技术路线与实验方法 | 第21-32页 |
| ·本研究技术路线 | 第21页 |
| ·重组白细胞介素5及猪卵透明带共表达载体pVAX1-hIL-5-pZP3α的构建及鉴定 | 第21-26页 |
| ·含有目的基因的pBR322质粒、pZ58质粒和空载体质粒pVAX1的获得 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·基因扩增 | 第22-24页 |
| ·构建重组质粒pVAX1-hIL-5-pZP3α | 第24-25页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组质粒在 HeLa细胞中的瞬时表达 | 第26-28页 |
| ·细胞培养及重组质粒 DNA转染 | 第27页 |
| ·表达产物的检测 | 第27-28页 |
| ·壳聚糖/DNA免疫微粒的制备及包裹率的测定 | 第28-29页 |
| ·免疫微粒的制备 | 第28页 |
| ·壳聚糖对 DNA的包裹率的测定 | 第28-29页 |
| ·用壳聚糖/DNA免疫微粒免疫小鼠 | 第29-30页 |
| ·免疫小鼠 | 第29页 |
| ·样品采集 | 第29-30页 |
| ·抗卵透明带抗体的测定 | 第30页 |
| ·小鼠抗生育试验 | 第30页 |
| ·检测特异淋巴细胞的数量及卵巢组织结构变化观察 | 第30-32页 |
| ·ELISPOT检测特异的IFN-γ分泌细胞数 | 第30-31页 |
| ·卵巢组织结构的观察 | 第31-32页 |
| 第四部分 实验结果 | 第32-44页 |
| ·PCR法获得目的基因片段 | 第32页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第32-34页 |
| ·重组质粒在 HeLa细胞中的瞬时表达的检测结果 | 第34-35页 |
| ·ELISA法检测pVAX1-hIL-5-pZP3α在 HeLa细胞中的表达 | 第34页 |
| ·细胞酶联免疫组化检测pVAX1-hIL-5-pZP3α在 HeLa细胞中的表达 | 第34-35页 |
| ·壳聚糖对质粒 DNA的包裹率 | 第35页 |
| ·ELISA法检测小鼠体内抗pZP3抗体反应结果 | 第35-40页 |
| ·小鼠血清抗 pZP3 IgA抗体反应结果 | 第35-37页 |
| ·小鼠血清抗 pZP3 IgG抗体反应结果 | 第37页 |
| ·小鼠阴道分泌液抗 pZP3 IgA抗体反应结果 | 第37-39页 |
| ·小鼠粪便浸液抗 pZP3 IgA抗体反应结果 | 第39-40页 |
| ·抗生育效果 | 第40页 |
| ·ELISPOT检测 IFN-γ分泌细胞数的结果 | 第40-41页 |
| ·卵巢的组织学观察 | 第41-44页 |
| 第五部分 讨论 | 第44-52页 |
| ·真核表达载体pVAX1-hIL-5-pZP3α的构建与表达 | 第44-46页 |
| ·DNA避孕疫苗免疫小鼠诱发的抗pZP3抗体反应 | 第46-48页 |
| ·ELISPOT技术评价ZP DNA疫苗诱发的免疫反应 | 第48-50页 |
| ·抗生育效果与免疫对小鼠卵巢的影响 | 第50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| ·不足与展望 | 第51-52页 |
| 第六部分 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-70页 |
| 附录Ⅰ 本研究中所用常规实验方法 | 第57-61页 |
| 附录Ⅱ 本研究中所用试剂配方 | 第61-65页 |
| 附录Ⅲ 质粒pVAX1-hIL-5-pZP3α的完整序列 | 第65-68页 |
| 附录Ⅳ 英文缩略词索引 | 第68-69页 |
| 附录Ⅴ 在校期间发表研究论文情况 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
