| 1 引言 | 第1-13页 |
| ·新城疫病毒的分子结构特征 | 第9-10页 |
| ·新城疫病毒的致病性分子基础 | 第10-11页 |
| ·F蛋白 | 第10-11页 |
| ·HN蛋白 | 第11页 |
| ·新城疫基因工程疫苗的研究现状 | 第11-12页 |
| ·研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-26页 |
| ·材料 | 第13-17页 |
| ·毒种 | 第13页 |
| ·菌株和质粒 | 第13页 |
| ·酶和主要试剂 | 第13页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第13-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-26页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| ·病毒的繁殖与浓缩 | 第18页 |
| ·RNA的提取 | 第18页 |
| ·引物设计与合成 | 第18页 |
| ·RT-PCR扩增F、HN | 第18-19页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第19-20页 |
| ·重组克隆载体的鉴定和PCR扩增产物的序列测定 | 第20-21页 |
| ·目的基因的原核表达载体的构建和鉴定 | 第21-22页 |
| ·目的片段的表达 | 第22-23页 |
| ·溶解性判定试验 | 第23页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| ·Western-blotting分析 | 第24页 |
| ·重组蛋白的动物免疫 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-40页 |
| ·RT—PCR扩增的F、HN基因片段 | 第26页 |
| ·重组质粒PGEM-F和PGEM-HN的鉴定 | 第26-27页 |
| ·目的片段序列测定 | 第27-32页 |
| ·重组表达质粒PET-F和PET-HN的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第33-35页 |
| ·不同诱导温度对重组蛋白表达量的影响 | 第33-34页 |
| ·不同诱导时间对重组蛋白表达量的影响 | 第34-35页 |
| ·不同IPTG浓度对重组蛋白表达量的影响 | 第35页 |
| ·溶解性判定试验结果 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第36页 |
| ·免疫印迹鉴定分析 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白免疫后产生抗体的ELISA检测 | 第37-40页 |
| ·建立间接ELISA方法方阵，确定重组蛋白抗原最适包被浓度 | 第37-39页 |
| ·间接ELISA方法检测小鼠抗重组蛋白的抗体效价 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| ·病毒RNA提取 | 第40页 |
| ·影响外源基因在大肠杆菌中高效表达的因素 | 第40-42页 |
| ·关于原核高效表达载体PET表达系统 | 第40-41页 |
| ·基因本身 | 第41页 |
| ·诱导温度、诱导时间及IPTG浓度对重组蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| ·影响蛋白溶解性的因素 | 第42页 |
| ·关于重组蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·包涵体的分离 | 第42-43页 |
| ·包涵体的洗涤与溶解 | 第43页 |
| ·关于重组蛋白的复性 | 第43页 |
| ·免疫印迹检测 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 作者简历 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 当代畜牧 | 第54-57页 |