大豆子叶节高效再生体系的建立与GmCOI1基因的遗传转化
| 独创性声明 | 第1页 |
| 关于论文使用授权的说明 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| 1 大豆再生体系 | 第10-13页 |
| ·大豆器官发生再生体系 | 第10-11页 |
| ·大豆体细胞胚胎发生再生体系 | 第11-12页 |
| ·大豆原生质体再生体系 | 第12-13页 |
| ·大豆花粉、花药再生体系 | 第13页 |
| 2 大豆遗传转化方法 | 第13-17页 |
| ·农杆菌介导法 | 第13-16页 |
| ·大豆易感性研究 | 第13-14页 |
| ·农杆菌菌株 | 第14页 |
| ·酚类化合物及其它因素对农杆菌介导转化的影响 | 第14页 |
| ·农杆菌介导的大豆遗传转化研究 | 第14-16页 |
| ·基因枪法 | 第16页 |
| ·PEG介导法 | 第16页 |
| ·电激法 | 第16-17页 |
| ·花粉管通道法 | 第17页 |
| ·显微注射法 | 第17页 |
| 3 大豆转基因的应用 | 第17-19页 |
| ·抗病虫害基因 | 第17-18页 |
| ·品质改良基因 | 第18页 |
| ·其它方面的应用 | 第18-19页 |
| 4 大豆转基因研究的发展方向 | 第19-20页 |
| ·建立高效的大豆转基因受体系统 | 第19页 |
| ·转基因方法的优化和创新 | 第19页 |
| ·目的基因的选择 | 第19页 |
| ·筛选标记基因的改造 | 第19-20页 |
| ·外源基因表达的稳定性 | 第20页 |
| 5 COI1基因 | 第20页 |
| 6 GmCOI1基因 | 第20-21页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 大豆子叶节高效再生体系的建立 | 第22-31页 |
| 1 材料与方法 | 第22-23页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·大豆品种 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-23页 |
| ·大豆无菌苗的获得 | 第22页 |
| ·诱导丛生芽培养基激素浓度筛选 | 第22-23页 |
| ·丛生芽诱导生根激素浓度筛选 | 第23页 |
| ·试管苗的移栽 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-29页 |
| ·消毒方式和接种方式对种子萌发的影响 | 第23-24页 |
| ·萌发天数对丛生芽分化的影响 | 第24页 |
| ·不同萌发培养基对丛生芽分化的影响 | 第24-25页 |
| ·外植体大小对子叶节丛生芽分化的影响 | 第25-26页 |
| ·不同诱导培养基对丛生芽分化的影响 | 第26-27页 |
| ·IBA浓度对大豆子叶节丛生芽生根的影响 | 第27-29页 |
| 3 讨论与结论 | 第29-31页 |
| ·种子的消毒 | 第29页 |
| ·激素浓度的筛选 | 第29-30页 |
| ·外植体的褐变 | 第30页 |
| ·试管苗的移栽 | 第30页 |
| ·结论 | 第30-31页 |
| 第三章 GmCOI1基因的遗传转化 | 第31-45页 |
| 1 材料与方法 | 第31-36页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·质粒及农杆菌菌株 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·受体品种 | 第31页 |
| ·实验用培养基 | 第31-32页 |
| ·LB培养基 | 第31页 |
| ·转化用培养基 | 第31-32页 |
| ·抗生素及生化试剂 | 第32页 |
| ·DNA提取试剂 | 第32-33页 |
| ·植物DNA抽提液 | 第32-33页 |
| ·质粒DNA抽提液 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·抗生素浓度的筛选 | 第33页 |
| ·农杆菌的活化 | 第33-34页 |
| ·转化受体的准备 | 第34页 |
| ·农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化 | 第34页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第34-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-41页 |
| ·Kan筛选浓度的确定 | 第36-38页 |
| ·预培养时间对大豆子叶节转化的影响 | 第38页 |
| ·农杆菌侵染和共培养时间对子叶节转化的影响 | 第38-39页 |
| ·AS添加方式对子叶节转化的影响 | 第39-40页 |
| ·洗菌方法对抑菌的影响 | 第40-41页 |
| ·PCR检测结果 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-45页 |
| ·外植体的预培养 | 第42页 |
| ·农杆菌侵染时间和共培养时间 | 第42页 |
| ·AS的使用 | 第42-43页 |
| ·选择的时期和方法 | 第43页 |
| ·二次筛选 | 第43-44页 |
| ·遗传转化存在的问题 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 缩写词及英汉对照 | 第51-52页 |
| 图版 | 第52-53页 |
| 图版说明 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
