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人类未成熟卵体外成熟培养、雌/雄原核形态学判别和原核期胚胎原核移植及其重构胚后续发育潜能的研究

缩略词表第1-9页
中文摘要第9-14页
 一、卵丘冠颗粒细胞剥除的人未成熟卵体外成熟培养和发育潜能的研究第9-11页
 二、人类原核形态学特征的亲缘学意义及其验证研究第11-12页
 三、人类原核期胚胎原核移植操作及其重构胚后续发育潜能的研究第12-14页
英文摘要第14-25页
 Part Ⅰ: Study on in-vitro maturation of human corona-cumulus-denuded immature oocytes and the subsequent preimplantation embryo development第14-19页
 Part Ⅱ: Study on kinship significances of morphological characteristics of human pronuclei and their verification第19-21页
 Part Ⅲ: Study on pronucleus transfer in human zygotes and the subsequent preimplantation development of reconstructed embryos第21-25页
1 研究背景第25-36页
   ·器官、组织移植或细胞替代治疗呼唤自体移植/替代治疗第25页
   ·自体ESCs是最有潜力的自体移植/替代治疗供体源第25页
   ·自体ESCs通过体细胞核移植或生殖细胞单性生殖技术创建第25-26页
   ·自体ESCs的创建还存在明显的“低效率”问题第26-27页
   ·自体ntESCs创建特征和低效率原因分析第27页
   ·自体生殖细胞单性生殖方式ESCs创建特征和低效率原因分析第27-28页
   ·提高自体ESCs创建效率的策略和方案第28-36页
     ·选用自体原核作为供体细胞核源,解决成体细胞核基因重新编程问题。第28-29页
     ·构建雌核发育/雄核发育自体重构胚,解决重构胚细胞组分缺失问题。第29页
     ·对雌核发育/雄核发育自体重构胚进行校正处理,解决基因印记问题。第29-31页
  图1-1 亲缘性基因印记校正的自体雌核发育原核期胚胎构建示意图第31-33页
  图1-2 亲缘性基因印记校正的自体雄核发育原核期胚胎构建示意图第33-35页
  图1-3 第一次减数分裂同源染色体分离,产生纺锤体和第一极体第35-36页
2 人类卵丘冠颗粒细胞剥除的未成熟卵体外成熟培养和发育潜能的研究第36-62页
   ·材料和方法第38-41页
     ·未成熟卵的获取第38页
     ·IVM方案和具体的培养液制备方法第38-39页
     ·研究设计第39-40页
     ·具体的IVM处理第40页
     ·受精和胚胎培养第40-41页
     ·统计分析方法第41页
   ·结果第41-55页
     ·AutoMFF对AutoCCs生长的影响第41页
     ·不同未成熟卵类别和IVM方案诸IVM时段成熟率及比较第41-42页
     ·不同类别和IVM方案成熟卵和体内自然成熟卵ICSI受精和发育潜能比较第42-43页
  表2-1 不孕妇女的一般临床特征第43-45页
  表2-2 不同IVM方案不同时段GV期和M-I期ccdIMOs成熟率及比较第45-46页
  表2-3 不同类别和IVM方案成熟卵和体内自然成熟卵ICSI受精和发育潜能比较第46-48页
  图2-1 卵核成熟的主要阶段第48-49页
  图2-2 用于ccdIMOs的AutoMFF-IVM技术和AutoMFF&CCs-coIVM技术第49-50页
  图2-3 追加或不追加AutoMFF相应autoCCs不同培养时段的饲养层样生长第50-51页
  图2-4 不同类别ccdIMOs不同IVM时段累积成熟率及比较第51-52页
  图2-5 M1期ccdIMOs不同IVM方案不同时段相应IVM效果及比较第52-53页
  图2-6 GV期ccdIMOs不同IVM方案不同时段相应IVM效果及比较第53-54页
  图2-7 体外IVM成熟卵和体内自然成熟卵ICSI受精率、发育潜能及比较第54-55页
   ·讨论第55-60页
     ·人卵巢刺激周期获取的ccdIMOs体外培养成熟规律第55-56页
