| 插图、附表清单 | 第1-15页 |
| 缩略语表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| ·乙烯的生物合成 | 第16-18页 |
| ·ACC合酶(ACS) | 第16-17页 |
| ·ACC氧化酶(ACO) | 第17-18页 |
| ·乙烯信号转导 | 第18-22页 |
| ·乙烯受体 | 第19页 |
| ·CTR和蛋白激酶 | 第19-20页 |
| ·EIN2 | 第20页 |
| ·EIN3 and EIL | 第20-21页 |
| ·乙烯反应元件结合蛋白(EREBPs) | 第21-22页 |
| ·信号转录因子 | 第22-24页 |
| ·转录因子的结构和功能 | 第22-23页 |
| ·番茄中乙烯信号EREBPs转录因子 | 第23-24页 |
| ·研究目的与内容 | 第24-27页 |
| ·研究目的、意义 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 LeERF1和LeERF2基因克隆和序列分析 | 第27-41页 |
| ·材料与试剂 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·酶及试剂 | 第27页 |
| ·试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-33页 |
| ·破色期番茄果实总RNA提取 | 第29页 |
| ·RT-PCR扩增LeERF1和LeERF2基因 | 第29-30页 |
| ·LeERF1和LeERF2基因的克隆 | 第30-33页 |
| ·DNA序列测定及分析 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·重组质粒pET-LeERF1的构建过程 | 第33-34页 |
| ·破色期番茄果实总RNA提取 | 第34页 |
| ·LeERF1基因的RT-PCR扩增 | 第34页 |
| ·重组pET-LeERF1质粒的构建和鉴定 | 第34-35页 |
| ·LeERF1基因序列结果和分析 | 第35-37页 |
| ·重组pET-LeERF2质粒的构建过程 | 第37页 |
| ·LeERF2基因的RT-PCR扩增 | 第37页 |
| ·重组pET-LeERF2质粒的构建和鉴定 | 第37页 |
| ·LeERF2基因序列结果和分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| 第三章 LeERF1和LeERF2基因在原核细胞中的表达和亲和层析纯化 | 第41-52页 |
| ·材料与试剂 | 第41-43页 |
| ·菌株与质粒 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·溶液配制 | 第41-43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·LeERF1和LeERF2基因在大肠杆菌BL21中的表达 | 第43页 |
| ·蛋白表达条件优化 | 第43页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43-44页 |
| ·蛋白质纯化方案 | 第44页 |
| ·EMSA | 第44-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-50页 |
| ·LeERF1和LeERF2蛋白表达条件优化 | 第46-47页 |
| ·亲和层析纯化和回收LeERF1和LeERF2蛋白 | 第47-49页 |
| ·EMSA | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 番茄乙烯信号转录因子LeERF1／2多克隆抗体制备 | 第52-59页 |
| ·材料与试剂 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·主要溶液 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-55页 |
| ·多克隆抗体制备方案 | 第53页 |
| ·间接ELISA法检测血清效价 | 第53-54页 |
| ·多克隆抗体的纯化 | 第54页 |
| ·Western blotting检测多克隆抗体 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-58页 |
| ·LeERF1抗体的制备 | 第55-56页 |
| ·LeERF2抗体的制备 | 第56-57页 |
| ·Western blotting检测多克隆抗体 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 番茄果实成熟过程中LeERF1的亚细胞定位 | 第59-68页 |
| ·材料与试剂 | 第59-60页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·主要溶液 | 第59-60页 |
| ·方法 | 第60-62页 |
| ·样品包埋 | 第60-61页 |
| ·胶体金免疫染色 | 第61页 |
| ·番茄果实蛋白质的提取 | 第61页 |
| ·Western blotting | 第61-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-66页 |
| ·绿熟期番茄果实中LeERF1的亚细胞定位 | 第62页 |
| ·破色期番茄果实中LeERF1的亚细胞定位 | 第62-65页 |
| ·试验对照 | 第65页 |
| ·Western blotting | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第六章 LeERF1特异性结合启动子的分离和功能鉴定 | 第68-84页 |
| ·材料与试剂 | 第68-70页 |
| ·试验材料 | 第68页 |
| ·酶及试剂 | 第68页 |
| ·试剂配制 | 第68-70页 |
| ·方法 | 第70-74页 |
| ·提取番茄总DNA | 第70页 |
| ·随机引物设计 | 第70-71页 |
| ·随机引物PCR扩增 | 第71页 |
| ·体外结合反应 | 第71页 |
| ·乙烯信号转录因子LeERF1结合基因的克隆 | 第71-73页 |
| ·银染凝胶阻滞试验 | 第73-74页 |
| ·结果与分析 | 第74-82页 |
| ·番茄基因组DNA提取 | 第74页 |
| ·随机引物扩增番茄基因组DNA | 第74-81页 |
| ·银染凝胶阻滞试验检测LeERF1蛋白与启动子TLBF1／2的结合反应 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-84页 |
| 第七章 乙烯信号转录因子LeERF1与番茄果实病程胁迫的关系 | 第84-109页 |
| ·材料与试剂 | 第84-86页 |
| ·试验材料 | 第84页 |
| ·酶及试剂 | 第84页 |
| ·试剂的配制 | 第84-86页 |
| ·方法 | 第86-92页 |
| ·番茄果实蛋白质的提取 | 第86-87页 |
| ·番茄果实总RNA提取 | 第87页 |
| ·RT-PCR扩增基因 | 第87-88页 |
| ·扩增基因鉴定 | 第88-89页 |
| ·番茄果实乙烯释放量和几丁质酶酶活的检测 | 第89-91页 |
| ·Western blotting | 第91-92页 |
| ·结果与分析 | 第92-107页 |
| ·番茄青霉菌侵染绿熟期番茄果实 | 第92-96页 |
| ·番茄青霉菌侵染破色期番茄果实 | 第96-99页 |
| ·番茄青霉菌侵染粉红期番茄果实 | 第99-102页 |
| ·番茄青霉菌侵染红熟期番茄果实 | 第102-106页 |
| ·番茄果实中CHIT-1基因片段的克隆和测序 | 第106页 |
| ·番茄果实中基因片段ubil23的克隆和测序 | 第106-107页 |
| ·讨论 | 第107-109页 |
| 第八章 结论 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-117页 |
| 附录 | 第117-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 个人简历 | 第133页 |
