| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 缩写中英文对照 | 第13-19页 |
| 第一部分:文献综述 | 第19-77页 |
| 第一章 造血干细胞的研究进展 | 第19-27页 |
| ·造血干细胞的概念 | 第19页 |
| ·造血干细胞的起源 | 第19-20页 |
| ·造血干细胞的形态 | 第20页 |
| ·造血干细胞的表面标志 | 第20-23页 |
| ·CD133(或 AC133) | 第20-22页 |
| ·CD34 | 第22页 |
| ·c-kit | 第22页 |
| ·Sca-1 | 第22页 |
| ·Thy-1 | 第22-23页 |
| ·造血干细胞的可塑性 | 第23-24页 |
| ·造血干细胞的临床应用 | 第24-27页 |
| 第二章 哺乳动物胚胎造血的研究进展 | 第27-41页 |
| ·卵黄囊中起始原始造血 | 第27-28页 |
| ·成熟和永久造血的形成 | 第28页 |
| ·造血干细胞的迁移 | 第28-29页 |
| ·造血干细胞的归巢 | 第29页 |
| ·成血管血液干细胞 | 第29-35页 |
| ·原始造血过程中的成血管血液干细胞 | 第30-31页 |
| ·永久造血过程中的成血管血液干细胞 | 第31-32页 |
| ·成血管血液干细胞的多潜能 | 第32-33页 |
| ·影响胚胎造血的因素 | 第33-35页 |
| ·胎盘造血的研究进展 | 第35-41页 |
| ·胎盘初期造血灶的出现 | 第36页 |
| ·胎盘含有大量的造血干细胞 | 第36-37页 |
| ·胎盘可分泌许多造血相关因子 | 第37-39页 |
| ·胎盘贴壁细胞的培养与生物学特性 | 第39-40页 |
| ·胎盘造血的展望和存在的问题 | 第40-41页 |
| 第三章 ESC 体外向造血系统的分化研究概况 | 第41-62页 |
| ·人胚胎干细胞系的建立 | 第42页 |
| ·ESC 向造血细胞体外分化的方法分类 | 第42-44页 |
| ·EB 形成法 | 第43页 |
| ·ESC 与造血基质细胞系共培养法 | 第43-44页 |
| ·ESC 体外分化为造血细胞 | 第44-47页 |
| ·利用饲养层对 ESC 进行造血诱导 | 第44-45页 |
| ·EB 诱导造血形成 | 第45-46页 |
| ·影响 EB 造血诱导的一些因素 | 第46-47页 |
| ·分化的 ESC 在小鼠体内重建造血 | 第47-48页 |
| ·ESC 向造血干细胞/祖细胞诱导分化调控 | 第48-61页 |
| ·造血相关因子对胚胎造血和造血干细胞的影响 | 第49-57页 |
| ·造血过程中的转录调控 | 第57-61页 |
| ·人 ES 细胞向 HSC 定向诱导分化的应用前景 | 第61-62页 |
| ·存在问题及展望 | 第62页 |
| 参考文献 | 第62-77页 |
| 第二部分:试验研究 | 第77-171页 |
| 第四章 人胚骨髓间充质干细胞的分离培养及生物学特性研究 | 第77-87页 |
| 1 材料 | 第78-79页 |
| ·人胎儿骨髓 | 第78页 |
| ·试剂 | 第78页 |
| ·抗体 | 第78-79页 |
| ·仪器 | 第79页 |
| 2 方法 | 第79-81页 |
| ·人胚骨髓间充质细胞的分离培养 | 第79页 |
| ·骨髓间充质细胞的生物学特性鉴定 | 第79-80页 |
| ·hMSCs 的生长曲线的测定 | 第79页 |
| ·hMSCs 的冻存和复苏 | 第79-80页 |
| ·hMSCs 转 GFP 基因 | 第80页 |
| ·hMSCs 定向诱导分化为神经细胞 | 第80页 |
| ·hMSC 向成骨诱导 | 第80页 |
| ·hMSC 的表面抗原检测 | 第80页 |
| ·免疫组织化学 SP 法 | 第80-81页 |
| 3 结果 | 第81-82页 |
| ·人胚骨髓间充质干细胞的分离培养 | 第81页 |
| ·人胚骨髓间充质干细胞生物学特性 | 第81-82页 |
| ·hMSCs 细胞的生长曲线 | 第81页 |
| ·hMSCs 的冻存和复苏 | 第81页 |
