阿维菌素生物合成关键基因的改造
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| ·阿维菌素概述 | 第12-14页 |
| ·阿维菌素的生物合成 | 第14-21页 |
| ·阿维菌素生物合成基因的遗传学改造 | 第21-23页 |
| ·立题依据 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-33页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA小量提取 | 第28页 |
| ·链霉菌总DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备和DNA转化 | 第29页 |
| ·DNA酶切和连接 | 第29-30页 |
| ·DNA电泳和凝胶片段回收 | 第30页 |
| ·PCR反应 | 第30-31页 |
| ·接合转移实验及双交换菌株的筛选 | 第31-32页 |
| ·发酵产物的提取及检测 | 第32-33页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第33-60页 |
| ·阿维链霉菌aveC基因的表达 | 第33-45页 |
| ·质粒pCG14的构建 | 第33-38页 |
| ·接合转移实验 | 第38-39页 |
| ·双交换菌株的筛选 | 第39页 |
| ·诺西肽诱导表达aveC基因 | 第39页 |
| ·重组菌株发酵产物的HPLC分析 | 第39-41页 |
| ·重组菌株基因整合分析 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·阿维链霉菌aveD基因的插入失活 | 第45-51页 |
| ·插入失活质粒pCG23的构建 | 第45-47页 |
| ·接合转移实验 | 第47页 |
| ·双交换菌株的筛选 | 第47-48页 |
| ·重组菌株发酵产物的HPLC分析 | 第48页 |
| ·对重组菌株AV-C337染色体的PCR验证 | 第48-50页 |
| ·对重组菌株AV-C337遗传稳定性的考察 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·阿维链霉菌aveD基因的deletion失活 | 第51-60页 |
| ·deletion失活重组质粒pCG29的构建 | 第51-57页 |
| ·接合转移实验 | 第57页 |
| ·双交换菌株的筛选 | 第57页 |
| ·重组菌株发酵产物的HPLC分析 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