     ·人卵巢刺激周期获取的ccdIMOs体外培养成熟后受精和发育潜能第56页
     ·AutoMFF和AutoCCs参与的同步/个体化ccdIMOs IVM及其价值第56-60页
   ·小结第60-62页
3 人类原核形态学特征的亲缘学意义及其验证研究第62-70页
   ·材料和方法第63-64页
     ·研究用卵和精子的获取第63页
     ·ccdIMOs的体外成熟培养(IVM)第63-64页
     ·2Sperm-ICSI构建三原核胚胎模型第64页
     ·研究设计和统计分析方法第64页
   ·结果第64-67页
     ·ccdIMOs体外培养成熟卵2Sperm-ICSI创建三原核胚胎模型的效果第64-65页
     ·人原核亲缘性活体判别形态学标准对三原核胚胎模型原核亲缘性的判别效果第65-66页
  图3-1 两性生殖原核期胚胎原核亲缘性的形态学特征第66-67页
   ·讨论第67-69页
     ·ccdIMOs体外培养成熟卵2Sperm-ICSI创建三原核胚胎模型的效果第67页
     ·人2Sperm-ICSI三原核胚胎模型在人原核亲缘性形态学判别研究的意义第67-68页
     ·人类原核形态学特征的亲缘学意义第68-69页
   ·小结第69-70页
4 人类原核期胚胎原核移植及其重构胚后续发育潜能的研究第70-86页
   ·材料和方法第70-75页
     ·研究用原核期胚胎的获取第70-71页
     ·人两性生殖原核期胚胎原核亲缘性判别的形态学标准第71页
     ·原核期胚胎原核移植显微操作第71-74页
     ·原核期胚胎的植入前培养和观察第74页
     ·研究设计和统计分析方法第74-75页
   ·结果第75-82页
     ·人多原核胚胎选择性原核减灭术(SPnR)及其后的植入前发育第75页
     ·人原核期胚胎原核移植(SPnR/ICPI方式)重构及其后的植入前发育第75-77页
  图4-1 多原核胚胎选择性原核减灭术及其后的植入前发育第77-78页
  图4-2 原核期胚胎原核移植(SPnR/ICPI方式)及其后的植入前发育第78-79页
  图4-3 失败的卵浆内原核注射和实际的卵浆外原核注射第79-80页
  表4-1 人多原核胚胎选择性原核减灭术(SPnR)后的植入前发育第80-81页
  表4-2 人原核期胚胎原核移植(SPnR/ICPI方式)及其后的植入前发育第81-82页
   ·讨论第82-84页
     ·人原核从原核期胚胎移出操作(SPnR)及其重构胚的后续发育潜能第82页
     ·多原核胚胎选择性原核减灭术(SPnR)及其临床应用/开发价值第82-83页
     ·人原核期胚胎SPnR/ICPI方式原核移植操作及其重构胚的后续发育潜能第83-84页
   ·小结第84-86页
5 研究结论第86-88页
6 参考文献第88-95页
7 文献综述:人自体胚胎干细胞创建技术的研究进展第95-103页
   ·自体ESCs自体遗传背景构建的主流技术第95-96页
   ·自体ESCs创建的“低效率”问题第96-97页
   ·自体ntESCs创建特征和低效率原因分析第97-98页
   ·自体生殖细胞单性生殖方式ESCs创建特征和低效率原因分析第98-99页
   ·人自体ESCs的创建前景和应用展望第99-100页
   ·参考文献第100-103页
8 附件:论文、专利、科研项目汇编第103-165页
   ·人AutoMFF和AutoCCs辅助的体外成熟共培养促进ccdIMOs体外成熟(英文)第104-128页
   ·INSR基因17外显子一个奇特的SNP与华裔PCOS患者胰岛素低敏相关(英文)第128-133页
   ·GnRHa,而非GnRHant,可以有效地逆转卵巢刺激导致的小鼠子宫内膜integrin-β3和LIF低表达,改善子宫对胚胎的容受性(英文)第133-157页
   ·文献综述《人自体胚胎干细胞创建技术的研究进展》录用通知复印件第157-158页
   ·月经的生理和调节第158-160页
   ·医源性多胎妊娠的伦理问题及对策第160-163页
   ·国家知识产权局有关《一种人体未成熟卵体外成熟培养方法》实用新型专利申请受理通知书复印件第163-164页
   ·国家自然科学基金面上项目有关《亲缘性基因印记校正的雌核发育/雄核发育技术创建人自体胚胎干细胞的研究》立项详情复印件第164-165页
9 致谢第165页

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