| ·hMSCs 转染 GFP 基因 | 第81-82页 |
| ·hMSC 向神经元样细胞的定向诱导分化 | 第82页 |
| ·hMSC 向成骨细胞定向诱导 | 第82页 |
| ·hMSC 的表面抗原检测 | 第82页 |
| 4 讨论 | 第82-83页 |
| 5 小结 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
| 第五章 人骨髓间充质干细胞与 nthESC 共培养对造血分化的研究 | 第87-102页 |
| 1 材料 | 第89页 |
| ·细胞株 | 第89页 |
| ·hMSCs 饲养层 | 第89页 |
| ·试剂 | 第89页 |
| ·抗体 | 第89页 |
| ·仪器 | 第89页 |
| 2 方法 | 第89-91页 |
| ·免疫荧光 | 第89-90页 |
| ·免疫组织化学 SP 法 | 第90页 |
| ·nthES 细胞诱导分化成造血前体细胞 | 第90-91页 |
| ·人骨髓间充质干细胞饲养层的制备 | 第90页 |
| ·人 nthESC 的培养 | 第90页 |
| ·nthESC 在 MSC 饲养层上诱导培养向造血分化 | 第90-91页 |
| 3 结果 | 第91-92页 |
| ·与 MSC 共培养时 nthESC 的诱导形态观察 | 第91页 |
| ·造血形成阶段相关抗体表达 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-96页 |
| ·造血干细胞表型的选择 | 第92-93页 |
| ·hMSC 饲养层对 nthESC 向造血诱导的影响 | 第93-95页 |
| ·nthES 细胞向 HSC 诱导分化过程中 KDR~+、CD133~+和 CD34~+细胞 | 第95-96页 |
| 5 小结 | 第96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 第六章 悬浮培养 nthESC 向造血诱导分化研究 | 第102-117页 |
| 1 材料 | 第103页 |
| ·细胞株 | 第103页 |
| ·试剂 | 第103页 |
| ·抗体 | 第103页 |
| ·仪器 | 第103页 |
| 2 方法 | 第103-105页 |
| ·悬浮培养诱导 nthESC 向造血分化 | 第103-104页 |
| ·第一阶段: nthESC 细胞分化形成拟胚体(EB) | 第103-104页 |
| ·第二阶段:VEGF 支持 EB 生长和造血前体细胞分化 | 第104页 |
| ·第三阶段:EB 细胞向造血分化 | 第104页 |
| ·nthES 细胞分阶段诱导过程中细胞表面杭原的免疫细胞化学与荧光染色 | 第104页 |
| ·EB 切片染色 | 第104-105页 |
| 3 结果 | 第105-106页 |
| ·悬浮培养下拟胚体的形成 | 第105页 |
| ·拟胚体向造血细胞的分化 | 第105-106页 |
| ·EB 生长特性观察 | 第105页 |
| ·nthES 分阶段诱导过程中细胞表面抗原的免疫组化和免疫荧光染色鉴定 | 第105-106页 |
| 4 讨论 | 第106-110页 |
| ·悬浮培养体系中不同的细胞因子作用于 nthES 细胞成血分化的不同阶段 | 第106-109页 |
| ·培养方法的选择 | 第106-107页 |
| ·BMP4 和 FGF-1 对 nthES 细胞成血分化的作用 | 第107-108页 |
| ·VEGF 对 EB 的形成和造血细胞的作用 | 第108-109页 |
| ·nthES 细胞向 HSC 诱导分化过程中 KDR~+、CD133~+和 CD34~+细胞 | 第109-110页 |
| 5 小结 | 第110页 |
| 参考文献 | 第110-117页 |
| 第七章 人卵黄囊中造血前体细胞和造血相关因子时序表达研究 | 第117-139页 |
| 1 材料 | 第118-121页 |
| ·卵黄囊 | 第118页 |
| ·抗体 | 第118-119页 |
| ·试剂 | 第119-120页 |
| ·仪器 | 第120-121页 |
| 2 方法 | 第121-123页 |
| ·免疫组织化学 SP 法 | 第121页 |
| ·RT-PCR | 第121-123页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第121-122页 |
| ·RT-PCR | 第122-123页 |
| 3 结果 | 第123-126页 |
| ·CD34、CD133、c-kit 和 KDR 在卵黄囊中的表达 | 第123-124页 |
| ·VEGF、BMP4、FGF-1 和 SCF 在卵黄囊中的表达 | 第124-126页 |
| ·转录因子在卵黄囊中的表达 | 第126页 |
| 4 讨论 | 第126-131页 |
| ·造血前体细胞、干/祖细胞在卵黄囊中的出现 | 第127-128页 |
| ·造血相关因子在卵黄囊中的表达 | 第128-130页 |
| ·转录因子在卵黄囊中的表达 | 第130-131页 |
| 5 小结 | 第131页 |
| 参考文献 | 第131-139页 |
| 第八章 人胎肝中造血干细胞和造血相关因子的时序表达研究 | 第139-155页 |
| 1 材料 | 第140页 |
| ·人胎肝 | 第140页 |
| ·试剂 | 第140页 |
| ·抗体 | 第140页 |
| ·仪器 | 第140页 |
| 2 方法 | 第140-141页 |
| ·免疫组织化学方法 | 第140-141页 |
| ·RT-PCR 方法 | 第141页 |
| 3 结果 | 第141-144页 |
| ·CD34、CD133、c-kit 和 KDR 在胎肝中的表达 | 第141-142页 |
| ·VEGF、BMP4、SCF 和 FGF-1 在不同胚龄胎肝中的表达 | 第142页 |
| ·KDR、CD133、CD34 和 c-kit 染色强度和数量在不同胚龄胎肝中的 比较 | 第142-143页 |
| ·VEGF、BMP4、SCF 和 FGF-1 染色强度和数量在三组胎肝中的比较 | 第143-144页 |
| ·转录因子在三组胎肝中的表达 | 第144页 |
| 4 讨论 | 第144-148页 |
| ·造血相关标记在肝中的表达 | 第144-145页 |
| ·造血相关因子在胎肝中的表达及功能意义 | 第145-147页 |
| ·转录因子在胎肝中的表达及其功能意义 | 第147-148页 |
| 5 小结 | 第148页 |
| 参考文献 | 第148-155页 |
| 第九章 人胎盘胚外绒毛膜造血和神经相关标志物的表达研究 | 第155-171页 |
| 1 材料 | 第156-157页 |
| ·胎盘组织 | 第156-157页 |
| ·7 月龄新鲜胎儿胎盘组织小叶 | 第157页 |
| ·试剂 | 第157页 |
| ·抗体 | 第157页 |
| ·其他试剂和仪器 | 第157页 |
| 2 方法 | 第157-159页 |
| ·胎盘绒毛膜组织切片免疫组织化学染色 | 第157-158页 |
| ·流式细胞分析 | 第158页 |
| ·胎盘贴壁细胞的分离培养 | 第158页 |
| ·生长曲线及倍增时间的测定 | 第158页 |
| ·碱性磷酸酶检测(AKP 染色) | 第158页 |
| ·体外诱导 hPDACs 向神经样细胞分化 | 第158-159页 |
| 3 结果 | 第159-162页 |
| ·胎盘绒毛膜组织切片免疫组织化学染色 | 第159-160页 |
| ·流式细胞分析 | 第160-161页 |
| ·hPDACs 的形态学观察 | 第161页 |
| ·胎盘贴壁细胞免疫细胞化学鉴定 | 第161页 |
| ·AKP 染色 | 第161页 |
| ·体外诱导胎盘贴壁细胞为神经样细胞 | 第161-162页 |
| 4 讨论 | 第162-165页 |
| ·胎盘中含有大量造血干细胞,表达造血相关因子 | 第162-163页 |
| ·胎盘中表达神经细胞标志物,hPDACs 可向神经细胞诱导 | 第163-165页 |
| 5.小结 | 第165页 |
| 参考文献 | 第165-171页 |
| 结论 | 第171-172页 |
| 进一步研究的课题 | 第172-173页 |
| 致 谢 | 第173-175页 |
| 个人简介 | 第175页 |
